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² 白细胞生理概要
白细胞是无色有核细胞，呈球形，直径7～25 。白细胞的生理功能十分复杂，它们通过不同方式、不同机制来消灭病原体，消除过敏原和参加免疫反应、产生抗体等而保证机体健康。
² 血球分析仪器法
l 仪器型号：Sysmex KX-21型多项目自动血球计数仪器
Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置
l 检测原理：
一、Sysmex KX-21
吸液管定量吸取血液试样，按规定的倍率稀释后，送入各检测器容器。在检测容器中有孔眼状细孔，在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球通过细孔时，电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化，血球的大小作为脉冲被检测出来，再根据电脉冲的个数可计算出血球数。另外，可通过求该脉冲的大小，就可按血球的大小描出粒度分布，且通过解析粒度分布，得到各种解析数据。
二、Sysmex XE-2100
一份血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。然后将该样品送入流动的池中。一个半导体激光束通过流动池照射到细胞上。前向散射光由光二极管接收，侧面的散射光和侧面的荧光则由光点信增管（PMT）接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。
⑴前向散射光和侧向散射光：当光通路中存在诸如粒子之类的障碍物时，该光束就在每个障碍物的不同方向上产生出散射光。通过检测散射光，可以得到有关细胞体积大小和材质的信息。与此同时，当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。散射光的强度，取决于颗粒直径和观察角度这样的因素。对前向散射光进行检测，提供有关血液细胞体积大小的信息；同时对侧向散射光进行检测，提供有关细胞内部的信息。
⑵侧向荧光：当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息。
l 试剂：
一、Sysmex KX-21
⑴稀释液
⑵WBC／HGB用溶血剂
⑶2％EDTA二钾溶液
二、Sysmex XE-2100
⑴CELLPACK（EPK）
⑵STROMATOLYSER-FB（FBA）
l 标本吸入量：
一、Sysmex KX-21: 全血模式50
二、Sysmex XE-2100：⑴手工模式130
⑵自动进样器模式200
l 静脉血采血方法：
抽取病人静脉血2ml，于EDTA二钾抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2／ML）24小时室温保存。
l 操作步骤：
一、Sysmex KX-21
⑴仪器在全血模式（WB）下
⑵要在允许空白值内：
|
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
|
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量：将待测标本充分混均，然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。蜂鸣器“笛笛”响两声之后，当LCD画面上显示“正在测量”状态时可将试管取下。
⑸结果显示：标本被吸入后仪器将进行自动测量，约1分钟左右测量结束，被测标本的结果自动显示出来。同时LCD画面自动切换至“准备测量”状态，此时可进行下一份标本的测量。
二、Sysmex XE-2100
⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后，在机器左上放状态栏显示“READY”及确认“READY LED”（准备状态灯）呈绿色时，机器进入准备测量状态。
⑵要在允许空白值内：
|
WBC |
RBC |
HGB |
PLT |
|
0.3 109/L |
0.02 1012/L |
1g/L |
10 109/L |
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量：
手工模式：在准备测量状态下，按下屏幕最上一行MANUAL键，利用数字键输入标本的编号，按ENTER键确认。将待测标本充分混均，然后将吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。吸液管吸液完毕后听到三声报警声，将试管移开。
进样器自动模式：在准备测量状态下，按下屏幕最上一行MANUAL键，利用数字键输入标本的编号，按ENTER键确认。将试管加放在自动进样器工作台上。机器开始自动混均、吸引和分析标本。
⑸结果显示：标本被吸入后仪器将进行自动测量，被测标本的结果自动显示出来。同时屏幕切换至“准备测量”状态，此时可进行下一份标本的测量。
² 显微镜计数法
l 检测原理：
用稀醋酸溶液，将血液稀释并破坏红细胞，留下白细胞，混均后，充入专用的计数板，显微镜下计数被稀释血液一定容量内的白细胞个数，求得每L（或 ）内的白细胞数。
l 试剂：
白细胞稀释液：冰醋酸2.0ml、亚甲蓝10g/L数滴、蒸馏水加至100ml。
l 标本吸入量：末梢血模式20
l 抗凝管的制备：
取上述EDTA二钾溶液10微升，加入小试管内于70℃以下干燥备用。
l 末梢血采集方法：
⑴采血部位必须无冻疮、炎症、水肿、充血及循环障碍。成人以无名指为宜，半岁以上儿童手指为好，半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血。
⑵轻轻按摩采血部位，使其自然充血，用75％乙醇棉球消毒局部皮肤待干。
⑶紧控刺血部位，用采血针穿刺取血，动作应迅速，深度约2-3mm，稍加挤压，以血液能流出为宜。
⑷用干棉球擦去第一滴血，毛细吸管吸血120 于抗凝管中混均，6小时内测定完毕。
⑸采血完毕，用干棉球压住伤口，血止为止。
l 操作步骤：
⑴取小试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。
⑵用微量吸管准确吸取末梢血20 。
⑶擦去管尖外部余血，将吸管插入盛有0.38ml稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液洗吸管3次。
⑷将计数板和盖玻片擦净，用微量吸管迅速吸取已混均的细胞悬液，充入清洁干燥的计数池与盖玻片之间的缝隙中，静置2-3分钟，待白细胞下沉。
⑸用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数。对于压线的白细胞，应采取数上不数下，数左不数右的原则，保证计数域的一致性，使计数准确。
l 计算：
/L
式中：／4 得每个大格（即0.1 ）内的白细胞平均数
×10 因一个大格容积为0.1 ，换算为1
×20 血液稀释倍数，乘20即得1 血液白细胞数
×106 将1 换算为1L
² 正常参考范围
成人：4.0～10.0×109/L
6个月至2岁婴儿：11.0～12.0×109/L
新生儿：15.0～20.0×109/L
² 临床意义
l 生理性变异：
新生儿、经期、妊娠末期、分娩时、饭后、剧烈运动后、酒后、冷水浴后、情绪突变时及注射肾上腺素后均增高。正常人一般下午较上午为高。
l 病理性增多：
⑴细菌感染，尤其是化脓性细菌感染，如：脓肿、化脓性脑膜炎、大叶性肺炎、败血症、阑尾炎、扁桃体炎等。
⑵某些病毒感染，如：乙型脑炎、传染性单核细胞增多症等。
⑶某些寄生虫感染，如：急性血吸虫病、肺吸虫病等。
⑷其它，如白血病、骨髓纤维化、恶性肿瘤，真性红细胞增多症、尿毒症等。其中以慢性白血病增高最多，类白血病反应有时亦可高达数万。
l 病理性减少：
⑴病毒性感染，如：流感、传染性肝炎等。
⑵某些杆菌感染，如：伤寒、副伤寒、波状热等。
⑶寄生虫感染，如：疟疾、黑热病等。
⑷脾功能亢进，任何原因引起的脾肿大，均将引起白细胞减低。
⑸血液病，如：再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、非白血病性白血病、恶性组织细胞病等。
⑹化学因素，抗癌药物、解热镇痛药、抗甲状腺药、抗癫痫药、抗生素、抗疟药、抗痨药、抗组织胺药、抗糖尿病药、利尿剂等。
⑺其它，苯、金属、铋、有机砷等。
⑻物理因素，X线、放射性物质。
⑼婴儿遗传性粒细胞缺乏症。
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