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[转帖]荧光TRC与PCR

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吴风波 发表于 2009-3-26 19:30 | 显示全部楼层 |阅读模式

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一.TRC(转录逆转录协同反应)原理简述:

  清理阶段:选定模板RNA,激活Rnase(核糖核酸酶)切断所定部位。

  扩增阶段:1 激活DNA聚合酶,以模板RNA为基准复制成一根链DNA

(逆转录)

2.再用Rnase(核糖核酸酶)将原先的目标RNA切除。

3.再用DNA聚合酶在切除后的部位,复制成一条相铺

   的DNA,就这样形成了双链的DNA。

4.激活RNA聚合酶促使DNA再转录RNA(数根),转录

   后的RNA再循环至扩增阶段的1,最终达到了RNA扩增

   的目的。

  检出阶段:将付有荧光标志物的探针与扩增后的RNA相结合,通过荧光

检测发现目标部位(病原体的检出)


二.与PCR相比的优势:

1.无须烦琐的前处理:反应杯中加入试剂→添加RNA样本→加入酶→放入仪器进行反应。

2.PCR反应是须不断的进行温度的变化进行的,达到要求温度须花一定的时间,而TRC

反应温度始终保持43度,反应时间大大缩短,结核菌只须2小时左右即可检出。

3.除结核菌外还可迅速检出一些食物中毒病毒(RNA病毒)如;弧菌,沙门氏菌等,

最重要的是可在癌手术中迅速检出有无癌的转移。

4.仪器小型,相当与一台笔记本电脑。

5.  各项性能指标不亚与PCR


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