[转帖]Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪 SOP

时间分辨荧光免疫分析法(Time-resolved fluoroimmunoassay)是在荧光分析的基础上发展起来的一种特殊的荧光分析。它利用具有长效荧光的稀土金属（Eu、Tb、Sm、Dy）作标记物，充分利用激发光与发射光之间的降移与发射光较长的半寿期，在激发光后延时测量发射光的强度。从而所测的荧光不受激发光和被检物中的非特异荧光干扰，提高了检测的特异性与灵敏度。在激发光后延时400微秒，测量400微秒，间歇200微秒后进入下一个测量周期，每一个周期为1000微秒。对每一个样品实施1秒钟的测量，意味着完成了1000个周期的测量，测量精确度极高。　

（一）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  开/关程序

1  开机

1.1 依次打开样品处理器电源，微孔板处理器电源，打印机电源。

1.2 打开计算机显示器。

1.3 启动计算机。

1.4 运行系统软件： Auto DELFIA与Multicalc系统软件在Windows启动后自动运行。Auto DELFIA workstation软件用于控制Auto DELFIA的运行，MultiCalc的主要功能是与主机通讯，对测试结果进行评估和对质控及其他数据处理（可通过双击屏幕上图标不运行）。在MultiCalc Auto DELFIA环境下，只有键盘有效，鼠标无效。

2        开机后准备

1.1 清洗液准备

1.1.1 微孔板处理器洗液（250ml浓缩液＋600ml去离子水混合），每做一块板至少1升用量，洗液在密闭条件可保存2周时间。

1.1.2 准备样品处理器洗液（50ml浓缩液＋5000ml去离子水混合），每做一块板至少需要800ml洗液，洗液在密闭条件下可保存1周时间。

1.2 样品处理器准备

1.2.1 在Wash bottle（清洗液瓶）、Rinse bottle (冲洗液瓶)分别注入足够用量的清洗液和去离子水，倒空废液瓶。拧紧各瓶盖，确保废液瓶管路向下。

1.2.2 如样品需要稀释，放入稀释杯和稀释液。系统安装时已调好有71ml和190ml两种规格的稀释杯，若使用71ml的稀释杯，从最右端开始放置，如有预处理样品，则不能使用190ml的稀释杯。不能使用多个稀释杯。

1.3 微孔板处理器准备。                            

1.4 点击Load菜单下的Load System Liquids选项Option-Show Tempareture显示温度和压力。当管路内有压力时，不要打开瓶盖。

1.5 点击Maintenance → Plate Processor → Washer test，检查洗板机功能，系统自动提示检查步骤。

1.6 在试剂舱内插入足量干净、不弯曲的吸嘴。

1.7 装载足量干净的稀释杯，每一稀释杯分为两半，可做两次稀释，总共有24个稀释位。

1.8 检查检测帽（白色）是否放入试剂舱最左边第一个帽架位置，并且其他位置没有黑色防蒸发帽。

1.9 确认传送器下方的废物盘已倒空。

1.10 检查两瓶增强液是否足够（一瓶可做8块板），通常先换右边的瓶子，但如左边瓶内溶液少于1/3，则两瓶均须更换。增强液瓶内有压力，必须拧紧盖子。必要时使用Maintenance菜单下的 Enhancement solution flush 命令灌注管路。

1.11 校准品：每瓶hAFP和βhCG校准品瓶中精确加1.1ml去离子水，轻轻混匀，30min后去除泡沫使用。需再次使用的校准品保存于-20℃。

1.12 Eu/Sm标记物溶液：在使用前1h，根据每条板条（12孔）需30μl标记物和30ml缓冲液配制标记物溶液。

3  关机

3.1 关闭微孔板处理器电源。

3.2 用探针支架支撑探针架防止损坏，关闭样品处理器电源。

3.3 退出Auto DELFIA系统软件，退出MultiCalc软件。退出Windows。

3.4 关闭电脑电源。

（二）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  分析参数设置程序

1  检验项目设置

1.1 在操作主界面点击Settings菜单 → 选择Assay Protocols（检验项目）。

1.2根据需要选择校准曲线、样品复管数、批号和质控。使用新批号试剂时，则更新批号。如果选择了参考曲线，批号改变后系统自动提示需做一条新的曲线。

1.3 若欲将结果存到LIS系统中，确认在MultiCalc中Protocol的 Stored  Files里选择Results，并选择Resulte格式。

1.4 如果要做双标，须先做溢出纠正因子校正（详见维护保养部分）。

1.5 如果做新生儿筛查，在Settings菜单系统子菜单下选择新生儿筛查。

编辑检验项目、校准和质控。

1．在主界面鼠标点击Settings菜单，选择Assay protocols →    如 Screening →    AFP-BHCG →     Edit  。

2．进入Assay protocol editor 对话框。输入相应的批号，根据试剂说明书上标注输入正确的校准品浓度值。

（三）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  校准程序。

1.1选择校准模式：有7种不同的选择，在屏幕左边从上到下依次是①每一测试块均做标准曲线；②第一块测试板做标准曲线，其余的做两点校正；③第一块测试板做标准曲线，其余不做校正和校准；④每一测试板均做两点校正；⑤第一块测试板做两点校正，其余不做校正和校准；⑥不做校正和校准，使用上一次标准曲线；⑦不做校正和校准，使用MultiCalc中设定的参考曲线。

1.2 如果还有其他需要，可更改校准品数目。例如要求第一块板做标准曲线，其余的做3点校正，则选择第二项，然后在“Next Plates”下选择相应的3个标准即可。

1.3 如果做双标（Dual Label Assay ），例如AFP＿βhcg，则无法更改校准品的数目，只能修改浓度值。双标有A-Protocol和B-Protocol两种协议，要更改B-protocol的浓度值，点击屏幕右下角的  B-protocol 键。弹出新对话框，可修改校准品和质控浓度值，然后按  OK 保存退出。返回到Assay Protocol Editor对话框。

1.4 复管数：在屏幕右下方点击  Replicates  ,输入校准品、质控品及待检标本的复管数，按 OK

保存，返回Assay Protocol Editor对话框。  

1.5 在Assay Protocol Editor对话框输入校准品批号，输入正确的校准品浓度值。

1.6 进入Map Of Standards 对话框，拉出校准品抽屉，按屏幕提示顺序依次放入校准品，放好后

合上校准品抽屉，按OK 。

使用后，校准品立即放置于4℃冰箱内保存。校准品打开后最多使用二次。在标准抽屉内一次最多可放8个项目的校准品。

1.6  运行

（四）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  室内质控程序

1.1 点击屏幕右边 Controls进入Controls 界面，输入质控的允许范围（目标值±2S）、质控代码、质控批号，必要时在Dil中输入质控稀释倍数。

1.2 在屏幕左边Controls栏选择质控做在第一块板或下一块板或最后一块板。在屏幕下部的测试板图上已显示有校准品。在屏幕右边Control Operation 栏中选择所用的质控水平（Low、 Medium、High、Control 4～5），然后移动光标到板上所要放置的位置。

1.3 必要时选中Move Control、Delete control对质控进行移动和删除操作。

1.4 然后按 OK键完成编辑,按 Close键保存。

1.5  运行

三、运行

1  工作前准备

（二）创建工作表

在以上准备工作完成后，有两种方法检测。即点击AutoMate（自动操作）键，系统会按预定的程序执行。或选择Load Worklist 或Create list一步一步运行。在Auto DELFIA软件中创建工作表，还可在已存在的工作表中添加样品：用鼠标点击空位置，然后输入所须的项目即可。（如果试管已经放入样品处理器中，则不能添加项目）。

3．2．1编辑试管架图

1．  在主屏点击Create list图出现Analytes & samples 和Sample Racks 两个对话框。

2．  进入Sample Racks（样品架图），点击想添加样品的位置，会出现一红方框。注意要确保选择的位置与试管架上样品的实际位置对应。

通过对话框下方的按键可实现以下功能：

●     点击  Plate Map 看微孔板图。

●     选择一试管，然后点击 Del Tube删除该管检测。

●     Print打印样品信息。

3．在屏幕试管架图最后一排编号为73的单独试管架，是质控架，如已在检验项目中设置了质控品，则自动显示在质控架上。

3．2．2 移动试管架

1．在想插入试管架的编号区输入希望的试管架编号，则该位置上插入了你输入编号的试管架，其余试管架相应后移。

2．如不使用1号试管架，则必须移动试管架或将试管直接编制到适当的试管架上。

3．2．3 移动质控架

如要把质控放到其他试管架，在当前质控架73编号区输入想放质控的编号。如把73号改成40号，则40架号成为质控架而原质控架73号变成普通的样品架73。

3．2．4 移动试管

用鼠标点住想移动的试管，将其拖到需要放的位置，然后释放鼠标。

在试管架图左下角显示出鼠标位置、试管数和稀释液位置（从右到左排列）。完成试管架安排后，点击Close，关闭Sample Racks 对话框。

3．2．5 项目和样品

1．  在Analytes & samples对话框中，在Analytes栏中选择检验目的

2．  在屏幕右边的下拉菜单中选择测试项目。Screening的下拉菜单中只显示已校准的测试项目。

3．  选择合适的试剂盒（1板或4板）及程序（不同温育时间）。

4．  选择合适的运行序号，按OK 。进入Sample 对话框。

注意：                                

l         在设置菜单中选择了新生儿筛查后，才能按需要间歇振荡筛查项目。

l         如果在系统设定中选择了下一管，则需要预处理的实验将不显示。

5．在Sample 对话框的Code区输入相应的样本ID号，连续样本以2个点（..）连接起始ID号与未尾ID号，即xx..xxx  。点击 Accept 或按ENTER键。

6．在样本类型栏中选择合适的试管，否则吸样探针会吸错位。

7．确认前可在项目列表中双击项目名称以删除测试；如果已按Accept键，可在微孔板图中删除管。

8．已经确认后也能增加测试样本。包括使用微管稀释样品添加测试项目，但系统设定中选择下一管或下一架，则不能添加。注意不能更改已确认样品的稀释状态。

9．确认后，样品架图上选中的试管位颜色发生改变，绿色为样品、浅兰色为用来稀释样本的空管或经稀释的质控或经预处理的标准、红色为质控。

10．必要时，在Sample 对话框的Factor栏中输入稀释倍数（5-100），按Accept键。在试管架上会显示出稀释管的位置。所有稀释管标本设定好后，按Accept键。

注：定义稀释管时试管类型仍然为样品管，按确定键后，会自动变为稀释管。如果样品处理器类型为1297-014，必须在稀释管槽内从右到左依次放入稀释微管。在稀释杯内加入适当稀释液。

11．预稀释倍数：在此Pre-dilution中输入样品加样前的预稀释倍数，以便MultiCalc能计算出正确的结果。

12．原始标本：选择Use primary，则系统会吸取等量的稀释样品和原样品。否则只吸取稀释样品。该功能只是对选中的项目有效。

13．复管数：如希望样品复管数不同与检验项目中设定的复管数，在 # Repl栏中输入需要的复管数。该功能只是对选中的项目有效。

14．增加管：Add tubes显示除样品外的其他和该待测样品有关的试管数，如稀释管、微管等。

15.条形码：选中Barcode ，则以条形码来识别试管。

3．2．6 微孔板图：

1．点击样品架图下方Plate Map按键，显示测试项目的微孔板图。图中黄色为校准品，红色为质控，绿色为样品，浅兰色为稀释液，紫色为稀释质控，深兰色为手动样品，灰色为空管。

2．在微孔板图左下方显示实验板总数、当前第几块板和在浮育器中的位置、试剂盒的总数及位置。

3．按 Prev 和  Next  ，显示前一板和下一块板状态。

4．按  Delete test   、   Delete Plate  和  Delete Well 分别可删除当前测试项目、删除当前测试中的最后一块微孔板、删除选定的微孔，同时与之相应的试管也被删除

5．按 Pack Plates ，整理删除后的微孔板。

6．按 Rack map 键，系统提示装载微孔板，然后直接进行测量。

3．2．7 结束创建工作表

工作表创建完成后，按仪器上的Load按扭装载样品，然后鼠标点击屏幕上的 Close  ， 结束创建工作表，此时系统会显示出校准品图，装载校准品。

（五）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  试剂/材料装载程序

1  样品管/架装载

1.1 锁定加样臂：在装载试管架之前，按Lock键锁定加样臂，装载完毕后按Lock释放加样臂。

1.2 将有红色数字标记的质控试管架和样品架依次放到装载位置，质控架在最前面，从样本运送器最右边的起始端开始装载试管架，将试管架有条形码端向外。关上进样仓盖子，按Load键。

1.3 待质控架检测完成后自动退出，放于样本处理器中央的特定位置，关上盖后按Load键，仪器自动装载样品架。

1.4 如在系统设置中选择了稀释微管，根据系统提示所需的稀释微管量，从右向左装载稀释微管。

1.5 装载完毕，按Close 键

如果样品量非常少，可以手动加样（在Analytes & samples的Tube type列表中Man. Pipetted 或在Worklist 的 comment区域中输入M 。待仪器对其他孔完成吸样后，系统提示手工加样到呈深兰色的空孔，操作者拿出板加样，要求每孔加样时间不超过2分10秒，在屏幕上显示倒计时，完成手工加样后，按IN/OUT按钮，或按OK 以确认已手工吸样。否则，到时间后板被自动运送到下一步操作区，并报警为未手工加样）。

3．

3．  

4．  

6．

7．

9．点击主屏上的Schedule 按钮，在屏幕上显示检测项目的最佳顺序和时间进程。不同的颜色代表不同的功能。黄色表示测试板的加样时间、深兰色表示孵育时间、浅兰色表示稀释时间或预处理时间、红色表示清洗、加液等时间。在Priority 栏下，对不同的项目设置不同的优先级，从而再制时间表。

2  微孔板装载

1．  鼠标点击Load plate 图标，样品处理器加样臂自动移到左边以方便操作。这时屏幕出现装板信息。在每行前面的红箭头表示正在装载的微孔板。

2．  由于系统的洗板机每次清洗两条板孔，如测试板条为奇数，则用清洁的空板补足成偶数板条。

3．  检查每个板孔是否潮湿，可用干净软纸擦干。否则会造成板条感应出错，和测量荧光时计数错误。

4．  待微孔板支架到位后，依列表顺序将第一块微孔板放到支架内，微孔板的条形码向右（A板条在右边），然后按IN/OUT键，系统自动将微孔板送进温育器内。如有第二块板，系统读取完板的批号后，微孔板支架返回装载位置继续装载，直到所有微孔板装载完毕。

5．  如板上条码读不出，则显示错误信号。如板放错位，点击Retry 后取出板，以正确方法重新放入支架中，如果是条码的问题，则点击Ignore 并输入板的批号，不必输板的系列号。

6．  在装载板时，系统检查每一次板的支架在孵育器中的位置，如有问题，则该板就不能被装入，并需要重新运行系统，启动程序会把支架重新带入孵育器中。

3  试剂装载

1．  点击Load reagents 图标，显示需要装载的试剂及相应的信息，每行前面的红箭头表示正在被条码机读取的试剂盒。根据提示检查相应的信息。

2．在试剂杯(cassettes)右边帖上条形码，条形码上的批号要与试剂盒上的一致。在条形码上还标有微孔板的编号，用来定义相应的微孔板。

3．根据屏幕列表所示，在试剂架上从左到右依次放置已开盖的所需试剂 ，在示踪剂和抗体瓶上放黑色的防挥发帽。示踪剂的位置标记在试剂杯的底部。试剂杯有四种类型，适用于不同的试剂。

4．放好所有试剂后，按  OK 键，条形码开始读取试剂条码，完成后提示装载微孔板。

（二）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  开始运行

1．点击Start run 图标，开始自动运行，显示试剂架各试剂和消耗品的情况。                       

2．  按照图中的位置检查试剂位置、吸嘴、稀释杯及板条量是否正确，点击 OK 。

3．  屏幕上显示微孔板处理器和样品处理器的液体量。检查是否达到屏幕所示的最低限度液体量。

注：残留量 ：

样品处理器：  清洗瓶为 -2.5L ；去离子水瓶为 -1.5L  稀释液瓶为 -6mL。

微孔板处理器：清洗液瓶和去离子水瓶均为 -1.5L；左边增强液瓶不少于1/3瓶。

4．  检查完毕后按  OK ，系统开始自检准备运行。确认吸嘴、稀释杯、防蒸发帽是否已经放好，各瓶液量足够、废液瓶有足够的空间等。自检无误后，屏幕显示出测量时间表并开始运行。

5．  运行进程

屏幕出现测量进程图，实时显示当前运行的状态及时间。如果运行过程中由于某种原因进程被终止，会在进程图上显示一红叉，可在历史记录中查阅有关信息。注意：出现问题后，下次运行之前请重新启动系统。

（七）运行结束

运行结束后，测出的计数值被保存在计数文件中，计数值由MultiCalc计算后打印出。确保MultiCalc处在计数状态以保证结果会自动输出。

（八）卸载

运行结束后鼠标点击Unload 图标，选择卸载样品/卸载微孔板，点击 OK  键，按提示卸载完成后鼠标点击取消键。

（九）查看加样图

    加样图是一8×12的矩阵图，对应微孔板的每一孔。在每一孔内有如下信息：序列号、探针号、试管或校准品、计数值和错误信息。其中：

探针号：第几根探针进行加样。

试管或校准品：所加样品为血清或校准品。其中R代表试管，S代表校准品，D代表稀释微管，P代表位置。例如：R2P3代表试管架2的第3个试管。

计数值：实际测量出的计数值。

错误信息：L-液体量过少（兰色代表稀释液过少，绿色代表预处理故障）；E-空试管或校准品瓶；C-加样探针堵塞；F-液体表面有气泡；W-交叉污染警告。

鼠标左键点击每一孔，可看每一孔的详细信息。

四、结果

测试结果保存到C:\wiacalc\oaux\Afp-bhcg.a文件中，将该文件拷贝到f:\中。

（二）Auto DELFIA自动时间分辨荧光免疫分析仪  维护保养程序

（一）该软件提供了维护计划表。每次维护都会被记入数据库存档。

1．在主屏点击  Maintenance 图标的History ，输入用户名       OK 

2．进入 Maintenance History 窗口，显示当前仪器保养情况和下次保养时间。

3．在Maintenance History 窗口，点击Settings键 出现Maintenance Settings窗口，激活需做保养检查盒，在Reporting框中可选择off 或overdues或 All      OK 

2．  在Maintenance History 窗口点击  Register  键，选择所需的保养方式                         OK 接受。

（二）每日保养

5．2.1 Washer test洗板机功能测试 

1．  点击Maintenance /Plate processor ,进入Plate washer 界面      OK 

2．  把一块96孔空的微孔板平稳地放于微孔板的支架上，按IN/POUT按钮。

3．  板被送入仪器内，系统检查板条数并灌满洗液后返回到载板位。

4．  用仔细检查每个孔是否均注满，再放入载板位，按IN/OUT按钮。

5．  板进入仪器后孔内液体被吸干，然后板被送出。

6．  检查各孔是否完全被吸干。可重复操作，检测完成后按  Close 键。

7．  如有孔没有被加满或吸干液体，可使用洗板机清洗保养程序。

5．2．2 Waste tray 清理废物盘

倒空废物盘内的吸头，用自来水冲洗，晾干。

5．2．3 Sampl e processor tubing 样本处理器管道

1．  检查样本处理器管路系统在灌水过程中是否有气泡。如仅有小气泡则没问题；如果是大气泡，可用Maintenance /Sample  processor /Rinse 命令冲洗系统将气泡排出；如有大量气泡不能被排除，先检查蠕动泵内管路连接和四个阀门是否有故障。

2．  在注射器中偶有小气泡不成问题，但如存在大的气泡，而且经轻轻拍打注射器或拧紧接口、拉直管路也不能排除的，则要考虑更换注射器。

5．2．4 Rinse冲洗（Rinse）

进入Maintenance /Sample  processor/Rinse      OK  。用去离子水冲洗样本探针并浸泡针管。

通常在运行样本测定后仪器会自动冲洗。

5．2．5 Temperature温度

   点击Options /Show temperature ,以检查温度调节功能。通常在下列条件下，温度在25±2℃范围内：室温15-30℃；板处理器合上盖子；在启动后至少二h保持温度稳定，如果不在这一范围联系工程师。

（三）每周保养

5．3．1 Instrument cleaning仪器清洗

进入Maintenance/instrument cleaning，显示消毒或清洗项目及所需的时间，根据需要可选择进行。

1．  选择对样本或板处理器清洗、消毒后，拿掉其他样本支架，按Yes 。接着对话框要求倒空废液瓶，把装有50ml 0.2 % 的次氯酸钠溶液（2000PPM Cl ）或70%-80%乙醇溶液的瓶子放入试剂盒子最左边位置，并在试剂架的起始位置放两个吸头，放一空的微孔板，按OK 键或IN/OUT按钮，板进入仪器内开始消毒。完成后板回到装载位，取出。  

2．  如用于新生儿疾病筛查中FT3或FT4的检测，则必须对移动盘进行消毒，这只能与洗板机消毒同时进行。

3．  使用高效含氯溶液对板处理器消毒前先倒空废液内液体再消毒，因为增强液会降低废液的 PH值而释放氯气。 装载板，点击OK或按板边上的IN/OUT按钮，

4．  当清洗探针时，把盛有1：20倍稀释的DELFIA Wash液的8支试管放于试管架上，用内径9-14mm的圆底试管，按OK，输入试管架号（系统提供），按OK。

5．  当消毒探针时，系统提示放置一个含70%-80%乙醇消毒液的8管洗液和4管水的架子，每管液体量至少3～5ml 。高氯溶液、丙酮、变质酒精会毁坏探针。如果选择了探针清洗和消毒两项，系统会完成清洗后进行消毒，最后会用水清洗。

6．  倒空废液瓶并移去微孔板后按Yes键，把工作记录入档。最后用“Unload sample racks”命令取出支架。

5．3．2 Enhancement Solution outlet 增强液出口

    检查增强液出口处是否曾有液体溅出，如有用棉签拭干净。

5．3．3 Sample processor bottles 样本处理器瓶

    启用“Load menu”菜单下”Load system liqids”命令，要求倒空废液瓶内液体，对洗液瓶和清洗瓶做排空和再灌满，然后按OK 。

（四）每二周保养

5．4．1 Sample processor样本处理器

   1、关闭样品处理器电源同时用手托住探针固定器，然后轻轻放低探针，搁置于放有干净纸的水平台上，以防探针突然掉下而损坏。

   2、用蘸有70～80%乙醇的软质布擦洗样品处理器上的齿轮。

3、probe Wash wells 探针清洗池：用移液管排空液体后，用小刷子清除异物，同时灌入70～80%乙醇约10min后，用清洗程序用水冲干净。

5．4．2 Plate processor 板处理器

   关闭所有应用程序、板处理器电源和计算机电源。然后打开系统电源，先打开样品处理器，再板处理器，最后启动计算机。

5．4.3 Bottles 瓶子

选择“Loading”菜单下“ Load system liquids Bottles”命令，按提示倒空洗液瓶和清洗瓶内剩余液体后，各自加满液体；倒空废液瓶内液体后按OK。

（五）每月保养

5．5．1 Bottles 瓶子

    1、倒空样品处理器和板处理器的洗液瓶并冲洗干净。

    2、倒空废液瓶，必要时可用大约1升的0.1-0.5%的高氯溶液消毒,盖上盖子,摇晃后放置30min,然后用水冲洗。

    3、必要时用湿布清除传感器或盖子上的污垢。

5．5．2 Sample processor tubing 样品处理管路

1、  用DELFIA洗液（1：20）冲洗样品处理管路系统后用去离子水冲洗。

2、  将管路取出后放入盛有70～80%乙醇（不带丙酮）消毒液的瓶子，并使用“Rinse”命令再冲洗。

3、  将管路放回各自加满液体的洗液瓶和清洗瓶，用“Rinse”命令冲洗五遍使去离子水充满管路。

5．5．3 Cleaning the covers, racks, and mirrors  擦洗盖子、支架和镜子

    1、用70～80%乙醇擦洗板处理器上的塑料盖和样品处理器上的盖子。先用自来水再用去离子水冲洗水平托盘的盖子；

2、同法冲洗试剂架（冲洗后立即擦干，不能浸泡）、样品架；

3、如试剂分配器上套吸头的部分有红色沉淀物，则用湿的纸擦掉；

4、蘸有70～80%乙醇的湿软布擦洗试剂架传动杆；

5、用“Unload plates”命令将板固定器取出，清洗板固定器上的镜子。

5．5．4 Washer cleaning 洗板机清洗

    1、启动“Maintenance”菜单下“Plate processor”栏中的“Washer cleaning”命令，可拆下洗板机多头吸嘴进行清洗。（建议由经过培训或公司专业人员操作）

    2、待多头吸嘴移动到方便操作的位置，关闭板处理器电源以确保安全，如果操作不方便可移去增强液，但注意一定不要碰到增强液管路，以免污染。

    3、将多头吸嘴往上抬高后往左移动，小心地卸下多头吸嘴，避免分配针和吸液针损坏。注意不要在托架上太使劲。

    4、先在传送带上铺上纸巾以免水滴进仪器，然后小心地将管路从吸嘴上取下来，不要不正当地拉伸小直径管子。

    5、移去吸嘴上方的橡皮盖子，清洗整个腔室，使用维护盒内提供的相应直径的通针清洁吸液针和分配针。

    6、分配腔室上的四个硅胶塞子按以下方法拆下，注意不要损坏四个孔，以免破坏密封性。

（1）用小别针移去一边的两个帽子。

（2）在台上铺一块布，用维护盒内提供的清洁刷将腔室里剩余的帽子推出，直到刷子的头能看见。

（3）用布拭净刷子上的异物后抽回刷子。同法清洁其他腔室。

（4）用合适的通针再次清洗分配针，用清洁刷再次清洗腔室。清洁刷不能它用，以免污染。

（5）分配腔室与吸液腔室均应用去离子水灌满后摇动清洗。在装回前先晾干或用干净纸擦干，小心别将纸片留在针上。

（6）将橡皮封塞装回原来合适的位置。

（7）在装新硅胶塞子时必须确保腔内通道干燥及所有内置帽子都在合适位置。最上面的帽子位置稍低于腔室外壁。

（8）检查所有的针是直的，而且定位正确。

（9）重新连接管路，将多头吸嘴放回支架上，检查是否能自由上下移动。

（10）安装完成后，按OK 键，确认多头吸嘴已装好，管路已连接后按OK 。

（11）系统提示打开板处理器电源，并重新启动工作站，运行洗板机测试以保证安装到位。

（六） 每季保养 

5．6．1 Pipetting precision check 移液管准确性检查  

1、将400-600μl（依测试的体积而定）1nmol/L铕溶液分别移入48支9 mm试管中。

2、从“Create List”菜单下“analytes selection” 中选“Use made” 项。

3、选sample 25、50或100分别为25、50和100μl 。

4、系统提供一个运行号，如有多个试验则另外编号。在样品号框中输入1..48号码。

5、将50ml的增强液放入试剂杯中，将此试剂杯及两个吸嘴放在试剂架最左边的位置。如不止一个测试则再放一套于试剂架。 

6、按OK 键，屏幕上显示因没有试剂条形码而出错，按“Ignore”， 在对话框中输入试剂盒批号号码为111111和板批号号码为1，按OK 。

7、显示Plate loading 对话框，放入一块清洁板后，按OK ，屏幕上显示因没有板条形码而报警，按“Ignore”，输入板批号号码1和板系列号为零，按OK 键。

8、Multicalc 中的“Probe”程序用来统计对整块板的每根探针的平均值与变异系数。总变异系数必须小于3%，而探针的变异系数应小于2%，如CV%超标，则应检查是否有偏离孔的输出，如有必须重新做以上检查。

9、检查完毕，运行“Instrument cleaning”进行清洗。

10、选择“Disinfect sample processor probers”对探针消毒。

11、在1-8号管中加增强液，9-12管中加水。最后在相同条件下再运行一次。

5．6．2 Accuracy test 准确性检查

1、启动“Maintenance”菜单下“Sample processor” 栏中的“Accuracy test” ，按OK键，选择要测试的体积（20、25、50、100、150μl）后按OK键。

2、在试剂盒中选择四个空的标准液瓶子称重，把重量输入对话框中，按OK 键。

3、将加有1.1ml达到室温25℃的DELFIA DilutionⅡ的9mm试管放入试管架1-4号位，把已称量过的4个空瓶子放进特定支架后放入板处理器的装载位。按OK 键。

4、输入装试管的试管架号，按OK后仪器自动将试管架移动到吸液位，分别吸取试管中的稀释液到校准品瓶。

5、完成移液后，拿走4个校准品瓶子，按OK键。立即再称重4个校准品瓶并输入对话框中，按OK键。如果在允许范围内（准确度应为±3%）屏幕显示每根探针的实际吸液量并告知结果是否在接受范围内。接着可选择做另一体积的测试。

5．6．3 Carry-over check if the probers 探针的残留检查

方法一：通过检查hCG和 TSH Ultra 实验或其它分析来做。

规定用于hCG和 TSH Ultra 实验数据进行分析仅用到两条微孔板。使用Muliticalc 的“Carry”程序，不必用标准，数据是从CPS上得到。如想要到更多的板条，必须手动统计分析。

方法二：在“Settings”菜单下“Analyte”栏中设定与“Carry” 程序的联系。在“Create list” 里，选取“Use made”，再选择“TSHu Carry”或 “HCG Carry” ，输入ID号与使用的试剂批号号码，输入1..12样品号。

准备8管空白标本与4管高浓度标本，做hCG需用300μl （9mm试管），如做TSH Ultra 需500μl ，先放4管空白管，然后4管高浓度管，再另4管空白管。

运行检查。要求HCG或 TSHu 残留体积应小于0.005%， LH残留体积应小于0.01%，如果高这一界限必须更换探针。见“Probe change”。

（七）特别维护 当出现以下情况时，必须按相应的步骤维护。

5．7．1 Probe crash 探针碰落

做准确性和残留试验。如结果不可接受，更换探针。

5．7．2 Spillage 液体溢出

如设备内有液体溢出，用干净的布擦干。

5．7．3 Serum spillage血清泼溅

如血清泼溅在样品处理器上，用蘸有清洁剂的布擦洗传送带后用水冲洗，再用70-80%的乙醇擦洗。

5．7．4 Enhancement Solution flush 增强液冲洗

1、  如果DELFIA有一两天没有工作，启动“Maintenance” 菜单下“Plate processor” 栏中的“Enhancement Solution flush” 命令，冲洗增强液管路以排除可能存在的气泡；

2、  如停用超过一周，必须更换增强液。先换上去离子水并用相同的命令冲洗整个管路。使用前重新换上新的增强液，再用相同命令冲洗换新整个管路。

5．7．5 Sample processor probes 样品处理器探针

样品处理器探针是不能干燥的，当关闭系统时，应用手托住探针并移到灌满去离子水的稀释槽内，用探针托架支撑住探针，在仪器运行前必须拿掉此托架。

（八）其它

5．8．1 Aspirate 吸取

在“Run Menu”菜单下运行。放一块板在微孔板支架上，按IN/OUT按钮，完成对板吸取过程后按“close”结束。

5．8．2 Counter signal level test 计数信号水平测试

1、  启动“Maintenance”菜单下“Plate processor” 栏中“Counter signal level test” 命令对计数信号水平进行测试，在屏幕上选定板的类型和标记物。

2、  按系统的提示，在试剂架1号位放入装有1nmol/L铕或1nmol/L钐溶液的瓶子，在试剂架的最左边放1个吸嘴，然后选一块干净的板并放入装载位。

3、  吸样器移取200μl溶液加入各孔，仪器测量板及背景，结果将从工作站传送到Multicalc，打出报告。结果应该在1nmol/L±20% 范围内。

5．8．3 Dual label calibration 双标记校正

双标记测定包括铕标记和钐标记在各自界面的测定。但钐标记的结果中有部分是铕标记参与作用的，即过剩。减去铕标记带来的背景，得到纯钐标记的值为双标记校正。详见Wallac双标记校正试剂盒。过程如下：

1、选择Dual label calibration，在屏上选择使用的板型号，如选Nunc[hAFP/Free hCG Beta ]，同时显示当前的校准值（如装机时没有校准则不显示任何值），按OK键。

2、系统提示将装有50ml的1nmol/L铕标准溶液的试剂瓶放在第一位置，将装有50ml板处理器洗液的试剂瓶（1：25）放在第二位置；同时放两个移液吸嘴于试剂架的1、2号位，然后放一块至少有三条的清洁未包被板，按OK键盘。

3、铕标记液将被加入A条板，洗液被放入C条板，然后测量板孔，过剩值被求出。新的结果与以前的结果同时显示。对于Nunc[hAFP/Free hCG Beta ]经典的空白值小于140；PSA双标记的背景一般小于10，校正因子在0.4-0.6之间。按OK接受新值，按 Close取消当前结果。

如果未做校正，就不能做双标记实验。

5．8．4 Fill 冲洗

启动“Maintenance”菜单下“Sample processor” 栏中的“Fill”命令，冲洗整个样品处理器管路系统。

5．8．5 Prewash 预洗

在“Run” 菜单下选择“Prewash”，可对微孔板的预洗，放一块板后，按IN/OUT ，完成后按“Close”  。

5．8．6 probe changing  更换探针

请及时联系公司专业人员。

1、  启动“Maintenance”菜单下“Sample processor” 栏中的“Probe changing”命令，按OK键，选择是否要检查探针的位置。

2、  按Yes键，移去仪器上标准液抽屉盖后按OK键，探针移动到标准盘上方，可通过按“Down”或“Up”键来检查和调整探针位置，每按一次“Down”或“Up”键，探针向下或向上移动1mm，当达到满意位置时点击OK键。

3、  如果在更换前不选择检查探针位置，仪器提示你拿掉标准盘及其盖子后按OK键。

4、  从第四根探针开始小心地依次卸下各探针。当卸装或安装时不要用力过大，以免损坏探针臂。

5、  当4根探针全部卸下后，2、3、4支架上升而1支架下降。此时可从第1根开始安装新的探针。

6、  完成安装后，放回校准品抽屉，按OK，探针移动到校准品抽屉上方，检查并调整好探针位置。

7、  仪器提示是否需要在其他位置调整探针，如按Yes键，则在微孔板的第1孔、最后孔和洗板位的上方调整探针。最后重新放回标准盘盖子。

5．8．7 Reagent dispenser accuracy test 试剂吸液准确性测试

1、  在“Maintenance”菜单下“Sample processor” 栏中的“Reagent dispenser accuracy test”命令，选择待测试的分配器，按OK 键。

2、  称重瓶子后放入试剂架，输入称量值。

3、  仪器提示装载有一个已称重瓶子的试剂架，和10个吸嘴及装有50ml去离子水的缓冲瓶，放在试剂架的最左边，按OK键开始测试。

4、  完成后立即称重给液后的瓶子，输入对话框，系统会显示分配的量，评估其是否在可接受的范围内。

5．8．8 Wash  洗板

在“Run”菜单下运行“Wash”命令，以清洗微孔板。清洗次数可根据需要输入，放入一块板后按IN/OUT，仪器将自动进行清洗。