[转帖]自动血球计数仪工作原理及故障排除

[摘 要] AC-900型自动血球计数仪是一台全自动的血液学分析仪器，其细胞检测采用电阻法完成。它的关键部件是一个镶嵌有70μm微孔的转换器，在使用过程中最容易发生的问题就是堵孔现象。本文介绍了一个因堵孔引起的特殊例子的故障排除方法以及其经验教训。 [关键词)血球计数仪；电阻法；微孔；堵孔 AC-900型自动血球计数仪是一台全自动工作的血液学分析仪器，可测量16个参数，如：RBC、MCV、PLT、MPV、WBC、HCT、HGB、MCH等。结果和信息送到显示器显示，并在打印机上打印出带有日期、时间和序号的结果和信息。AC也可以外接一台计算机。所有机内系统设计成便于维修保养的单元组件结构。每次测量周期完成后自动清洗液路系统。 AC采用电阻法进行细胞计数和细胞尺寸测量，并采用光学比色法测量血红细胞。一台微处理器自动地计算红细胞的各项指标并修正巧合的通道损失。红细胞、血小板和白细胞检测是采用在转换器的微孔里产生电阻的方法完成的。当一个细胞随液流吸人加有恒定电流的外电极与内电极之间的微孔时，两电极之间的屯导率发生变化，并同时产生相当的电压脉冲，该脉冲的幅度与该细胞的体积成正比，脉冲的个数与被检测到的细胞个数相当。每一个检测脉冲被放大并与比较器设定的参比电压相比较，该比较器调整得仅接受预先设定幅度的信息。AC具有低电子比较器和高电平比较器以设定上、下体积极限。为接受每一个检测到的信号，放大了的脉冲必须大于低参比电压并小于高参比电压。红细胞、血小板和白细胞计数测量都基于精确的稀释体积。用于计数的总体积由三个光检测器之间的距离确定，光检测器安装在称为测量管的精确柱体上。在每一个测量周期中，真空泵抽吸稀释了的标本通过测量管，当测量管中凹形液面通过起始测量管的光路时，检测器电压发生变化并激发计数电路。仅当计数电路激发后，检测到的脉冲才被接受并由比较器进行累计。当凹形液面到达停止检测器的光路时，该检测器的电压发生变化，并关闭计数电路。在测量过程中，两个或多个细胞可能会同时进人计数微孔，相对应的电导率改变被当作具有高脉冲幅度的单个脉冲被检测到，结果导致丢失一个或多个的脉冲。这种脉冲数的减少被称作巧合通道损失，在统计学上可预测，它与计数微孔的有效体积以及已稀释的样品的浓度有关。AC的微处理器自动修正RBC、PLT、WBC计数的巧合通道损失。 由其工作原理可知，AC的一个至关重要的部件是镶嵌有70μm微孔的转换器，内置有氯化铂电极，外有不锈钢电极。微孔的通畅与否及其精确度直接关系着计数的完成与计数的精确度。仪器最常见、最棘手的问题就是堵孔问题，AC设置有电烧电路，自动消除微孔上的蛋白质，可有效地减少堵孔的发生。堵孔的原因复杂多样，如：环境不清洁、微孔管清洗不经常或不彻底、计数杯清洗不干净、采血时用棉球消毒及止血，棉纤维堵孔、采末梢血时用力过大，混入较多的组织液、溶血素不足等。 仪器应制定良好的保养制度，配有专人负责。上机前要仔细阅读仪器说明书，接受良好的培训，要对仪器的原理，操作规程，使用注意事项，报告的含义，引起实验误差的因素及维修保养有充分的了解和认识。要严格执行每天、每月、每季的保养工作。AC每天工作结束前应在两个样本中各加人10％的次氯酸钠液当作样品进行测定。必要时可用高浓度次氯酸钠液浸泡微孔。良好的保养有益于仪器的使用，否则会造成不必要的麻烦和不良影响。 下面就详细介绍一例由于使用不当或保养不良所造成的故障及其经验教训。 故障现象：RBC、PLT、WBC测量时出现CLOG。 故障分析与维修：故障机由一个乡镇医院提供。此前已按说明书进行过清洗及故障排除工作，但效果不好。打开机盖后进行空白测量，观察到测量管液面上升十分缓慢，真空泵运转，M12电磁阀有明显的吸合与释放动作，捏死测量管上方的胶管，真空泵自动停转，显然没有漏气现象，说明真空泵及电磁阀是正常的，故障应由计数微孔严重堵塞引起。同时观察到溶血素注射器内进入的溶血素极少，致使测量WBC时比色池液体量极少，出现BUBB现象。溶血素泵转动正常，注射器有正常的吸液及推注动作。 用20％的高浓度次氯酸钠溶液注入比色池内浸泡计数微孔。同时拆下溶血素注射器上的三通阀进行检查，发现其已老化，更换后溶血素进入正常。三通阀堵塞也会造成溶血素量减少，可用清水浸泡清洗再用。进入服务程序中TEST CAPIL LARY CLEANING以及SINGLE COUNT AND TIMING进行多次操作，再用稀释液做多次测试，但空白值仍然不能接受，且不时出现CLOG现象，说明微孔仍有部分堵塞。此多为孔壁上有顽固粘贴物引起，可见堵塞十分严重。经多次用高浓度次氯酸钠溶液浸泡，反复进行人工或机器内部排堵后，空白测量和质控测量才达到要求。故障排除。 故障原因分析及教训：从上述可知，溶血素三通堵塞应是始作俑者，其堵塞导致了溶血素进入样本不足，溶血不足的样本进人微孔后致使蛋白质严重堵塞微孔。据仪器使用人员反映，故障前已发现溶血素进入不充分的现象，但没有及时采取正确处理的措施，直到仪器彻底不能工作才意识到问题的严重性。但已造成了工作的停顿，产生了不必要的不良影响及经济上的直接损失。由此可见，严格遵守操作规程与及时恰当的仪器保养是必需的，严格的管理与良好的培训是必需的，只有如此才能保证工作的顺利进行以及减少经济上的损失。