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血小板计数
² 血小板生理概要
血小板是由骨髓中成熟巨核细胞的胞浆脱落而来,每天生产的量相当于每升血中增加35×109个,血小板的寿命约有7~14天,外周血中血小板的数量受血小板生成素的控制。后者能刺激定向的祖细胞生成原巨核细胞,并促进其胞浆成熟和血小板的形成。全身血小板有1/3贮存在脾池,脾池血小板和循环池血小板可以自由交换,衰老的血小板在脾、肝等处的单核巨噬系统中破坏后消失。血小板的生理特性为粘附、聚集和释放。包括:凝血功能,止血功能和对纤溶的作用。
² 血球分析仪器法
l 仪器型号:Sysmex KX-21型多项目自动血球计数仪器
Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置
l 检测原理:
吸液管定量吸取血液试样,按规定的倍率稀释后,送入各检测器容器。在检测容器中有孔眼状细孔,在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球通过细孔时,电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化,血球的大小作为脉冲被检测出来,再根据电脉冲的个数可计算出血球数。另外,可通过求该脉冲的大小,就可按血球的大小描出粒度分布,且通过解析粒度分布,得到各种解析数据。
l 试剂:
一、Sysmex KX-21
⑴稀释液
⑵WBC/HGB用溶血剂
⑶2%EDTA二钾溶液
二、Sysmex XE-2100
⑴CELLPACK(EPK)
⑵2%EDTA二钾溶液
l 标本吸入量:
一、Sysmex KX-21:全血模式50
二、Sysmex XE-2100:⑴手工模式130
⑵自动进样器模式200
l 静脉血采血方法:
抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2/ML)24小时室温保存。
l 操作步骤:
一、Sysmex KX-21
⑴仪器在全血模式(WB)下
⑵要在允许空白值内:
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。蜂鸣器“笛笛”响两声之后,当LCD画面上显示“正在测量”状态时可将试管取下。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,约1分钟左右测量结束,被测标本的结果自动显示出来。同时LCD画面自动切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
二、Sysmex XE-2100
⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后,在机器左上放状态栏显示“READY”及确认“READY LED”(准备状态灯)呈绿色时,机器进入准备测量状态。
⑵要在允许空白值内:
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:
手工模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。吸液管吸液完毕后听到三声报警声,将试管移开。
进样器自动模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将试管加放在自动进样器工作台上。机器开始自动混均、吸引和分析标本。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,被测标本的结果自动显示出来。同时屏幕切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
² 显微镜计数法
l 检测原理:
用稀释液将血液混均后,充入专用的计数板,显微镜下计数被稀释血液一定容量内的血小板个数,求得每L(或 )内的血小板数。
l 试剂:
血小板稀释液:改良草酸铵稀释液、尿素稀释液。
l 标本吸入量:末梢血模式20
l 抗凝管的制备:
取上述EDTA二钾溶液10微升,加入小试管内于70℃以下干燥备用。
l 末梢血采集方法:
⑴采血部位必须无冻疮、炎症、水肿、充血及循环障碍。成人以无名指为宜,半岁以上儿童手指为好,半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血。
⑵轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤待干。
⑶紧控刺血部位,用采血针穿刺取血,动作应迅速,深度约2-3mm,稍加挤压,以血液能流出为宜。
⑷用干棉球擦去第一滴血,毛细吸管吸血120 于抗凝管中混均,6小时内测定完毕。
⑸采血完毕,用干棉球压住伤口,血止为止。
l 操作步骤:
⑴取小试管1支,加血小板稀释液0.38ml。
⑵用微量吸管准确吸取末梢血20 。
⑶擦去管尖外部余血,将吸管插入盛有0.38ml稀释液的试管底部,轻轻将血放出,并吸取上清液洗吸管3次。
⑷将计数板和盖玻片擦净,用微量吸管迅速吸取已混均的细胞悬液,充入清洁干燥的计数池与盖玻片之间的缝隙中,静置10-15分钟,待血小板下沉。
⑸用低倍镜找到计数池中央大格,换高倍镜计数全部大方格内的血小板数。
l 注意事项:
⑴全部用具和稀释液要特别清洁,以免尘埃斑点被误认为是血小板。
⑵刺血一定要深,避免挤压致血液凝固。
⑶血小板易聚集,在滴入计数池前,必须充分摇匀。
⑷一定要等血小板完全下沉后再计数,为了能准确区别血小板与杂质,必须用高倍镜计数。
² 检测方法
l 显微镜计数法:
用改良草酸铵稀释液和尿素稀释液,在专用的计数板上计数稀释血液一定容量内的血小板,求得每L(或 )内的血小板数。
l 电子血细胞计数仪器法:
常用的血球计数仪,大多数仪器采用DC检测法测定。本室应用Sysmex KX-21型多项目自动血球计数仪器、SF-3000型全自动血球分析装置和MEK-6108K型自动血球分析仪。
² 正常参考范围
正常人:100~300×109/L
² 临床意义
l 生理性变异:
与个体年龄、性别、作息情况等有关,还有冬季血小板浓度比夏季高,动脉血较静脉高,静脉血较末梢血高。
l 病理性增多:
可见于急性化脓性感染,急性出血,手术,损伤等。以及真性红细胞增多症,溶血性贫血,脾切除后,慢性粒细胞白血病早期,原发性血小板增多症,何杰金氏病和肺癌等。
l 病理性减少:
常见于原发性血小板减少性紫癜,各种侵害骨髓而致造血机能障碍的疾病,脾抗,X射线敏感,药物中毒,某些细菌感染及流脑,麻疹等。其次可见于系统性红斑狼疮,尿毒症,过敏性血小板减少性紫癜,DIC等。 |