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血细胞分析仪的性能评价
现代科学技术和基础医学的发展,传统的手工检测血细胞指标的方法,已经被日趋完善的电子血细胞分析仪所取代,大大提高了工作效率和检验的准确程度。在众多品牌和档次的血细胞分析仪中,本文对其原理进行初步分析评价,供仪器选型时参考。
一、血细胞分类:
血细胞分类主要有以下两种。
(一)形态分类:
1、 利用整形的激光束照射血细胞,通过折射、透射、反射后的激光束进行收集整理并转换成相应数据。
2、 利用高频波反射,收集信号转换成数据。
(二)粒子分类:
根据电阻法原理,通过电流变化所产生的脉冲大小和数量获得对应的血细胞分类和数目。
形态分类是维持血细胞近似原生状态下进行测定的,较为准确可信,其分类可达五项以上。粒子分类是破坏血细胞的原生状态,将细胞膜打孔,排除细胞质,将膜紧裹核,测定核的大小,故称粒子分类。严格地说粒子分类是一种筛选法,其分类局限在三类以下。
二、电阻法原理:
目前国内多数医院使用的血细胞分析仪多数为粒子分类-电阻法。分析仪的血细胞计数池对半隔开,中间留有一个红宝石孔,左边接负电极,右边接正电极,由此形成相应的额定电流。由于血细胞不导电,在通过宝石孔时形成一定的阻值,细胞大则电阻大;细胞小则电阻小。根据欧姆定律,血细胞的流动引起电流变化,其额定电流与所测的电流之差,经A/D转换并放大后形成脉冲信号。一个脉冲即为一个细胞数,大脉冲为大细胞,小细胞为小细胞。这些脉冲信号经电路处理,得到血细胞的总数及各类细胞的百分数。
三、两种定量法:
在分析过程中,血液的进样量控制极为重要,定量准确是保证精度和重复性的根本所在。
1. 容量定量法:
利用两组光电传感器监测血样容量。血液流入定量管触发上端,传感器开始对血细胞计数,流至下端,触发传感器停止计数。上下两组光电传感器定位的同时确定了被测血细胞的总容量。
2. 时间、压力定量法:
即确定计数时间和额定负压,以恒定的流速和时间作为定量。
由于容量定量法不受时间、流速的影响,仅取决于传感器的定位准确性,因此这种定量比较可靠。压力定量法取决于流速恒定,而流速依赖于负压的稳定,负压又随电压的变化而变化,由此可见容量法的稳定性和可靠性均高于压力定量法。
四、防返流装置
定量进样是准确测定血细胞指标的重要条件,如果血细胞计数池内缺乏防返流装置,同样会造成测量误差。一般血细胞分析仪有两个计数池,即红细胞计数池和白细胞计数池。每个计数池都有一个红宝石孔,内嵌有电感应片,一个血细胞通过宝石孔感应区即可引发一个脉冲。由于宝石孔径小至80—100微米,在负压引流的作用下,容易引起液流旋涡。血细胞在通过宝石孔后,若被旋转涡流重新推回感应区,将会重复引发一个脉冲,造成重复计数,再乘以稀释倍率误差将随之增大。
宝石孔后设置栅栏可有效地避免血细胞返流。栅栏孔和宝石孔两孔相对应,不仅可避免返流,而且可形成流体力学上的中央通道,确保所测脉冲波的正常幅度。
五、堵孔处理方式
计数池中的宝石孔非常微小,如果血样处理不当或仪器设计欠佳,极易出现堵孔现象,为此排堵方式的选择极为重要。目前常用仪器排堵方式有两种。
1. 化学排堵法:键钮引发电流短路,通过电火花烧灼,将血蛋白变性,然后用冲洗液冲洗排堵。
2. 物理方式:发生堵孔后,用正压和负压高压冲洗,清除血栓,排除堵孔。
所有此类应设置防堵功能。屏幕应能显示计数时间,一旦提示超时间计数,表明流速变缓,即将出现堵孔,应提前用除蛋白酶清洗,可有效地避免或减少堵孔现象。
六、电脑软件
功能完善的电脑软件会给临床应用带来极大的方便,一般认为电脑软件应具备以下功能:
1. 报警提示功能:当出现异常细胞时,应即报警。
2. X/B功能:自动统计具有相关性的红细胞数据,在外源质控缺乏时,可以此做机内质控,获知仪器正常与否。
3. 综合报告的功能:自动统计每天所测的全部报告资料,打印备查。
4. 故障显示:利于故障查询和排除。
作者单位:青岛市疾病控制中心 (266033) |