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郑振寰 发表于 2002-10-6 20:44 | 显示全部楼层 |阅读模式

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Sysmex SF-3000 血液细胞分析仪应用评价 潘柏申 王玉亭 林镇海 冯仁丰 金大鸣

  近年来,可以对血液细胞的多种组分(包括白细胞的五种组分)进行分类计数的自动血液细胞分析仪已陆续在市场出现,并开始进入了医院的检验科室。运用这类细胞分析仪,大大减少了对显微镜目测白细胞分类计数的需求,在保证检测质量的前提下减轻了劳动强度,使检测效率显著提高。Sysmex SF-3000血液细胞分析仪(以下简称SF-3000)是最近在市场上出现的这类分析仪器之一,它可对血液细胞的多种组分(包括白细胞的五种组分)进行定量分析。其中红细胞和血小板运用电阻法检测;血红蛋白采用十二烷基磺酸钠(SLS)法检测;白细胞则分经DIFF和WBC/BASO两个检测通道,采用了流式细胞仪的工作原理和半导体激光技术进行测定。每一测定分析可提供23项有关参数,样品结果如有异常,在输出时能分别以分布图和文字给予提示。最近,我们对该仪器进行了评估,现将结果报告如下。   一、材料与方法   1.仪器:(1)Sysmex SF-3000血液细胞分析仪:日本东亚医用电子仪器有限公司生产。(2)Olympus显微镜:日本欧林巴斯光学工业株式会社生产。(3)UV-754分光光度计:上海第三分析仪器厂生产。   2.试剂:(1)SF-3000所用测定试剂以及EDTA-K2抗凝真空采血管,由日本东亚医用电子仪器有限公司提供。(2)其他手工测定血液细胞方法所用试剂,均为市售的分析纯试剂。   3.样品:静脉血(以EDTA-K2抗凝),分别采自工作人员中的志愿者、体检未发现异常的健康人以及部分本院住院患者。   4.SF-3000主要性能评估方法:(1)精密度测定:志愿者静脉血标本6份,每份标本重复测定10次。(2)线性测定:高浓度的血标本逐倍稀释,不同浓度样品以SF-3000分别测定红细胞、血红蛋白、红细胞比积、白细胞和血小板。每种浓度(包括高浓度)的样品各测定5次,取其均值为测定值。高浓度样品测定值除以相应的稀释倍数所得到的商为理论值。(3)测定结果与手工方法比较:体检未发现异常的健康人静脉血标本共200份,分别使用SF-3000和手工操作方法进行血液细胞的分析测定。测定采用双盲法进行。SF-3000的操作按生产厂商的操作手册要求进行;手工操作方法按照《全国临床检验操作规程》[1]进行。①白细胞分类计数:参照NCCLS H20-A文件[2]的要求进行。200份样品以SF-3000进行测定;同时将同一份样品制成血细胞薄膜涂片,由2名具有丰富临床血液学检验经验并经过考核合格的中级技术人员进行显微镜目测白细胞分类计数,每人分别独立对每份样品的薄膜涂片进行白细胞分类计数200只细胞,求出平均值,然后与SF-3000的测定值进行比较。②血红蛋白测定:30份样品分别以SF-3000(采用SLS法)和手工氰化高铁(HiCN)法测定[1](UV-754分光光度计上进行),并进行比较。(4)携带污染率:参照ICSH推荐的方法[3]进行。测定红细胞、血红蛋白、红细胞比积、白细胞和血小板5个项目。先取高值样品用SF-3000连续测定3次,随后立即连续测定低值样品3次。计算公式:携带污染率(%)=L1-L3/H3-L3×100%。其中的L1、L3分别为第1次和第3次低值样品的测定结果,两者相减所得的差取其绝对值;H3为第3次高值样品的测定结果。(5)形态异常血液细胞的检出能力:另取住院患者的抗凝静脉血标本共94份,以SF-3000测定;同时将同一份抗凝静脉血制成血细胞薄膜涂片,显微镜目测进行形态观测,然后比较两者的形态异常血液细胞的检出情况。   二、结果与讨论   1.SF-3000精密度测定:测定结果表明,SF-3000对血液细胞各组分的分类测定具有很高的精密度,测定所得的变异系数达到厂商设计规定的要求。   2.SF-3000测定线性(表1):结果表明,评估选用的线性范围与SF-3000的设计要求基本一致,能满足临床需求。

表1 SF-3000线性测定结果(Image106.gif (850 bytes)

项目 测定范围(单位) 斜率(a) 截距(b) 相关系数(r)
红细胞  1.07~ 8.17(×1012/L) 0.991 0.099 0.999
血红蛋白 33.0 ~257.8(g/L) 0.995 1.696 0.999
红细胞比积  9.9 ~ 74.4(%) 0.989 1.074 0.999
白细胞  3.84~114.1(×109/L) 0.995 1.087 0.999
血小板 41  ~1212(×109/L) 0.998 3.278 0.999
  注:表中的理论值为X;SF-3000的实测值为Y

  3.测定结果与手工方法比较:(1)SF-3000与人工显微镜下目测进行白细胞分类计数的200份样品测定结果比较(表2),二者有很好的可比性。   (2)SF-3000(SLS法)与HiCN法测定血红蛋白的30份样品测定结果比较:两种方法测定的相关性很好,r=0.999。   4.SF-3000携带污染率(表3):SF-3000携带污染率实际测定值均低于1%,完全满足设计规定的要求。   5.形态异常血液细胞检出情况(表

表2 SF-3000与显微镜目测的白细胞分类计数比较(n=200)

项目 测定范围(%) 斜率(a) 截距(b) 相关系数(r)
中性粒细胞 27~80

1.044

-3.159

0.989

淋巴细胞 12~58 1.037 -1.304 0.988
单核细胞  2~ 7 1.616 -0.464 0.837
嗜酸性粒细胞  0~10 1.047 -0.126 0.966
嗜碱性粒细胞  0~ 2 0.583 0.433 0.794
  注:表中显微镜目测的白细胞分类计数值为X:SF-3000的测定值为Y表3 SF-3000携带污染率测定结果

测定项目 L1 L3 H3 携带污染率(%)
红细胞

2.20

2.16

6.18

0.995
血红蛋白 66 67 202 0.741
红细胞比积 21.1 20.8 60.3 0.759
白细胞 4.50 4.56 21.22 0.360
血小板 57 58 312 0.393
  注:SF-3000设计规定的携带污染率<1.5%表4 SF-3000和显微镜目测 形态异常血液细胞检出情况

显微镜目测 SF-3000
异常细胞 检出数 未发现异 常细胞数 合计
异常细胞 检出数 34  0 34
未发现 异常细胞数 10 50 60
合计 44 50 94
4):据此可得出SF-3000对形态异常的血液细胞检出能力的有关预示值分别为:假阳性17%;假阴性0%;检出灵敏度100%;检出特异性83%;阳性预示值77%;阴性预示值100%;检出有效率89%。   上述样品中所包括的病种有各种急性白血病36例(包括急性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、急性单核细胞白血病)、慢性粒细胞性白血病7例、淋巴瘤15例、多发性骨髓瘤11例、真性红细胞增多症4例、粒细胞缺乏1例、骨髓异常增生综合症7例、全血减少2例以及多种感染性疾病9例、消化道出血伴发热2例等。患者有的刚发病,有的正接受治疗,有的经治疗后病情已趋于缓解。94例中显微镜目测细胞形态无异常的有60例。   SF-3000仪器的设计新颖合理,具有良好的技术性能,检测灵敏度较高。需要指出,目前的血液细胞分析仪检测血液细胞的方法(无论是采用电阻法或激光技术还是其他技术),与显微镜目测观察细胞形态的方法不同,还不能完全替代显微镜目测观察细胞形态。因此,血液细胞分析仪检测形态异常细胞时的作用仍然是筛选,对提示检测结果异常的标本仍应按照操作规程认真进行显微镜目测复核。   流式细胞仪在医学检验领域中已占有重要地位,成为一种被广泛应用的工具。SF-3000采用流式细胞仪的工作原理和半导体激光技术,具有所需能源少,寿命长,启动后可立即工作等优点;由于SF-3000所用试剂不含氰化物等毒性物质,仪器所产生的废液无需对其作特殊处理,有利于环境保护;此外,SF-3000工作效率高(每小时可分析80个样品)、测定成本低、结构小巧,可以对血液细胞的多种组分包括白细胞的五种组分进行分类计数,并具有优良的技术性能,是一种值得推广使用的较理想的血液细胞分析仪。

参考文献

 1 叶应妩,王毓三主编全国临床检验操作规程..南京:东南大学出版社,  2 PA 190871992.  3 England JM, et al. Guidelines for evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte counting and cell marker applications. Clin Lab Heam, 199416157-174. 作者单位:200032 上海医科大学中山医院检验科(潘柏申、王玉亭、林镇海);上海市临床检验中心(冯仁丰、金大鸣)

(收稿:1997-12-25  修回:1998-05-21)

(本文编辑:张莉)

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[此贴子已经被作者于2005-3-24 21:47:49编辑过]
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nhlzhhl 发表于 2015-3-23 14:10 | 显示全部楼层
哈哈,郑老师这个贴顶下
yeeb 发表于 2020-8-6 10:25 | 显示全部楼层
感谢版主
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