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在酶活性测定中均涉及K值,K值的计算源于酶活性单位定义,其来龙去脉如下:
酶活性单位（国际单位）: 标准状态下，每分钟使一微克分子作用物发生转变的酶量。
根据物质的摩尔消光系数:ε=ΔA/C*L [ ΔA为吸光度的变化/分,C为被测物质的摩尔浓度,L光径(厘米).]
C=ΔA/ε*L
=ΔA/6.22*10^3*L（mol/L）
根据酶的活性单位定义，以科华试剂盒的AST为例,设定L=1(厘米)
AST活性单位=ΔA/ε*L
=ΔA/(6.22*10^3*1)*10^6(U/L)
注: 6.22*10^3为NADH在340nm处的摩尔消光系数,1为光径(L),乘上10^6是将摩尔浓度转变为微摩尔浓度(酶的活性单位定义要求).
该AST活性单位仅为比色杯中的反应体系的酶活性，还原为血清的酶活性应乘上血清的稀释倍数，
根据试剂盒的要求,血清样本60微升，试剂1为1000微升，试剂2为500微升，则血清稀释倍数为（60+1000+500）/60=26，故
血清样本AST活性=[ΔA/(6.22*10^3*1)*10^6]*26
=ΔA*4180=ΔA*K
因此，AST测定中的K值为4180（见科华试剂盒说明书，即厂家提供的理论K值）
大部分的全自动生化仪比色杯光径并非是1厘米，多半是0.6厘米,且厂家提供的试剂千差万别,不一定符合标准状态(如试剂的PH,底物浓度,波长—要求单色光等等),还有测试温度的差别,故厂家提供的理论K值并不一定适用,故应使用校准K值,以使各实验室的结果能保持一致.以比色杯光径为例(不考虑其它因素的影响),如光径为0.6厘米而非1厘米,则其K值应为1/0.6*K=1/0.6*4180=6967,这就解释了为什么校准K值要大于理论K值的原因.
物质的浓度C单位是 umol/L ,而酶活性单位是 umol/分/L,多了单位“分”, umol/分为每分钟底物变化的量(见酶活性单位定义),以U表示,故酶活性单位为U/L.
上述已经祥述了酶活性测定中理论K值的来龙去脉,可以举一反三,其它酶活性测定K值来源
大同小异.
不知对否.请各位发表高见.,无非想提高自已的水平.
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