[转帖]SE-9000血液分析仪鞘液的研制及应用

SE-9000血液分析仪鞘液的研制及应用
刘更夫，龚永启，饶平妹，骆明波(武汉大学医学院黄石市中心医院检验科，湖北黄石435000)

作者简介：刘更夫(1 962一)，男，大学本科，副主任技师，主要从事临床检验研究，Tel：13807231697。

摘 要：目的 研究国产鞘液的自主配方及其在SE-9000全自动血液分析仪上的应用。方法 优选国产鞘液的配方组成；以国产鞘液与进口原装鞘液对进口配套的全血质控物、新鲜血液标本作系统的比对实验。结果 国产鞘液与进口原装鞘液的各项检测结果基本一致，无显著性差异，P>0.05；两者问的相关系数均大于0.983，相关性良好；各检测项目的回归方程中，斜率均大于0.981，且截距非常小。结论 国产鞘液实验结果准确、重复性良好、质量稳定，能替代进口原装鞘液用于SE-9000全自动血液分析仪的配套使用。

关键词：血液分析仪；鞘液；质量控制

中图分类号：R373．1 3 R446．119 文献标识码：A 文章编号：1671-7414(2007)03-072-03
SE-9000 Blood Instrument of Sheath’S Research and Application LIU Geng-fu，GONG Yong-qi，RAO Ping-mei，LUO Ming-bo (Department of Medical Laboratory，Huangshi Central Hospital Medicine College of Wuhan University，Hubei Huangshi 435000，China)
Abstract：Objective Research on domestic sheath autonomous formula and its application on SE一9000 automatic blood in— strument．M ethod Select domestic sheath formula and use domestic sheath and imported original sheath to do systematicm comparative experiments on imported whole blood controller and fresh blood sample．Result There is little difference be—tween all the checking results of domestic sheath and imported original sheath，with P> 0.05．The relative coefficient be—tween the two are over 0.983，SO the relativity is good．In every checking programme’S circle equation，the leaping rates are all over 0.981 and the distance is extremely smal1．Conclusion The experimental results of domestic sheath experiment are accurate with good repeating ability and stable quality，SO it can take the place of imported original sheath，and can be applied in SE-9000 automatic blood instrument’S working．
Keywords：blood instrument，sheath，quality control

SE-9000全自动血液分析仪融合了经典的库尔特原理、流式细胞术中的鞘流技术、射频技术等高新技术结晶，检测速度快捷、结果准确，在大型医院实验室得到了广泛应用。但该仪器进入国内实验室使用的时间不长，目前尚无国产试剂与之配套使用，完全依赖进口，且价格不菲。笔者研制的国产鞘液与进口原装鞘液经过一年的比对实验，质量稳定、检测结果可靠。

1 材料与方法
1．1 实验仪器 SE-9000全自动血液分析仪，Sysmex公司生产；FA1104万分之一电子天平，上海天平仪器厂生产。
1．2 试剂 ① 配套试剂：SE-9000全自动血液分析仪进口原装配套试剂及全血质控物，Sysmex公司生产，批号51360511。② 自制试剂：药用辅料泊洛沙姆，聚山梨酯-80，十二烷基硫酸钠，三羟甲基氨基甲烷，氯化钠。先配制pH 7.4 Tris缓冲液，以该缓冲液溶解氯化钠，使氯化钠的含量为7g/L，再用该试剂配制不同种类、不同药用辅料含量的实验鞘液，过滤室温保存。
1．3 实验标本 随机收集当天的、专用真空试管(含EDTA-K )盛放的新鲜血液标本236例用于比对实验，其中检测项目正常89例，异常147例。
1．4 实验方法
1．4．1 实验前请仪器生产厂家的专业技术人员对SE-9000全自动血液分析仪进行保养及校准，确认仪器各项技术指标均在其允许的波动范围内。以自制实验鞘液替代进口原装鞘液，对配套的进口全血质控物进行检测，将血小板计数、血小板直方图、血红蛋白含量作为观察指标，以此优选出药用辅料的
种类及其最佳浓度。
1．4．2 用优选出的自制实验鞘液，替代进口原装鞘液，以进口配套的全血质控物为实验样品，通过准确度、精密度指标来评价自制实验鞘液的科学性；实验鞘液室温保存半年，再每月一次，每次以新鲜血液标本为实验样品，与进口原装鞘液进行系统比对实验，进一步验证自制实验鞘液的实用性能。
1．5 统计分析实验数据以 ±S表示，采用配对t检验、相关分析、回归分析。

2 结果
2．1 不同种类以及同种不同浓度药用辅料自制的实验鞘液，对全血质控物进行检测 结果见表1。
含聚山梨酯-80、十二烷基硫酸钠的实验鞘液虽能完成Hb含量测定以及PLT计数，但每个浓度下测得的Hb均有偏低；同时PLT计数明显升高，直方图异常或无直方图。含泊洛沙姆的试验鞘液虽测得的Hb在允许范围内，但其在0.4，1.2 g／L浓度时PLT的计数不在质控物的允许范围内，只有泊洛沙姆的浓度在0.6，0.8，1.0g／L时，实验鞘液能满足实验的要求。最终以1.0g／L的泊洛沙姆浓度作为优选的浓度。
2．2 自制的实验鞘液替代进口鞘液对进口配套的全血质控物进行准确度、精密度分析实验结果及美国临床实验室改进修正案1988最终法规(CLIA’88)及仪器生产厂家对血液分析仪的允许误差见表2-2。


2．3 自制的实验鞘液替代进口原装鞘液作空白背景计数实验结果及仪器生产厂家对血液分析仪空白背景计数性能的要求见表3 。
2．4 自制的实验鞘液和进口原装鞘液以新鲜血液标本进行比对实验结果见表4。

3 讨论
3．1 全自动血液分析仪不仅要对不同的血细胞进行记数、分类，还要对不同血细胞的形态、体积大小以绘制直方图的形式表示血液血细胞的信息。这除了对仪器的设计制造有要求外，与之配套的诊断试剂也是血液分析仪能否正常工作的关键，实验中观察到：在pH 7.4 Tris缓冲液，氯化钠含量为7g／L时，泊洛沙姆浓度在0.6，0.8，1.0 g／L时能满足实验的要求，最终以1.0g／L的浓度作为实验鞘液的优选浓度。用自制鞘液替代进口原装鞘液，在SE-9000全自动血液分析仪上对其配套的进口全血质控物进行批内、批间精密度比对实验，结果表明：有可溯源的、有依据的5个质控参数指标(WBC，RBC，Hb，HCT，PLT)-2]，其均值均在全血质控物的允许范围内，其标准差小于CLIA’88最大标准差，符合CLIA’88质量控制要求；其它3个质控参数指标(McV，MCH，MCHC)均值亦在全血质控物的允许范围内，其变异系数小于仪器生产厂家的规定值。准确度、精密度符合仪器生产厂家对仪器、试剂的要求。SE-9000血液分析仪只有在开机确认空白背景计数符合设计要求时，才能准确及时地对血液进行全面的分析，用自制的实验鞘液替代进口原装鞘液进行空白背景计数，并与进口原装鞘液的空白背景计数作了比对分析，结果表明：自制实验鞘液和进口原装鞘液各项指标的空白背景计数均低于仪器生产厂家的要求，符合仪器正常工作的要求。

3．2 SE-9000血液分析仪采用鞘流技术保证单个血液细胞逐一通过细胞记数通道，再运用库尔特原理进行细胞记数，因此需要大量的高质量鞘液保证仪器正常工作。对236例新鲜血液标本的比对实验表明：两种鞘液检测的血细胞均值、标准差、变异系数基本一致，经配对t检验，P>O.05，两者间无显著性差异；两种鞘液检测项目的相关系数均大于0.983，显示两者问相关性好；各检测项目的回归方程中，斜率均大于0.981，而且截距非常小。
3．3 泊洛沙姆首先由美国成功生产，理化性质稳定，0.1～5g／dl的水溶液能耐热灭菌和低温冰冻，这和其自身具有的热敏溶胶一凝胶转变特性有关[4]。自制鞘液对贮藏要求很低，这可能是自制鞘液中的溶质被包裹在以泊洛沙姆为基质的胶囊中，溶解性、稳定性均得到提高的原因。进口原装鞘液价格昂贵，对我国环境有无污染及危害均属未知，自制鞘液的成本只是进口原装鞘液的几十分之一，成分对人体、环境无害，实验结果准确可靠，精密度良好，具有良好的可比性和溯原性，是符合当今可持续性发展、节约型社会要求的体外诊断试剂。实验表明：自制鞘液可替代进口原装鞘液运用于SE-9000血液分析仪。

参考文献：
[1] 钱士匀．临床生物化学和生物化学检验实验指导[M]．2版．北京：人民卫生出版社，1999：309．
[2] 王昌富，王治国，李艳．现代临床检验科的建设与管理EM]．湖北：湖北科学技术出版社，2005：199，203．
F3] 希森美康有限公司．SE一9000全自动血液分析仪操作手册．
E4] 娄月芬，王 晶，马佳珍，等．生物可降解的聚合物纳米粒的研究进展[J]．医药导报，2005，24(4)：309．
[5] 王欣欣，张红梅，霍斌．泊洛沙姆在药学中的应用EJ]．中华实用医药杂志，2003，3(5)：271．

这文章很有价值，SE9000的鞘液和UF50UF100的一样，还可以用在XE2100上做RBC和PLT用，泊洛沙姆是一种表面活性剂，铵丁三醇在里面用做缓冲剂，可不可以用硼砂做缓冲液呢？

不同意楼上的说法“这文章很有价值”
用在XE2100上做RBC和PLT用，能行吗？有表面活性剂泊洛沙姆和聚山梨酯-80，十二烷基硫酸钠都表面活性剂，RBC不溶才怪呐！

 哈哈哈哈!