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网织红细胞计数
² 网织红细胞生理概要
网织红细胞是未完全成熟的红细胞。红细胞由骨髓进入外周血,需24-48h合成最后20%的血红蛋白,残余的嗜碱性物质才能完全消失,成为成熟的红细胞。将其分为五型:花冠型、丝球型、网型、破网型、点粒型。
² 血球分析仪器法
l 仪器型号:Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置
l 检测原理:
一份血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。然后将该样品送入流动的池中。一个半导体激光束通过流动池照射到细胞上。前向散射光由光二极管接收,侧面的散射光和侧面的荧光则由光点信增管(PMT)接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。
⑴前向散射光和侧向散射光:当光通路中存在诸如粒子之类的障碍物时,该光束就在每个障碍物的不同方向上产生出散射光。通过检测散射光,可以得到有关细胞体积大小和材质的信息。与此同时,当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。散射光的强度,取决于颗粒直径和观察角度这样的因素。对前向散射光进行检测,提供有关血液细胞体积大小的信息;同时对侧向散射光进行检测,提供有关细胞内部的信息。
⑵侧向荧光:当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加,荧光强度也增加。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息。
l 试剂:
⑴CELLPACK(EPK)
⑵RET SEARCHⅡ(RED)
l 标本吸入量:
⑴手工模式130
⑵自动进样器模式200
l 静脉血采血方法:
抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2/ML)24小时室温保存。
l 操作步骤:
⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后,在机器左上放状态栏显示“READY”及确认“READY LED”(准备状态灯)呈绿色时,机器进入准备测量状态。
⑵要在允许空白值内:
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:
手工模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。吸液管吸液完毕后听到三声报警声,将试管移开。
进样器自动模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将试管加放在自动进样器工作台上。机器开始自动混均、吸引和分析标本。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,被测标本的结果自动显示出来。同时屏幕切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
² 显微镜计数法
l 细胞受色原理:
网织红细胞较成熟的红细胞稍大,胞浆中残存多少不等的嗜碱性物质,经煌焦油蓝、新亚甲蓝或硫酸奈尔蓝活体染色呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
l 试剂:
10g/L煌焦油蓝等渗盐水溶液:煌焦油蓝1g、枸櫞酸钠0.4g、氯化钠0.85g、蒸馏水加至100ml。
l 操作步骤:
⑴于玻片的一端加10g/L煌焦油蓝等渗盐水溶液一滴,任其自然干燥备用。
⑵取末梢血一滴于干燥染料上,用推片搅动混匀后,将两玻片盖合,待3min以上时间,才推制血片。
⑶油镜下,计数1000个红细胞中的网织细胞数。
² 正常参考值
成人:0.5-1.5%
24 109/L-84 109/L
儿童:3-6%
² 临床意义
网织红细胞显著增加,表示骨髓红细胞生成旺盛,常见于溶
血性贫血(可高达70%)。为其次急性失血性贫血,急性失血后
5-10天达到高峰,2周后恢复正常。营养性巨幼红细胞性贫血和
缺铁性贫血可因缺乏造血物质,仅轻度增加(也可正常或减少)。
网织红细胞数量持续上升,常提出慢性失血,如消化道溃疡等。
贫血治效果观察,如缺铁性贫血和营养性巨幼红细胞性贫血,
经相应治疗后1-2日开始增多,1周左右达到最高峰,因此观察
网织红细胞数量的反应,是贫血疗效的评价指标。
骨髓受白血病、肿瘤等浸润时,血中网织红细胞也可呈不规则的
病理性轻度增多,此系病理刺激所至,它不反应造血旺盛。
网织红细胞减少,表示骨髓红细胞生成减弱。主要见于再生障碍
性贫血,临床上将贫血病人每升血液中网织红细胞浓度数低15 109/L
作为急性再生障碍性贫血的诊断标准。 |