[转帖]发光免疫常用检查项目及其临床意义

发光免疫测定（LIA）是近年来发展起来的一种体外超微量免疫测定方法，它是将具有高度特异性的免疫化学技术与具有高灵敏度的化学发光技术结合起来而建立的新的分析方法。具有灵敏度高、特异性强、精确度佳、重复性好、试剂有效期长、无放射性污染等特点。在人体外进行，操作简便，应用范围广，具有广阔的应用前景。

目前可用LIA法测定的物质有：多肽激素、小肽激素、甲状腺激素、类固醇、氨基酸和蛋白激素、药物、病毒抗原、肿瘤相关抗原。

一、垂体－甲状腺轴激素

1、血清T3 、T4测定：

LIA正常值：T3 0.6-1.81ng/ml， T4 45-109ng/ml。

T4测定是甲状腺功能试验中最基本的筛选试验。它不受含碘食物、药物或X线造影剂的影响，对病人无辐射危险，可适用于哺乳期妇女或儿童患者，对甲减的诊断较¹³¹I吸碘率灵敏可靠，对甲亢或单纯甲状腺肿引起的¹³¹I吸碘率增高，具有鉴别价值。循环血中的T3除小部分是由甲状腺组织直接分泌外，绝大部分由T4在组织中脱碘转化而来，虽然T3在血中的浓度远低于T4，但在血中却发挥着主要的生物学活性。对甲亢、甲减的诊断，正确率可达90％以上，甲亢时T3浓度几乎总是增加，有时可高于正常好多倍，按比例而言， T3的增高比T 4更为明显，因而T3／T4比值几乎总是升高，这是因为不但甲状腺分泌过多。而且外围组织T4转化为T3也增多，在用抗甲状腺药物（ATD）治疗过程中，T 4的下降快于T3，往往T 4已降至正常或低于正常时，T3还高于正常。严重甲减时T 4、T3同时减少，不严重者T4的减少远比T 3的减少为甚，此时甲状腺并没有完全衰竭，只是由于甲状腺受到高水平TSH的刺激使T 4的分泌受影响较大的缘故，而T3可正常甚至升高。

在大多数情况下，T 3值与T 4平行，甲亢时升高，甲减时降低。但在某些情况下，T 3值与T 4值可发生分离现象。如T3型甲亢时仅有T3升高而T4正常；在甲亢早期或甲亢复发初期，T3可在T4尚未升高时先增高；在甲状腺次全切术后及地方性甲状腺肿病人，T4多降低而临床无明显甲减表现，而其T3则正常或有代偿性增高。甲亢患者在用抗甲状腺药物治疗中或治疗后同时测定T3、T4比单独测定T3或T4更能反映其病情变化。

2、促甲状腺激素（TSH）测定

LIA正常值：0.35-5.5mlU/L.

正常人血清中TSH含量在一生中因年龄不同而有差异。儿童及老年人血清中TSH含量均比成人高。一般认为除新生儿外，原发性甲减病人血清TSH升高最明显，且其升高水平与甲状腺损伤程度成比例。原发性甲减病人药物治疗前血清TSH升高，治疗后降低，故测定TSH是真判断甲减治疗的较好指标。继发性（垂体性）甲减患者血清TSH可在正常范围，TRH兴奋试验表现为无反应或弱反应。

血清TSH测定主要用于：原发性与继发性甲减鉴别，轻度及亚临床型甲减的诊继，在原发性甲减用甲状腺制剂替代治疗时作为调节剂量的参考，在诊断异位TSH症候群和垂体性甲亢时有一定参考价值，在TRH兴奋试验时测定TSH对判断垂体—甲状腺轴功能有一定价值。甲亢患者血清TSH值很低，TRH兴奋试验表现为无反应。地方性缺碘性、高碘性甲状腺肿和单纯弥漫性甲状腺肿患者血清TSH值均高于正常人。

二、垂体—性腺轴激素测定

1、人促卵泡成熟激素（FSH）测定：

正常值：（！）成年男性 1.4-18.1 IU/L，50岁以后由于性功能减退而有增高趋势。（2）成年女性：月经周期中滤泡期水平（3.4-33.4 IU/L）比黄体期高（1.5-9.1IU/L），中期出现一个高峰，范围为12-30IU/L；绝经期妇女FSH显著增加，为23-116.3U/L。

临床应用：（1）原法性性腺功能低下与继发性性腺功能不全的鉴别：原发性性腺功能低下：由于卵巢和睾丸功能低下，合成分泌的雌激素及雄激素不足，血循环中性激素水平低下，对垂体的反馈抑制作用减弱，导致促性腺激素（FSH和LH）分泌增多。男性见于先天性睾丸发育不全或双侧睾丸缺如，性染色体异常所致睾丸发育障碍及曲细精管生精上皮细胞发育不全所致生精功能及间质细胞功能障碍，病人不仅缺乏生育能力而且性器官及副性征发育不全；此外还可见于后天睾丸功能障碍如睾丸外伤、手术切除、放射性损伤以及腮腺炎所致的睾丸炎等。女性可见于真性卵巢发育不全、卵巢性侏儒(Turner氏综合征) 和卵巢功能早衰等．继发性（垂体性）性腺功能低下：各种原因引起的垂体功能损害如席汉氏综合征、垂体肿瘤或被肿瘤压迫、手术及放射性损伤、脑血管病所致的垂体梗死等，均可导致垂体促性腺激素分泌减少，病人表现为阳痿、不育、闭经、毛发脱落、性欲减退等，血中促性腺激素及性激素水平均明显降低。

(2)真、假性性早熟的鉴别：真性性早熟血中促性腺激素(FSH 和LH)同时升高,而假性性早熟的病变部位在性腺或肾上腺,如卵巢肿瘤、肾上腺肿瘤及肾上腺皮质增生等，病人无促性腺激素的大量释放及排卵现象，血中 FSH 及LH不升高。

(3)原发性与继发性闭经的诊断及鉴别：原发性闭经及卵巢性闭经，血中FSH>40IU/L对女性则提示卵巢功能衰竭，FSH<30IU/L 时提示卵巢内尚有滤泡存在，高 FSH 伴高LH则可肯定卵巢功能衰竭。继发性闭经即垂体、下丘脑性闭经，若 FSH 和 LH 为异常低值或仅 LH 为异常低值而 FSH 尚在正常下限即可诊断为垂体、下丘脑性闭经，应用LRH作垂体兴奋试验可区分垂体性或下丘脑性闭经。

(4)预测排卵：预测排卵对确定受精时间十分重要，排卵前最早的激素变化是血清E2 峰的出现，随之LH和FSH亦达到峰值，LH峰一经出现则预示24-36小时后排卵，故可在月经第8天起连续测定血清E2、FSH、LH,检测其峰值以确定受精的最佳时间。

（5）更年期综合征：女性自然绝经后或因手术切除双侧卵巢或放疗使卵巢功能破坏，使促性腺激素分泌增多，同时又影响甲状腺、肾上腺皮质与垂体之间的关系，从而产生多种临床症状。男性50岁以后睾丸间质细胞功能逐渐减退，生精及分泌睾酮功能减弱，睾酮对垂体抑制功能减弱，使垂体分泌促性腺激素逐渐升高。

FSH升高常见于：睾丸精原细胞瘤、Klinefelter氏综合征、Turner氏综合征、原发性闭经、阉割、肾上腺皮质激素治疗后、原发性性腺功能减退、早期垂体前叶机能亢进症、巨细胞退行性肺癌及异位性腺样物质的分泌。

FSH减低常见于：雌激素治疗、孕酮治疗、继发性性腺功能减退、席汉氏综合征、以及晚期垂体前叶机能减退等。

2．人促黄体生成素(LH)测定：

正常值：正常人血清LH水平及性的发育、成熟及衰老都与不同的年龄阶段有关，儿童期最低，老年期最高，成年女性还与月经周期密切相关，黄体期以及卵泡期低，排卵期高。青春期前0.1-6.0IU/L;成年男性1.5-9.3IU/L,50岁以后有增高趋势：成年女性滤泡期1.9-12.5IU/L，排卵期8.7-76.3IU/L，黄体期0.5-16.9IU/L，绝经期5.0-52.3IU/L。

测定LH对诊断男或女性先天性性腺发育不全、真假性性早熟、卵巢功能早衰、了解垂体功能中下丘脑或垂体病变以及预测排卵期有一定的价值，特别是在计划生育研究工作（如不孕症的病因诊断及治疗）中具有重要意义。

3． 血清孕酮（P）测定：

正常值：男性 0.28－1.22ng/mI，女性卵泡期 0.15－1.4ng/mI,中期 3.34-25.26ng/mI,黄体期4.44-28.03ng/mI,绝经后0-0.73ng/mI。

血中孕酮增高见于：（1）排卵：在排卵前1天、当天及后1天孕酮含量成倍增加，提示排卵；（2）正常妊娠、双胎及多胎妊娠；（3）妊娠毒血症、先兆子痫、葡萄胎及原发性高血压；（4）先天性17—羟孕酮生成障碍。

血中孕酮降低见于：先兆流产、宫外孕、早产、闭经、不孕症、黄体功能不全、肾上腺或甲状腺功能严重失调等。

4．血清睾酮（TO）测定：

正常值：男性成人241—827ng/dl,女性成人14—76ng/dl。

睾酮增高见于：女性多毛症、女性男性化、XYY型女性、真性男性性早熟、多囊卵巢综合征、睾丸间质细胞瘤、外源性睾丸激素治疗及肥胖（稍增高）等。

睾酮降低见于：先天性睾丸发育不全综合征（Klinefelter氏综合症）、睾丸消失综合征、睾丸炎或强X射线照射后、垂体功能减退、男性性腺功能减退、慢性肝病急慢性肾功能减退等。

5．血清雌二醇（E2）测定：

正常值：男性21－76pg/ml，女性卵泡期28－172pg/ml,黄体期55－246pg/ml,绝经后13－93pg/ml,妊娠期最高可达30000pg/m1。

正常妊娠时血清E2水平随孕周而升高，双胎或多胎妊娠血清E2升高更明显，在胎盘娩出后急剧下降。

异常妊娠：（1）葡萄胎时在正常低值内；（2）无脑儿E2降低；（3）妊娠毒血症E2在正常低值内，严重者往往较低，若值特别低则提示有宫内台儿死亡的可能；（4）糖尿病孕妇E2异常升高，轻度糖尿病可在正常低值内。

青春期前若出现E2 水平增高，有助于女性性早熟的诊断。

在月经周期中动态观察E2水平可协助确定排卵时间。

6．绒毛膜促性腺激素（HCG）测定：

LIA 正常值：〈20mIU/ml。

（1）用于早孕诊断：在受精卵着床后5－7天（约月经第26天）即可测出HCG，用随意尿及血HCG－ß测定，所得结果基本平行，而尿的敏感度较高，凡尿中 >200mIU/ml 者即可诊断为妊娠。

（2）用于宫外孕诊断：宫外孕的早期诊断对于预防其危险并发症十分重要，HCG-ß能鉴别宫外孕和其他疾病如黄体囊肿及附件炎性包块。宫外孕诊断越早，死亡率越低，由于宫外孕胎盘分泌HCG较宫内少，因此尿免疫妊娠实验诊断本病不满意，血清HCG-ß值灵敏度及特异性均较好，可有效地解决误诊问题。通过HCG-ß 测定能早期诊断及时手术，防止输卵管破裂造成的出血及休克，并可做选择性输卵管手术，对妇女将来的生育也有积极意义。

（3）用于葡萄胎及绒癌：HCG对葡萄胎及绒癌的早期诊断价值较大，用来观察疗效则意义更大。葡萄胎及绒癌患者经化疗后，使恶变绒毛膜郎罕氏细胞坏死，依靠常规尿HCG测定分析坏死程度效果不理想，对鉴别恶变细胞是否坏死，测定血HCG可使临床上对这类患者保持高度警惕。

（4）HCG测定还可用于先兆流产、不全流产的诊断和药物抗早孕疗效观察等

三、肿瘤标志物额的测定

1．甲胎蛋白（AFP）测定：

LIA 正常值： <8.1ng/ml.

成人血清AFP浓度的检测除了可诊断原发性肝细胞肝癌外,对其他疾病的诊断及鉴别也有重要价值。

（1） 反映胎儿的状态： 检测母体血清AFP水平,可用于产前诊断胎儿有无死亡及胎儿有无遗传性缺陷及畸形存在．母体血清中AFP增多提示可能伴有胎儿疾病，如宫内死亡、遗传缺陷、严重的先天性神经管缺损畸形、无脑儿或脊柱裂等。神经管畸形等可使AFP由脑脊液漏入羊水中，羊水中AFP增高可早期诊断胎儿严重神经管缺损畸形，可考虑终止妊娠。

（2） 新生儿期：患各种肝病时AFP均可增高，包括心力衰竭引起的被动性肝脏充血、胆管闭锁新生儿肝炎等，但对鉴别诊断意义不大。

（3） 儿童期：AFP增高主要见于肝细胞肝癌、肝母细胞瘤、畸胎瘤等，其他疾病如病毒性肝炎可暂时升高，遗传性酪氨酸代谢症伴慢性肝病、毛细管扩张失调症及囊性纤维化中AFP可增高（但在其他类型的先天性肝病及免疫缺陷病中AFP病不增高），临床系统的测定AFP对这些疾病治疗效果的随访很有意义。

（4） 成人：AFP对原发性肝癌的诊断是一种有价值的测定，阳性率达95％以上，并与肿瘤大小、肿瘤分化程度、发病时间、诊断后的生存率等有关。在急性肝炎时可暂时增高，肝硬化是变化不显著，其他如恶性淋巴肉芽肿、Wilm氏瘤、内胚窦瘤、畸胎瘤等AFP增高。

2．癌胚抗原（CEA）测定：

LIA正常值:<2.5ng/ml

临床应用：（1）恶性肿瘤：特别是消化道恶性肿瘤，血清CEA值增高有较高的阳性率，其中以结肠癌阳性率最高（74％），肺癌次之（63％），食道癌及胃癌在次之（42％及37％），且与癌肿组织中CEA的含量呈正相关，同时与肿瘤浸润程度有关，随着肿瘤浸润深度的增加，血中CEA含量亦增高。胰腺癌、乳腺癌及卵巢癌在血中亦可检测到有较高的CEA值。胸水、腹水中也可检测到CEA，在某种程度上检出的阳性率超过血中CEA的阳性率。

（2）疑诊病人动态观察：吸烟的正常人和良性肿瘤也可见CEA增高，与恶性肿瘤阳性重叠，这种情况应每隔1－2周复查血中CEA浓度，若血中CEA浓度逐渐增高或保持高水平，则有恶性肿瘤的可能。

（3）疗效观察：血中CEA高水平的恶性肿瘤病人经手术或化疗或二者联合治疗后，一般应每6周复查CEA,若血中CEA值降至正常，表明肿瘤切除比较彻底或肿瘤对化疗敏感，提示预后良好，若CEA维持高水平，提示治疗失败。

（4） 随访观察：CEA阳性的病人经治疗后，应定期复查以观察血中CEA的动态变化。手术患者从第6－7周起，在以后3年内每3－4个月复查一次，如发现CEA超过正常范围，则每隔1－2月再复查一次，若CEA值持续升高及提示复发或转移。曾有报道在临床出现肿瘤复发或转移征象之前9－12个月，血中CEA测定即已预示出。对治疗前CEA正常的病人，治疗后也应定期复查，虽然血中CEA含量正常，但不一定说明病情稳定，而血中CEA含量增高则多提示肿瘤复发或转移。

（5） 预后判断：大量的病例资料分析表明，无论癌肿属于早晚期，血中CEA水平正常的病人治疗后存活率比CEA值高的长，两者在统计学上有显著意义。对那些肿瘤组织不产生CEA的患者则意义不大。

3．前列腺特异抗原（PSA）测定：

正常参考值：<4.0ng/ml.

PSA在正常情况下血清中含量甚微，前列腺癌患者升高明显，阳性率为78％，其中A期69％、B期70％、C期70％、D期82％；前列腺炎和前列腺增生症患者血清也可升高。前列腺癌较其他良性前列腺疾病的PSA浓度明显升高，三木诚等报道。90.9％未治疗的前列腺癌患者血清PSA>3.0ng/ml，最高可达1107ng／ml，前列腺癌患者经有效治疗后，血清PSA值降低，复发时PSA又重新升高。

PSA对前列腺癌的敏感性比前列腺酸性磷酸酶（PAP）高，但特异性比PAP差。因此，目前认为PAP是诊断前列腺癌的理想指标，若同时检测PSA则更能提高期诊断率，并对前列腺癌与前列腺炎、前列腺增生症具有鉴别诊断意义。

4．糖类抗原CA15－3（乳癌标）测定：

正常值血清浓度是：5.7－28.4U／ml，平均27.6U／ml，正常上限为28U／ml.

CA-15-3检测乳腺癌的最佳指标。对乳腺癌病人可进行CEA、CA-50等指标测定，但从灵敏度就特异性来看，CA-15-3是最佳指标。

由于卵巢癌的诊断及检测。卵巢癌阳性率可达71％，其Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ期的阳性率分别达27％、79％和85％，组织学分析CA-153浆液性、黏液性、子宫内膜阳性来分别为77％、50％和78％.术后化疗中,CA-153的减少与疗效密切有关。

四．血清胰岛系列测定及临床意义。

（1）.血清胰岛素测定及临床意义

LIA正常值：Ins<50uU /ml

Ins也是一种蛋白质，其分子量为5734道尔顿，共有51个氨基酸组成，双链结构。它是由胰岛的ß－细胞合成分泌的，是机体内唯一能降低血液中葡萄糖的内分泌激素。一般肥胖者糖尿病前期和成人型糖尿病患者常偏高，儿童和青年型糖尿病人常偏低。肥胖与糖尿病有着密切的关系。有人认为肥胖是糖尿病的前趋，容易出现糖尿病，这是因为胰岛长期被迫分泌大量Ins，勉强维持了糖代谢的需要，又增加了脂肪的库存。这样长期下去胰岛的分泌功能衰竭，出现糖尿病。实验证明肥胖病人Ins分泌量比常人多4倍。

由于Ins可受多种因素影响：如血经循环后大部分被肝肾分解，半衰期极短。故不能精确的反映体内胰岛ß－细胞的分泌功能，限制了Ins的临床价值。近年来C肽的测定弥补其不足，并推动了糖尿病的研究和发展。

（2）．C肽的测定和临床意义

LIA正常值：空腹：1.0±0.23ng/ml；当口服葡萄糖后，60分中出现高峰血值：3.1ng/ml

所谓C肽是指胰岛素原（由86个āā组成，分子量9000道尔顿，它的结构是由Ins及连接肽两部分组成，连接肽有35个āā组成）它在胰岛素原转化酶作用于分解时，与Ins的AB两链相接的CA1赖、CA2精、Bc1精及Bc2精等四个氨基酸分离形成的31个氨基酸的多肽。

正常人24小时尿中排出C肽为36±4ug。幼年型糖尿病者为1.1±0.5ug.；成年型糖尿病者为24±7ug。C肽清除率与肌酐清除率无明显关系。C肽的清除滤较Ins微高。C肽为5.1±0.6ml/min,后者为1.1±0.2ml/min.每日C肽排出量相当于胰岛分泌量的5％，占Ins总量的0.1％，因此C肽的测定可应用于临床。

C肽具有如下特点：（1）在胰岛的ß细胞的分泌中，Ins与C肽总克分子量相等。（2）胰岛素半衰期为4.8min,而C肽为11分钟胰岛素原为17.5分钟。 (3) 胰岛素在肝肾内分解而C肽不被分解是完整链从肾脏排出。(4) C肽无生物学活性,但具有很强的种属特异性,与抗胰岛素无交叉免疫反应。.由于胰岛素原的浓度还不到C肽的十分之一,故一般测得C肽(总C肽)可代表血中的游离C肽.

C肽测定的临床意义:

（1）可反映机体胰岛ß细胞的分泌功能，特别是对外源性胰岛素治疗的病人,可测定C肽,因为外源性胰岛素制剂中不含C肽，以及ß-细胞分泌时胰岛素和C肽分子数相等.经临床上同时测定血清胰岛素和C肽浓度是平行相关的.由此可推断内源性胰岛素分泌情况.

胰岛素和C肽是等摩尔浓度由胰岛ß-细胞分泌.在达到体循环前途径肝脏,肝对C肽的摄取量很少,而对胰岛素的摄取约20-40%。C肽在外周血的降解较胰岛素慢，于是外周血中C肽和胰岛素相比C肽要高数倍。故C肽更能反映ß-细胞的分泌功能。

（2）C肽测定对糖尿病患者的分型和低血糖症的鉴别有指导意义

成年型糖尿病患者内源性胰岛素分泌量比常人稍高，葡萄糖浓度也高，胰岛素和C肽浓度也上升。在幼年型糖尿病引起胰岛素绝对分泌不足，故血清C肽浓度明显降低。

幼年型糖尿病根据病情可分为易变和稳定二类亚型。有的幼年型糖尿病抗－胰岛素效价升高，而C肽浓度不升高，给与糖负荷后，58％的稳定性幼年型糖尿病患者C肽浓度升高，而易变型患者不升高。可见稳定性幼年型患者虽然在基础情况下内源性胰岛素分泌不足，但胰岛的ß-细胞上有一定的储备能力.这些患者在治疗时可给予适量的口服降糖药.

在成年型糖尿病患者血循环中C肽浓度与是否需用胰岛素治疗有关.需用胰岛素治疗患者,在负荷试验后,C肽浓度未见升高,而能为口服药物控制患者,C肽浓度升高.所以对成年型患者测定C肽 ,可为患者选择胰岛素或口服降糖药提供有力的参考.

对脆性糖尿病患者可不停用外源性胰岛素治疗,而通过测C肽来了解胰岛素的分泌情况协助对病情的了解.对低血糖的鉴别诊断.低血糖症病因较复杂，应鉴别是否由ß-细胞病所引起的C肽数,对鉴别有很大意义。应用胰岛素治疗的糖尿病患者，有时伴有胰岛细胞瘤或ß-细胞增生,导致严重的低血糖症.测C肽有助诊断。

(3)测定C肽浓度可作为鉴定胰脏手术后的疗效和残存ß-细胞分泌功能的一项定量指标,以确定是否给与胰岛素.在随访中多次测定C肽浓度,也有利于判定肿瘤有无复发或转移.

六、糖化血红蛋白的测定

正常值：<6.05%

糖化血红蛋白（GHb）是血中葡萄糖和红细胞的血红蛋白相结合的产物，它和血中葡萄糖的水平成正比关系。是在红细跑生命过程中（寿命120天）缓慢生成的，因此它可以反映4个月平均血糖水平，特别是前1~2约更为准确。其生成量多少与血糖浓度成正比。可以了解近 期血糖控制情况，判断治疗效果，而血糖浓度值能反映当时的血糖水平。若糖化血红蛋白>9%，说明病人存在持续高血糖状态，一出现糖尿病肾病等慢性并发症。