[转帖]SE–9500简介及操作

 

 

1 仪器简介

SE–9500是sysmex公司生产的五分类血细胞分析仪。可分析并输出血液标本中23个参数的结果。使用半导体激光器血细胞计数方法为基础，采用电子脉冲（RF）和鞘流（DC）技术，由光检测器（DIFF）分析白细胞，采用鞘流技术进行红细胞和血小板计数。根据血红蛋白衍生物（SLS-Hb）检测方法，用HGB检测器分析血红蛋白（HGB）。使用IMI检测器，根据RF/DC 检测方法分析未成熟细胞。分析数据显示在键盘液晶屏幕和信息处理装置上。利用所提供血细胞各种指标参数 23 项(WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、NEUT%、LYMPH%、MONO%、E0%、BAS0%、NEUT#、LYMPH#、MONO#、EO#、BASO#、RDW–SD、RDW-CV、PDW、MPV、P-LCR)为临床疾病的诊断、病情和疗效观察以及预后判断提供信息。

2 分析原理

2.1 细胞计数及体积测定原理：

采用电子脉冲（RF）和鞘流技术（DC），定量地吸取血液标本, 按规定的倍率稀释后,送入各检测容器。在检测容器中有一小孔，小孔是电阻抗法细胞计数的重要成分, 其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，其外侧细胞悬液中有一个外电极，在两侧电极之间通有直流电，稀释液通过时产生稳定的电流。当浮游在稀释液中的血细胞通过小孔时，由于血细胞相对稀释液是一不良导体，因此小孔感应区内电阻增加，于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。电压增加的程度取决于细胞体积的大小，细胞体积越大引起的电压变化越大，产生的脉冲振幅越高。通过对脉冲大小的测量可以测定出细胞体积，记录脉冲的数目可以得到细胞计数的结果。利用此原理进行白细胞总数 (WBC)、淋巴细胞，中性粒细胞，单核细胞，红细胞(RBC)和血小板(PLT)计数，而嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞则使用鞘流技术（DC）和专用细胞溶血液。

2.2 红细胞压积测定原理：

采用RBC累积脉冲高度检测方法。

2.3 血红蛋白测定原理：

采用血红蛋白衍生物（SLS-Hb）检测方法。被稀释的血液加入溶血剂后 , 血红蛋白溶解释放出血红蛋白 , 后者与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物 (SLS-Hb)，进入血红蛋白测试系统。在555nm 特定波长下比色，吸光度的变化与液体中HGB含量成比例，仪器显示出HGB浓度结果。SLS血红蛋白测定法的血红蛋白转换速度很快，而且该方法不使用毒性物质，使该方法成为自动检测的一个合适的方法。同时，由于该方法可用测量氰化高铁血红蛋白，所以该方法也可以准确的测量含有高铁血红蛋白的血液如：质控血液。

2.4 各种红细胞指数检测原理：

MCV、MCH、MCHC、RDW 均根据仪器检测的RBC 、HCT 和 HGB 的实验数据 , 经电脑换算出来 ,RDW 来自近万个红细胞的检测数据 , 由电脑统计处理而得 ,即用所测红细胞体积大小的变异系数来表示。

2.5 白细胞五项分类计数原理

使用半导体激光器的流式细胞计数方法 , 应用鞘流技术使白细胞束分别经过五个检测系统计数。鞘液注射器将稀释后的标本送入光检测器中，在光检测器中，采用半导体激光器用流式细胞计数法对标本进行检测。可将白细胞大致分为淋巴细胞，单核细胞或粒细胞，利用特殊的溶血剂特异的进行嗜酸、嗜碱细胞计数。溶血后的液体内剩余的白细胞将单个的通过检测器，接受VCS三种技术的同时检测。体积法(Volume，V)的测量仍采用电阻法。电导法 (Conductivity，C)是根据细胞壁能产生高频电流的性能采用高频电磁探针测量细胞内部的结构，检测细胞核细胞浆的比例及细胞内部部密度，借此来鉴别细胞。光散射法（Scatter，S ）是利用细胞表面光散射的特点提供的另一种细胞类型的鉴别方式，具有对细胞颗粒的构型和颗粒质量的鉴别能力。来自激光光源的单色光束直接进入计数池的敏感区，在 10～70 度对每一个细胞进行扫描分析 , 给出细胞结构（如核分叶情况，核的形态）和光散射信息。

2.6 血小板检测原理

根据鞘流技术和流式细胞计数方法，对PLT进行分析。

3 基本资料与性能参数

3.1 基本性能资料

生产商：日本sysmex公司

电  源：117伏± 10%、220伏± 10%， 240伏 ± 10%（50 / 60赫兹）

功  率：主机和进样器装置：  820-870伏安

压缩机：            400伏安

资料处理系统：600伏安

分  类：五分类

标本吸样量：手动100μl，自动250μl

基本原理：电子脉冲（RF）和鞘流技术（DC）

进样方式：自动模式、手动模式

测试速度：

CBC：                         每小时约120个标本

CBC + WBC5diff：              每小时约150个标本

3.2 仪器工作环境要求

在15℃-30℃的室温下使用该仪器；

在45% - 85%的相对湿度范围内使用；

如果室内温度和相对湿度不合适，需对该环境进行空气调节；

避免将该仪器安装在温度过高或过低的地方；

避免安装在阳光直射击的地方；

选择一个通风良好的位置；

避免安装在靠近无线电报或通讯设施的地方，它们会产生高频电波可引电磁干扰。

3.3 线性范围和不确定度，见表1

表1（全血模式）线性范围和不确定度

检测项目
 线性范围
 不确定度

WBC 0～100.0 ×109 / L 3.0%
 
RBC 0～8.00 ×109 / L 1.5%
 
HGB 0.0～250 g / L  1.0%
 
HCT  0.0～60.0 %  1.5%
 
PLT   0～1000 ×109/ L 4.0%
 3.4 SE-9500常用检测参数，见表2

表2 SE-9500常用检测参数

项目分组
 检测项目及提示信息
 
细胞计数CBC
 WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、RDW–SD、RDW-CV、PDW、MPV、P-LCR、PCT
 
白细胞分类
 NEUT%、LYMPH%、MONO%、E0%、BAS0%、NRBC%、NEUT#、LYMPH#、MONO#、EO#、BASO#、
 
 红细胞/血小板提示
 Aniso、Micro、Macro、NRBC、Hyper、Hypo 、PLT Abn Dst
 
白细胞形态提示
 Blast、Imm Gran、Letf shift、Atypical Ly、WBC Abn Scg、

RBC Lyse Res、NRBC
 

 

3.5 SE-9500检测干扰因素

严重脂血、黄疸和溶血对血红蛋白测定有干扰，进而影响计算参数MCH和MCHC，对红细胞测定的影响较小。

4 试剂

试剂组成：CELLPACK-3D (PKD-920A)、CELLSHEATH（SE-90L）、STROMATOLYSER–BA（SBA-200A）、STROMATOLYSER –WL（SRW-200A）、STROMATOLYSER–EO（MEO-220A）、STROMATOLYSER–3D（SED-920A）、SULFOLYSER（SLS-220A）、STROMATOLYSER–IM（SIM-220A）、CELLPACK（PK-30L）、MANORESH（MR-50）。

所有试剂都可在5-30℃贮存至有效期。

5 仪器常规操作

5.1 开机程序

a. 开机前检查：仪器是否完好，试剂准备是否充分；

 b. 按顺序打开电源：激光装置，空气压缩机，主机，仪器，LIS系统电脑，等待仪器自检；

c. 双击LIS电脑桌面“SE-9500”程序的图标，自动进入LIS系统和SE9500血分析仪连接程序；

d. 仪器进入自动清洗及背景检测，当仪器屏幕左上方显示“READY”，表示仪器通过了背景检测并进入待分析状态。

5.2 试剂更换程序

当分析过程中试剂耗尽，仪器就自动停止运行，并在仪器屏幕上显示下列错误信息，此时用新试剂更换指定的试剂。如表3所示：

表3 更换试剂信息

错误信息
 新的试剂
 
更换PK容器
 CELLPACK
 
更换SE容器
 CELLSHEATH
 
更换MEO容器
 STROMATOLYSER–EO
 
更换PKD容器
 CELLPACK-3D
 
更换SRW容器
 STROMATOLYSER –WL
 
更换SED容器
 STROMATOLYSER–3D
 
更换SIM容器
 STROMATOLYSER–IM
 
更换SLS容器
 SULFOLYSER
 
更换SBA容器

更换MR容器
 STROMATOLYSER–BA

MANORESH
 

5.2.1 更换试剂步骤

a. 准备一个新的试剂并确认没有超过有效期；

b. 取下新试剂瓶上的盖；

c. 取下空试剂瓶上的盖，向上垂直拉出浮动开关或方形容器的出口；

d. 取下浮动开关的支持板；

e. 将该浮动开关或方形容器的出口，垂直插入新试剂容器中，并拧紧盖；

f. 安装好浮动开关支持板；

g. 按主机键盘面板上的[REPLENISH REAGENT]键，仪器进行试剂重新定位；

注意：

?使用前，让试剂在室温（15 - 30℃）至少放置24小时；

?在处理可能经过冷冻的试剂时，按包装单上给出的注意事项进行操作，否则，就可能无法得到正确的分析结果；

?使用前请确认试剂颜色或没有受到污染，颠倒摇匀10次，若有冻结现象请解冻后使用；

?更换试剂溶液时，应戴上橡胶手套，避免溶液接触到皮肤；

?待更换试剂容器剩余少量溶液禁止倒入新的新试剂中，否则可能无法得到正确的分析结果；

?开封后试剂使用期限为60天；

  ?如果试剂溶液不小心溅到眼睛上，立刻就近用清水冲洗眼睛或用洗眼仪冲洗后，接受医生治疗。

5.3  分析程序

5.3.1手动模式

当系统处于准备就绪状态时，可以执行手动模式操作。在该模式下操作，要求工作人员将标本进行手动混合，按下列步骤进行标本分析。

5.3.1.1 采集并制备EDTA·K2盐抗凝的标本

要求的标本体积: 1.0毫升或更多；吸出的标本体积:约250微升，若采用真空抗凝管，请按真空抗凝管要求采血。

5.3.1.2 输入标本识别号，设置手动模式。

a. 保证仪器处于准备就绪状态。准备就绪（READY）发光二极管应发亮；

b. 按主机键盘面板上的[SAMPLE NO]键，选择进入SET MANUAL NO显示手动标本编号设置；

c. 使用数字键输入标本识别号；

5.3.1.3 分析标本。

a. 颠倒试管，将标本管彻底混合；

b. 小心取下标本盖，不要使血液溅出；

c. 将标本管置于取样针中；然后按开始（START）开关，当准备就绪（READY）发光二极管闪烁时，切勿取下标本管；此时正在吸出标本；

d. 当准备就绪（READY）发光二极管熄灭，并且连续两次发出短促的蜂鸣声，即可向下垂直取下标本管。

e. 当准备就绪（READY）发光二极管重新发亮时，准备下一个标本，并重复a～d各步。

注意：

·标本管的长度应为75毫米或更短；

·切勿使用零作为标本识别号，否则结果无法进行保存，如果将识别号置于0，即在吸液过程中会发出短促的蜂鸣声；

·分析标本时，保证所分析血液充分摇匀。

5.3.2 进样器模式

当仪器处于准备就绪状态时，可以执行进样器模式下的分析，该模式允许自动混合、吸液和标本分析。

5.3.2.1 采集并制备EDTA·K2盐抗凝的标本

要求标本管的直径14～15mm，标本体积为: 1.0～7ml，若采用真空抗凝管，请按真空抗凝管要求采血；仪器要求的标本体积: 250μl。

5.3.2.2 输入标本识别号，并设置自动进样模式（如果不使用条形码的话）

a. 保证仪器处于准备就绪状态。准备就绪（READY）发光二极管应发亮；

b. 按主机键盘面板上的[SAMPLE NO]键，选择SET AUTO NO进入自动模式标本编号，使用数字键输入标本号，设置架号（SET RACK NO），标本所放置架上管号（SET TUBE POS）；

d. 检查标本的标本架编号和试管位置编号，与待检测架号是否一致。

5.3.2.3 分析标本

a. 将标本管放在标本架中，将该标本架置于进样器后侧的进样槽中，一次最多可装入10个标本架；

b. 在仪器屏幕中的功能菜单上点击[SAMPLER START/STOP]键，开始进行自动进样器模式下的分析；

c. 当所有标本架都检测完成后，移向进样器左侧的标本架槽中时，准备就绪（READY）发光二极管发亮。

5.3.2.4 在进样器模式分析过程中，按[SAMPLER START/STOP]键，进样器停止，可进行急诊分析。

a. 按[SAMPLER START/STOP]键终止进样器运行，可以执行急诊手动分析；

b. 按主机键盘面板上的[SAMPLE NO]键，选择进入SET MANUAL NO显示手标本编号设置；，输入标本识别号，用于急诊分析；

c. 按与普通分析相同的步骤分析标本；

d. 完成急诊分析以后，按[SAMPLER START/STOP]键，恢复自动进样器操作。

6 仪器保养

6.1 每日保养

6.1.1 清洗检测器室和稀释管路（关机, 至少每运行24小时就关机一次）

a. 在主机键盘面板上按[关机SHUTDOWN]键；

b. 将CELLCLEAN液放在取样针下；然后在该状态按起动[START]开关；

c. 当准备就绪（READY）发光二极管闪烁，同时蜂鸣器发出蜂鸣声时，正在进行吸液；

d. 当准备就绪（READY）发光二极管熄灭，并且蜂鸣声停止时，取出CELLEAN液；

e. 完成关机程序以后，主机的液晶屏幕上显示信息“关闭主机”。

6.1.2 从压缩机集液室中取出液体

每天分析结束时，检查压缩机集液室中的液面位置；然后将收集的所有液体丢弃。

a. 关闭主机电源，保证压缩机的压力表读数为0；

b. 按顺时针方向转动集液室并取下；

c. 将液体丢弃，然后再接好,保证室内有一个浮子。

6.2 需要时进行的维护

6.2.1 清洗冲洗池

6.2.2 清洗旋转阀托盘

6.2.3 清洗穿刺取样器托盘

6.2.4 取出凝块(排除堵孔程序)

6.2.5 清洗IMI检测器孔

6.2.6 清洗RBC检测器孔

6.3每月保养

清洗旋转阀

如果已分析的标本数达到30000个标本，即按说明书所述程序清洗旋转阀。

6.4仪器污染

6.4.1仪器在维护、般运时，应注意戴上橡胶手套，使用指定的工具和部件，否则会导致细菌感染；

6.4.2仪器在维护、般运时，应执行自动冲洗程序；

6.4.3仪器在维护、般运时，清空样品区样品及废物区，应用酒精或消毒剂擦拭仪器外壳；

6.4.4完成处理后用消毒剂洗手；

6.4.5如果不小心接触到废液，则应先用消毒液清洗，再用肥皂洗净，如果污物溅入眼内，立即用大量清水冲洗，并马上请医生处理。

7仪器质控

7.1质控品要求

7.1.1 质控品的类型

采用仪器配套质控品（SYSMEX系列质控品）。

7.1.2 做质控的时间间隔

每个工作日早上开机后，检测病人标本前或同病人标本一同检测。

7.1.3 需要质控品的浓度

同时检测中值/低值或中值/高值的两种不同浓度水平质控品。

7.1.4 质控品准备

将质控品从冰箱中拿出，室温放置15分钟，瓶盖向上来回搓动8次，瓶盖向下来回搓动8次，轻轻颠倒混匀8次，使质控品完全混匀，避免产生气泡。

7.2 质控品检测

具体操作步骤见手动模式，按照检测患者模式。

7.3 质控图正常分布规律

质控点应均分布在均值的两侧，95.45%的数据应在 ±2SD范围内。

7.4 质控结果分析

12S规则：1个质控点超出 ±2SD，提示警告，表示存在随机误差或系统误差；

13S规则：1个质控点超出 ±3SD，提示存在随机误差或系统误差；

22S规则：2个连续的质控点超出 +2SD或 -2SD，提示存在系统误差；

检测人员负责查看质控数据及质控图形，如果发现结果违背质控规则，提示报警或出现失控时，通知组长，协助处理并分析失控信号的真伪。并在LIS系统上填写失控报告并对数据进行分析记录。

7.5 失控处理

失控信号由多种因素引起，如操作失误、试剂或质控品本身的原因、仪器保养维护方面的因素等。因此，当出现失控信号时，应查明失控的原因，对失控做出恰当的判断。

8仪器校准

8．1仪器可每半年校准一次，校准采用新鲜血校准，先按照校准程序使用SCS-1000 SYSMEX CALIBRATOR校准品对SYSMEX XE-2100血细胞分析仪进行校准，校准通过后，使用SYSMEX XE-2100血细胞分析仪对新鲜血进行定值，具体见《新鲜血（校准品）制备和定值程序》及《血分析仪校准程序》

a. 校准准备：任取一份正常人新鲜血在SE-9500分析仪上连续测定11次，用后10次结果分别计算WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的变异系数（CV）, 要求：WBC≤3.0%、RBC≤1.5%、Hb≤1.0%、Hct≤1.5%、PLT≤4.0%；

b. WBC、RBC、Hb、Hct、PLT定值：经培训的工作人员用SYSMEX XE-2100血细胞分析仪按规范操作方法测定新鲜血11次，计算每2-11次结果的均值，作为上述参数的定值；

c. 血细胞分析仪的校准：取准备好的新鲜充分混匀，在各待校准仪器上重复测定11次，分别计算各仪器WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的均值及其与校准物定值的偏差：

偏差＝
按以下标准判断判断仪器是否需要校准：WBC≤1.5%、RBC≤1.0%、Hb≤1.0%、Hct≤2.0%、PLT≤3.0%；当偏差小于上述参数所规定的范围，则不必更改校正系数；当上述参数检测结果所得偏差大于10%，PLT偏差大于15%时，需请厂商维修人员进行原因检查和处理。计算需校准参数的校准系数，将新的校准系数输入仪器替换原校准系数。计算公式为：

新校准系数=原校准系数×靶值/仪器检测值

d. 校准结果的验证：取第二份新鲜血，充分混匀后在各仪器上重复测定11次，计算第2-11次结果的均值及其与定值的偏差，当偏差在上述要求范围内，表示校准结果满足。

8.2仪器可每半年校准一次,可由厂家提供的配套校准品进行校准。

a. 校准前仪器精密度检测：任取一份正常人新鲜血在仪器上连续测定11次，用后10次结果分别计算WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的变异系数（CV），若WBC≤3.0%、RBC≤1.5%、Hb≤1.0%、Hct≤1.5%、PLT≤4.0%，则表明仪器性能稳定，可以进行校准，若超过允许范围，则对仪器进行维护保养，必要时联系厂家维护人员；

b. 校准物测定：取校准物在仪器上连续测定11（或6）次，用后10（或5）次结果分别计算仪器WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的均值及其与校准物定值的偏差；

偏差＝
按以下标准判断判断仪器是否需要校准：WBC≤1.5%、RBC≤1.0%、Hb≤1.0%、Hct≤2.0%、PLT≤3.0%；当偏差小于上述参数所规定的范围，则不必更改校正系数；当上述参数检测结果所得偏差大于10%，PLT偏差大于15%时，需请厂商维修人员进行原因检查和处理。

C．计算需校准参数的校准系数，将新的校准系数输入仪器替换原校准系数。计算公式为：

新校准系数=原校准系数×靶值/仪器检测值

d. 校准结果的验证：取剩余校准品，充分混匀后在仪器上重复测定11（6）次，计算后10（或5）次结果的均值及其与定值的偏差，当偏差在上述要求范围内，表示校准结果满足，若偏差不在上述要求范围内，则表明校准失败。

8.3实验室自行要求校准时间间隔，仪器厂家（SYSMEX）不要求校准在指定的时间间隔内完成，但是当质量控制数据随时间变化时，应对仪器进行校正，为保证血分析仪系统准确性，暂定每半年进行一次校准，当卫生部或广东省室间质评结果都是满分时，可以适当延长校准时间间隔，但最长不超过1年。

9仪器操作卡

9．1检查试剂，电源。

9．2按顺序打开电源：激光装置，空气压缩机，主机，仪器，等待仪器自检。

9．3在READY状态下，按SAMPLE NO ，进行样本编号。

9．4混匀样本，将样本置于吸样针下，按START键，进行样本检测。

9．5在微机上进行结果分析，审核，报告结果。

9．6按SHUTDOWN键进入关机程序，按提示用CL-50清洁液进行关机清洗。

9．7按顺序关闭电源：仪器，主机，空气压缩机，激光装置。

 

10 仪器试剂的技术支持保养

10.1 仪器的厂家代表

公  司：深圳市信捷科技发展有限公司

联系人：王启斌

电  话：13825207557  83443232

10.2 试剂代理商

公  司：深圳市信捷科技发展有限公司

联系人：王启斌

电  话：13825207557  83443232

10.3 仪器维修

公  司：深圳市信捷科技发展有限公司

11 参考资料

SE–9500全自动血液分析仪主机操作手册

12 记录表格和附件

《SE-9500仪器日常使用记录表》

《SE-9500仪器维护保养记录表》

《SE-9500仪器操作卡》

《SE-9500仪器校准记录表》