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谈MaxM血球仪的五分类技术原理和故障分析方法
美国贝克曼库尔特仪器公司生产的五分类血球计数仪,除了ACT 5 Diff型号采用染色法以外,其余的,如MaxM,HmX,STKS,Gen’s,HL700系列等均采用流式结构的VCS分类技术。
VCS中S代表激光散射性,反映细胞在聚焦点时的形状和表面特性,与细胞的皱折和表面积大小有关; C是射频传导特性,由流式池内的双电极加高频电流测得,主要反映细胞的核质比大小;V是双电极的直流特性,即利用库尔特原理测量出原态白细胞的体积大小。
下图中从sample in流进的血液,只有原态大小的白细胞。这是因为,由分血片采集到的用于五分类的28微升血样,先与Erythrolyse溶血素试剂混合,其中的红细胞和血小板被pak lyse胀破溶解掉,同时所有的白细胞也已经涨大,但它们马上又与Stabilyse(pak preserve)溶血素混合,将涨大的白细胞收缩回原态大小。
每次原态白细胞的VCS测量,在MaxM的流式通道中进行,共计数8192个颗粒。这里面可能会含有未溶解的红细胞,大血小板和一些试剂杂质。所以实际测量到的白细胞数量,最多只能为8192个,并且白细胞数量占8192的比重,越大越好。这8192个颗粒通过流式通道的时间,MaxM认为应该与白细胞的总数有关。最优化的时间为白细胞总数去除63。假设此样本的WBC值为6.3,那么它在流式池中通过的最优化时间应该为10秒钟,优化时间范围在9-11秒。(10±1秒)。
*如果在超出优化时间50%以上,仍未数到8192个颗粒,就会报PC1错误。
出现这种情况一般为流式通道堵塞所致,通常用次氯酸做个消毒程序(Disinfection),可以解决。
*如果在小于1秒钟时间内,马上数到了8192个颗粒,MaxM会认为白细胞通过流式通道的速度太快,机器会报PC2错误。
这种情况下,产生的原因一般是8192个微粒中,有许多未被E-lyse溶解掉的红细胞和血小板(并且占大多数),即pak lyse基本不起作用。孕妇,肾病人血样等会经常出现这种PC2情况,原因是这些样本的红细胞壁太厚,在pak lyse作用下很难涨破。适当增大pak lysel泵入量,可以大大减少PC2报警率。但有一少部分血样需要被稀释后,再测量出五分类的百分比数值。
但是,如果鞘液流动出现问题,也会同样造成PC1和PC2错误。
这一般是由上,下鞘流的液阻堵塞造成。如果上部的液阻(6英寸负压调节器旁的螺旋细铁管)堵塞,会有PC1故障。下面的液阻(mixing chamber旁的细软管)堵塞,会有PC2故障。
还有一种情况,在没有任何报警下,机器不报告五分类结果。显示…..,遇到这种情况,先做一个乳胶质控(Latron Control 2),看一看V,C,S的增益值和CV值是否在控。它们的增益可以分别用电位器R17,R26和R8来调节,c的cv值可以通过更换RF射频电子管来满足要求,s的cv值由TTM的激光束聚焦位置决定(一般在出厂后,无需再调整)。
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