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血液标本的采集、保存和处理
一、全血细胞计数（CBC）
1、毛细血管采血法
【采血部位】 WHO推荐以左手中指或无名指指尖
内侧为宜，婴幼儿手指太小可用拇指或足底部内外侧缘。严重烧伤患者，可选择皮肤完整处采血。
【采血器材】 三棱针或专用“采血针”、微量定量吸管、标本容器等。
【采血步骤】 首先用手指按摩采血部位，使中指或无名指指尖自然充血。再用75%酒精棉球消毒皮肤。待酒精挥发干燥后，用左手拇指和食指固定采血部位，右手持消毒刺针，自指尖腹侧迅速刺入2～3mm，立即出针，让血液自然流出。用消毒棉球擦去第一滴血后，按需要依次采血。采血完毕，刺处应用消毒棉球擦净。
【注意事项】
⑴.所选择的采血部位，不能有冻疮、紫绀、水肿、炎症等。
⑵.皮肤消毒后，一定要乙醇挥发干燥后采血，否则流出的血会四处扩散而不成滴。
⑶.为避免交叉感染，采血针在使用前应进行高压灭菌，并严格实行一人一针制。
⑷.如穿刺后血液不易流出，可于伤口远端稍加压力，或重新穿刺。切忌用力挤压，以免混入大量组织液，使血液稀释影响检验结果，且血液更易凝固。
⑸.进行多项检查时，采取标本的顺序为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数等。出血时间测定需另刺一部位，凝血时间另行测定。
2、静脉采血法
【采血部位】 通常采用肘静脉。当肘静脉不明显时，可采用手背部、手腕、果窝部和外踝部静脉。幼儿可采用颈外静脉采血。
【采血器材】 根据采血量可选用2ml、5ml或10ml一次性注射器。国内以生产专供医学检验用真空采血装置，有套筒式和头皮静脉式两种，后者还设计备有软橡皮套管式止血装置，穿刺回血后，即可将另一端的硬插管插入真空定量采血试管中（已硅化），血液到量后，拔出硬插管即可止血，当插另一真空定量试管时又可采血，这个过程中血标本不外溢和污染。各种真空定量贮血抗凝试管，标有不同的色码，适于不同的检验项目。其他器材有压脉带、垫枕、75%乙醇、30g/L碘酊和无菌棉签等。
【抗凝剂】 ICSH推荐用乙二胺四乙酸二钾盐，其含量规定为1.5～2mg/ml血。
【采血步骤】
⑴.采血前按检验项目要求，准备好相应的采血器材。
⑵.患者取卧位或坐位，手臂伸直平放在床边或台面枕垫上，暴露穿刺部位。
⑶.找好采血静脉后，先用30g/L碘酊棉签从内向外顺时针方向消毒穿刺皮肤，稍等片刻再用75%的乙醇棉签以同样方式消毒并擦去碘迹。在采血部位的上方扎上压脉带，嘱患者紧握拳头，使静脉显露。如静脉仍不太明显时，可嘱患者反复伸握拳数次，促使静脉怒张。肥胖型患者，上述伸握拳数次后静脉还不明显，这时必须凭操作者经验，以左手食指在采血部位触摸，发现静脉走向后，试探性穿刺往往成功。
⑷.操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端，右手持注射器或其它穿刺用具，使针头斜面和针筒刻度向上，先以约与皮肤30O角度的位置迅速刺破皮肤，然后适当降低角度穿破静脉壁进入静脉腔中，见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针头滑出，但不可用力深刺，以免穿破静脉造成血肿。
⑸.用右手食指将针头固定，左手缓缓抽动注射器内芯，至所需血量后，解开压脉带，嘱患者松拳，用无菌干棉签压住伤口，拔出针头。
⑹.取下针头，将血液沿瓶壁缓缓注入事先准备好的抗凝瓶中，或将血直接收集在选定色码的真空定量试管中，轻轻混匀，防止凝固，即为抗凝全血。
⑺.采血完毕，应再次核对病人姓名和号码，并立即清洗器材，如属一次性注射器或真空定量采血装置，应将用过的器材放在固定的回收箱内，决不能任意丢弃，污染环境。
【注意事项】
⑴.采血前应向病人耐心解释，以消除不必要的疑虑和恐惧心理。如遇个别病人进针时或采血后发生眩晕，应立即拔出针头让其平卧休息片刻，即可恢复。必要时可给患者嗅芳香氨酊、针刺（或拇指压掐）人中和合谷等穴位。若因低血糖诱发眩晕，可立即静注葡萄糖或嘱患者口服糖水即可。如有其他情况，应立即找医生共同处理。
⑵.应防止血标本溶血。造成溶血的原因有注射器和容器不干燥、不清洁；压脉带捆扎时间太长，淤血过久；穿刺不顺损伤组织过多；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或用力推出产生大量气泡；抗凝血用力振荡等。溶血后的标本，不仅红细胞计数和红细胞比积降低，还使血清（浆）化学成分发生变化，因此必须避免。
⑶.为了避免淤血和浓缩，压脉带压迫时间不可过长，最好不超过半分钟。
⑷.抽血时，只能向外拉，不能向静脉内推，以免空气注入形成气栓，造成严重后果。
【标本保存】 抗凝血在室温下， WBC、RBC、PLT可稳定24h，白细胞分类可稳定6-8h, 血红蛋白可稳定数日，但2h后粒细胞形态即有变化，故需作镜检分类者，应及早推制血片。虽然4OC条件可延长血液贮存期，但血小板不宜在低温下贮存，否则会影响PLT和MPV值，不能及时检验时，血液应在室温保存。在使用半自动血液分析仪时，血液需经预稀释后方能检验，此时应特别注意稀释溶血现象。故稀释血液后应尽快测定，否则RBC不准，进而又可影响Hct、MCV、MCH及MCHC的测定。使用特别的附着有溶血抑制剂的稀释标本杯，可避免此种现象。
二、血沉检查
【抗凝剂】 106mmol/L柠檬酸二钠盐溶液（与血液按1：4比例混匀）。
【标本收集】 仪器法需采取患者静脉血2.4ml，注入装有0.6ml抗凝剂的血沉管中加盖后，轻轻颠倒混匀。血沉架法与仪器法不同，前者需采取患者静脉血1.6ml，注入装有0.4ml抗凝剂的试管中，轻轻混匀。
【标本保存】 室温保存，12小时内检测完毕。
三、血栓与止血检查
【器材】 硅化玻璃或塑料注射器、高质量塑料
或聚乙烯试管、21G1.5或20G1.5号针头等。采血用品推荐使用真空采血系统。
【抗凝剂】 109mmol/L柠檬酸钠溶液（与血液按1：9比例混匀）。当患者的红细胞压积过大时可能得出错误的实验结果。这时建议重新采血，并使血浆中枸橼酸钠的浓度低至正常水平。也可使用如下三种方法确定在收集高比积血标本时所用枸橼酸盐的体积：⑴.采用查图法，得到相应抗凝剂的用量；⑵.使用公式计算用量；抗凝剂用量=0.00185×血量（ml）×（100-病人红细胞压积）；⑶.因为临床习惯使用9：1比例的方法，那么可以使用不同浓度的抗凝剂匹配不同红细胞压积的血液，即可通过抗凝剂的浓度来达到血与抗凝剂之间保持9：1的比例（下表）。
红细胞压积与枸橼酸钠溶液浓度间的关系
红细胞压积（%） 枸橼酸钠溶液浓度（%）
〈10 5.63
10～20 5.32
20～55 3.13
55～60 2.69
60～70 2.19
＞70 1.57
【标本采集】 当用双注射器技术进行凝血试验时，应将第一个注射器内抽吸出最初的2～3ml血液弃去，或用做其他试验。换上一支内含抗凝剂的注射器，采取所需量的血液。取样完毕，取下针头，将注射器喷口贴靠在试管壁上，使血液缓缓沿管壁流下，以防产生泡沫或过度振荡。随后立即轻轻颠倒3～4次混匀，避免用力振荡。如果使用真空采血系统，一次静脉穿刺后，其所采集的第一管血可用于血生化等其它检验，第二管用于血栓和止血实验。
【标本运输】 最好在专业实验室内采血，或尽快送至检测地点，严防剧烈振动、日光直射和异物落入。标本需室温下运送。低温会损伤血小板，至使Ⅵ，Ⅺ活化，使APTT和PT缩短。但有些项目需在４℃下运送，以防止因子Ⅴ和Ⅱ的降解。真空采血系统的真空管均带有管塞，可防止因二氧化碳散失而导致的pH值改变，避免污染，保证医护人员的安全。
【标本处理】 标本应尽快离心。一般在15～20℃离心，但纤溶试验需在４℃左右离心。富血小板血浆需慢速离心800g/15分钟；贫血小板血浆需快速离心2000～2500g/30分钟。吸取血浆层的中三分之一的血浆供检测用。有溶血的血浆会引起血小板活化和凝血时间缩短，应弃之不用。
【标本保存】血浆标本原则上应立即检测或当天检测，否则应低温保存。保存时间与保存温度有关，22～24℃保存2小时，2～4℃保存4小时，－20℃保存2周，－70℃保存6个月。
【注意事项】
⑴.尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行。取血时病人应松弛，环境温暖，防止静脉挛缩，止血带的压力要尽可能小，压力大及束缚时间长可影响局部血液的浓缩和内皮细胞释放t-PA,后者将引起纤溶活性增强，血小板释放反应及某些凝血因子活性增加。
⑵.采血人员应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，外源性凝血因子进入针管。
⑶.取血时，拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平稳进入注射器，防止气泡产生；抽血过慢或不太顺利，可能激活凝血系统，导致凝血因子活性增高、血小板数假性降低等异常结果。
⑷.从输液管采取的血样常含小凝血块及污染的组织液，有时尚可含有肝素等药物，导致凝血时间不应有的延长，故不易采用此法。
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