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总胆汁酸酶循环法检测试剂盒
用途：
本试剂盒用于测定血清、血浆中总胆汁酸含量。适用于半/全自动生化分析仪。
原理：
血清中的胆汁酸（3α-羟类固醇）被3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性地氧化，生成3-酮类固醇及β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。而生成的3-酮类固醇在3α-HSD及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH）作用下，生成胆汁酸及β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（NAD）。如此，血清中微量的胆汁酸在多次酶循环过程中被放大，同时可使生成的Thio-NADH扩增。在405nm测定Thio-NADH吸光度变化值，即得血清中胆汁酸的含量。
试剂盒组成：
R1：检测试剂1
β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型 1mmol/L
Good’s缓冲液
R2：检测试剂2
β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型 10mmol/L
3α-羟类固醇脱氢酶 12500U/L
校准液 50.0μmol/L
样品准备：
样品为空腹新鲜血清、血浆（1.8mgEDTA-Na2或0.1mg肝素可抗凝1.0ml血液）。样品应在低温条件下运输保存，血清中胆汁酸在2～8℃可稳定7天，-20℃可稳定3个月。
测定步骤：
1. 基本参数：
方 法：速率法 样品/试剂：1/90
主波长： 405nm 反应温度： 37℃
副波长： 660nm 反应时间：10min
2.操作
混匀，37℃恒温1分钟后测定初始吸光度，然后准确测定平均每分钟吸光度变化值△A/min。
操作流程图：
计算：
性能指标：
1. 线性范围：0.8～180.0μmol/L，r≥0.99
2. 精密度：批内瓶间差CV≤4.1%、批间相对极差≤5.7%。
3. 准确度：不准确度≤10%。
4. 胆红素≤855μmol/L，血红蛋白≤0.5g/L，维生素C≤6.0mmol/L对本法无干扰。
5. 空白吸光度：本试剂在主波长405nm处，10mm光径下，吸光度值≤0.700。
注意事项：
1. 如果样品中TBA含量超过180.0μmol/L，则用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。
2. 试剂与样品量可根据需要按比例改变。
3. 试剂使用后立即盖紧瓶盖，避免污染。
参考值范围：0.0～10.0μmol/L
建议各实验室建立自己的参考值范围。
我该怎么设定理论K值？读数时间？延迟时间？方法学只有三个：终点法、两点法、速率法，我应该选择哪个方法？
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