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一、仪器开/关机程序
1、开机程序
1.1 检查仪器鞘液桶和废液桶。
1.2 打开流式细胞仪。
1.3 气压阀置于加压位置，并排除管路中气泡。
1.4 打开电脑。
1.5 等待机器预热5—10分钟后可开始实验。
2、关机程序
2.1 用4ml10%漂白剂作样品，将样品支撑架置于旁位，以外管吸入2ml。
2.2 将样品支撑架置于中位，以HI RUN 5分钟，使内管吸入2ml。
2.3 将样品换成蒸馏水重复1-2步。
2.4 放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
2.5 选择Standby模式10分钟。
2.6 关闭电脑，再关掉仪器。
二、仪器校验和分析参数设置程序（FACSComp操作程序）
1、CaliBRITE Beads 的准备
1.1 在装有1ml鞘液的FALCON管加一滴充分混匀CaliBRITE Beads，并标上unlabeled；若配有双激光做四色，则须在unlabeled管中再加一滴APC-beads；
1.2 在另一装有3ml鞘液的FALCON管加入unlabeled-、FITC-、PE-、PerCP-、和APC-beads（若做四色）各一滴，混匀，在管壁上标上mixed（PerCP不很稳定，最好在上机前加入）；
1.3 避光放置，准备上机。
2、软件环境的设置
2.1 从苹果菜单进入，选择FACSComp软件；
2.2 在Sign In视窗中填入下列信息：操作者、机构、实验室主任（操作者是必须填入的，计算机将保存这些信息），点击Accept；
2.3 进入Set Up视窗，在Assay Selection中，选择你需要的Assay：Lyse/Wash、Lyse/No Wash或HLA-B27 Calib；在CaliBRITE Beads Lot Ids中，根据每一种beads所对应的编码输入Lot ID；在Automatic Saving Options中，你可以选择自动保存或不保存Summary Report，你可以通过单击Location来更改文件名以及保存的位置；最后在Set Up视窗的右下角点击Run。
3、Beads的检测
3.1 将功能键放在RUN的位置，流速设成HI，将混匀的标有unlabeled的试管放在支撑架上，点击Start，开始调节PMT，如软件在unlabeled试管中测到APC-beads，则在PMT调节完后，马上进行时间延迟的调校；如果调试成功，会出现“Time Delay Calibration was successful”，然后直接进入补偿视窗；如果调试不成功，你有5秒钟的时间决定是再试一次，还是重复开始的PMT调节，或是继续到下一步调节补偿；若你在5秒内还没有决定，软件自动进到补偿的视窗。如果你在时间调校失败的基础上继续补偿的调节，那么你所得到的FL3-%FL4和FL4-%FL3的值会有较大的变化；
3.2 在支撑架上换成混匀的标有mixed试管，点击Start，开始调节补偿，补偿调试成功后，FACSComp自动进行灵敏度调试，点击Start，开始调试灵敏度；调试完成后，软件计算结果，并将所有的结果都保存于Calib File或Calib File.LNW中，同时给出Summary Report；
3.3 从支撑架上移走装有beads的试管，换上蒸馏水，并将功能键换成STAND BY。
三、仪器操作程序
1、抗体标记
1.1 取FALCON管加对应荧光抗体，再加标本，涡漩振荡数秒；
1.2 避光室温放置20分钟；
1.3 加1×溶血素2ml，涡旋振荡数秒；
1.4 避光室温放置15分钟；
1.5 离心，1000 rpm×5分钟、室温；
1.6 弃上清后加2 ml PBS，涡旋振荡数秒；
1.7 离心，1000 rpm×5分钟、室温；
1.8 弃上清后加0.5ml PBS，准备上机。
以上为全血标本，如是细胞培养液则无需加溶血素，直接1.6-1.8操作；如是全血不洗标本则加定量的溶血素，避光室温放置15分钟后，直接上机。
2、流式细胞仪分析
2.1 从苹果菜单进入，选择操作软件；
2.2顺序输入样本姓名，点击Run Tests，得到分析结果。
三、维护保养
1、每日保养
1.1 用4ml10%漂白剂作样品，将样品支撑架置于旁位，以外管吸入2ml。
1.2 将样品支撑架置于中位，以HI RUN 5分钟，使内管吸入2ml。
1.3 将样品换成蒸馏水重复1-2步。
1.4 放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
1.5 选择Standby模式10分钟。
1.6 关闭电脑，再关掉仪器。
2、每月保养
2.1 将10%漂白剂装入鞘液桶。
2.2 旁路鞘液过滤器,以防损害。
2.3 将盛有3ml10%漂白剂的试管置于样品支架上,以HI RUN 20-30分钟。
2.4 将鞘液和样品换成蒸馏水重复步骤2.3。 | 
