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PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。
为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下(表22-5);这些仪器主要用变温铝块、变温水浴及变温气流的方式达到热循环的目的,各有其优缺点。国产1109型DNA扩增仪则是用恒温浴机械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B体积小,智能化与自动化程序高,可以兼做套式PCR,方便实用。以上各种仪器一般都配有微电脑自动控制温度、时间及循环数,可以达到节 省劳动力的目的。在采用这些仪器作PCR试验之前,一般均应实测管内温度变化循环情况,以了解升、降温时管内因热传导造成的温度滞后情况和实际到达的最高、最低温度,用于修正设计的循环参数。温度滞后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形状(与铝块孔匹配程度)的影响,这对变温铝块式仪器影响更大些。对于配用制冷机式半导体元件致冷的仪器,在使用低于室温的温度来保冷PCR反应后小管时,应注意冷凝水的问题,勿使流入仪器内浸湿半导体元件而损坏仪器。
表22-5 国内外生产的几种DNA扩增仪
仪器型号 |
生产厂家 |
型式 |
特点 |
管数 |
报价 |
1109型 |
北京新技术所与军科院联合 |
机械臂
变温水浴 |
电子调温 |
40×0.5ml |
16400元/台 |
90A/B型 |
中科院遗传所 |
机械臂
变温水浴 |
电热 |
|
14000元/台 |
PTC-51A/B型 |
军事医学科学院 |
变温气流 |
电子调兼作套式 |
30×0.5ml |
12000元/台 |
DNA Thermal Cycler |
Perkin –ElmerCetus(美) |
变温铝块 |
压缩机致冷 |
48×0.5ml |
US $ 20000.- |
Thermocycler
#60
#00
#180 |
B..Braun
Biotech
(德) |
变温水浴98℃四档 |
电热,自来水冷却 |
60×1.5ml
100×1.5ml
180×1.5ml |
DM 30000.- |
Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin Block |
Ericomp Inc.(美) |
变温铝块25~100℃ |
电热,自来水冷却 |
29×1.5ml
58×1.5ml |
US $4985.-
US $7980.- |
Grant Autogen |
Grant Instrumant Ltd(美) |
变温水浴0~99℃ |
电热,自来水冷却或加冷循环器 |
50×1.5ml
or
50×1.5ml
|
US $250. –plus
US $ 15.-for
Rack(x2) |
Techne PHC-1
PHC-2 |
Techne Ltd.(英) |
变温铝块0~99℃三档 |
电热500W水冷100W |
54×0.5ml
54×0.5ml
24×1.5ml |
£3383. –
£3997. - |
BioOven |
BioThrm Corp(美) |
变温气流
-150℃ |
115V 11A |
200’s of 4×96plate |
US $ 2990. - |
Trio-Thermo-block TB-1 |
Biomertra(德) |
半导体变温 |
220V |
3×20管
分别控温 |
DM12900. - |
Micro cycler E |
Eppendorf(美) |
变温铝块 |
220V/100V |
3×29管 |
US $ 3500. - | |