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² 红细胞生理概要
正常红细胞为两面微凹的圆盘行,平均直径7.2 ,厚约2 ,无核,具有折光性。红细胞主要成分是血红蛋白和水,其余成分为蛋白质、磷脂、无机盐和酶。红细胞在骨髓内生成。由于红细胞系祖细胞,在红细胞生成素(ESF)的作用下,分化发育而来,入血后的红细胞寿命为120天左右。因此,每3~4个月完全更新一次。红细胞不断的衰老死亡,新生红细胞不断的补充,保持着血液中红细胞数量的动态平衡。红细胞的主要功能,是通过血红蛋白运输氧气和二氧化碳,以及维持酸碱平衡和免疫粘附作用。
² 血球分析仪器法
l 仪器型号:Sysmex KX-21型多项目自动血球计数仪器
Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置
l 检测原理:
吸液管定量吸取血液试样,按规定的倍率稀释后,送入各检测器容器。在检测容器中有孔眼状细孔,在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球通过细孔时,电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化,血球的大小作为脉冲被检测出来,再根据电脉冲的个数可计算出血球数。另外,可通过求该脉冲的大小,就可按血球的大小描出粒度分布,且通过解析粒度分布,得到各种解析数据。
l 试剂:
一、Sysmex KX-21
⑴稀释液
⑵WBC/HGB用溶血剂
⑶2%EDTA二钾溶液
二、Sysmex XE-2100
⑴CELLPACK(EPK)
⑵2%EDTA二钾溶液
l 标本吸入量:
一、Sysmex KX-21:全血模式50
二、Sysmex XE-2100:⑴手工模式130
⑵自动进样器模式200
l 静脉血采血方法:
抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2/ML)24小时室温保存。
l 操作步骤:
一、Sysmex KX-21
⑴仪器在全血模式(WB)下
⑵要在允许空白值内:
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。蜂鸣器“笛笛”响两声之后,当LCD画面上显示“正在测量”状态时可将试管取下。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,约1分钟左右测量结束,被测标本的结果自动显示出来。同时LCD画面自动切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
二、Sysmex XE-2100
⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后,在机器左上放状态栏显示“READY”及确认“READY LED”(准备状态灯)呈绿色时,机器进入准备测量状态。
⑵要在允许空白值内:
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:
手工模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。吸液管吸液完毕后听到三声报警声,将试管移开。
进样器自动模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行MANUAL键,利用数字键输入标本的编号,按ENTER键确认。将试管加放在自动进样器工作台上。机器开始自动混均、吸引和分析标本。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,被测标本的结果自动显示出来。同时屏幕切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
² 显微镜计数法
l 检测原理:
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,在显微镜下计数一定体积内的细胞数,经过换算求得每升血液内的红细胞数。
l 试剂:
赫姆氏红细胞稀释液:氯化钠1.0g、结晶硫酸钠5.0g、氯化高汞0.5g、蒸馏水加至200ml。
l 标本吸入量:末梢血模式10
l 抗凝管的制备:
取上述EDTA二钾溶液10微升,加入小试管内于70℃以下干燥备用。
l 末梢血采集方法:
⑴采血部位必须无冻疮、炎症、水肿、充血及循环障碍。成人以无名指为宜,半岁以上儿童手指为好,半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血。
⑵轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤待干。
⑶紧控刺血部位,用采血针穿刺取血,动作应迅速,深度约2-3mm,稍加挤压,以血液能流出为宜。
⑷用干棉球擦去第一滴血,毛细吸管吸血120 于抗凝管中混均,6小时内测定完毕。
⑸采血完毕,用干棉球压住伤口,血止为止。
l 操作步骤:
⑴取小试管1支,加红细胞稀释液1.99ml。
⑵用微量吸管准确吸取末梢血10 。
⑶擦去管尖外部余血,将吸管插入盛有1.99ml稀释液的试管底部,轻轻将血放出,并吸取上清液洗吸管3次。
⑷将计数板和盖玻片擦净,用微量吸管迅速吸取已混均的细胞悬液,充入清洁干燥的计数池与盖玻片之间的缝隙中,静置2-3分钟,待红细胞下沉。
⑸用低倍镜或高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。对于压线的白细胞,应采取数上不数下,数左不数右的原则,保证计数域的一致性,使计数准确。
l 计算:
五个中方格内的红细胞数×5×10×106×200
式中:×5 表示5个中方格内红细胞数折算为1个大方格红细胞数
×10 因一个大格容积为0.1 ,换算为1
×200 血液稀释倍数
×106 将1 换算为1L
² 正常参考范围
男:4.0~5.5×1012/L
女:3.5~5.0×1012/L
新生儿:6.0~7.0×1012/L
² 临床意义
l 生理性变异:
年龄与性别的差异、精神因素、气压、长期多次献血者、妊娠期等。
l 病理性增多:
见于真性红细胞增多症、严重脱水、严重烧伤及休克、肺原性心脏病、先天性心脏病、高山病、慢性一氧化碳中毒,某些肿瘤等。
l 病理性减少:
见于各种贫血、白血病、手术后或产后大量出血,其它原因引起大量失血、重症寄生虫病等。
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