[转发]荧光偏振免疫分析法

近些年来，随着一系列新仪器的研制成功和新方法的建立，免疫荧光技术也有很大的改进和发展。主要有荧光偏振分析技术、荧光激活细胞分类技术、利用稀土元素镧系铕（Eu³⁺）做为标记物建立的时间分辨荧光技术以及均相荧光检测技术等。这里仅介绍荧光偏振免疫分析法的原理。

该方法是利用荧光素经单一波长（蓝光）的偏振光照射后，能吸收光能并发射出相应的偏振荧光，其强弱程度与荧光分子的大小呈正相关。

荧光偏振免疫分析常用于测定半抗原的药物浓度。反应系统内除待测药物外，同时加入一定量用荧光素标记的相应药物（小分子），使二者与有限量的特异性抗体（大分子）竞争结合。当待测药物浓度高时，经过竞争反应，大部分抗体被其结合，而荧光素标记的药物多呈游离的小分子状态。由于其分子小，在液相中转动速度较快，测量到的荧光偏振程度也较低。反之，如果药物浓度低时，大部分荧光素标记药物与抗体结合，形成大分子的抗原抗体复合物，此时检测到的荧光偏振程度也较高。根据荧光偏振程度与药物浓度呈反比关系，我们可以建立座标系。通过检测反应系中偏振光的大小，从坐标曲线上就可以精确地得知样品中待测药物的相应含量。

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