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[求助]TG定标曲线问题请教

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问天何辜 发表于 2009-7-23 15:17 | 显示全部楼层 |阅读模式

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请问下:仪器是日本7080,标准用的是罗氏,试剂用的是浙江夸克的,从图中可以看出TG有什么问题吗?谢谢了


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小东 发表于 2009-7-23 16:47 | 显示全部楼层
你的系列1和系列2是代表不同浓度的标准品吗?你的测光点选择在哪里啦?从整个图看不出什么毛病,最好把7080屏幕的截图传上来,那样更直观。
 楼主| 问天何辜 发表于 2009-7-24 08:53 | 显示全部楼层

系列1是水校标,系列2是罗氏校准品校标,选择的是2PointEnd。读点是16-31。

iceearth 发表于 2009-7-24 11:45 | 显示全部楼层

水定标的反应曲线已经开始上升那么多了?有交叉污染吧?

 楼主| 问天何辜 发表于 2009-7-24 13:25 | 显示全部楼层

就是看着这个水校标的曲线有问题才提问的,有可能是污染,谢谢了。。。打算再比较下其他批号的~~!

小东 发表于 2009-7-24 16:38 | 显示全部楼层

楼主测定普通标本的结果怎么样?仪器重复性怎么样?如果存在交叉污染不会只有TG一个项目出问题,实验用水质怎么样?

 楼主| 问天何辜 发表于 2009-7-25 09:13 | 显示全部楼层

谢谢小东老师。

普通标本测定基本都在正常范围,我是和TBA、TC、5-NT、AMY、ADA、CSF这几个项目一起做的,重复性都还可以,水质应该没什么问题,其他项目基本没什么问题。我怀疑是不是杯子的原因哦,这套杯子用了将近两个月了……

小东 发表于 2009-7-25 11:24 | 显示全部楼层

是这样的,在生化仪测定过程中大都采用双波长测定,也就是说仪器用于测定的吸光度是由主波长减去副波长得到,可以去除杯子本身带来的影响,这也只是双波长测定的好处之一。另外角度来说,如果杯子有问题,首先杯空白报警肯定是频繁出现的,而且340NM的各种酶测定曲线首先出问题。本案中您没有提到,所以我觉得和杯子没有什么关系,只要您每周做杯空白测定,观察其变化在允许范围内就应该是可以的。

再来说你用的试剂,因为大家常见的TG试剂做校准的话,空白水校准曲线确实不会有这么大的变化,但是不能说出现了就是有问题,这你要看其他标准品校准曲线怎么样啦,从你的曲线可以知道罗氏校准品反应终点吸光度在2400左右,这对于一般常见的试剂也是高了很多,所以说你的这两个校准品吸光度都高出常见的试剂,也就验证了你的普通标本为什么做的没有问题。

说到根本的原因这与厂家研发有很大关系,有些试剂厂家为了提高精密度会增大样品/试剂这个比率,也就是说在试剂量不变的情况下,增加样品量,使反应程度加大,相应其稳定性增加,精密度就好了许多,但是这样理论上会相应减小了该试剂的线性范围,但是由于仪器最大可测到32000,所以在某种程度上线性范围不会有什么影响。如果你现用的参数设置是厂家给的,那就这样用吧,没有什么问题的,如果你改变了样品试剂比率,那就要改回去,因为厂家参数是做了很多评价实验确证的,有保证的。

 楼主| 问天何辜 发表于 2009-7-27 14:42 | 显示全部楼层
恩,好的,谢谢小东老师……
大胃 发表于 2009-8-6 14:57 | 显示全部楼层

小东老师说的样品/试剂比增加可以解释校准品吸光度增加,但是为什么空白水校准也那么高呢,应该还是水质有些问题吧?

小东 发表于 2009-8-7 00:20 | 显示全部楼层

吸光度增加是同步的,如果你增大了样品/试剂比,空白水校准也会增高的,你可以做实验看看,如果说水质的问题,我想楼主仪器的钙、镁、无机磷等测定首先反应出异常来。假设真的是水质导致空白水校准值偏高的话,那你会发现普遍结果出现偏低现象甚至出现负值。如果楼主想研究个明白,我建议你做一做试剂评价实验,简单的就做重复性实验、线性范围实验。有时间统计一下所有测定过的TG数据的均值和标准差,按照最基本的95%区间建立参考范围也就是2倍标准差,对比厂家给的参考范围,是不是相符。

tonny 发表于 2010-9-25 15:43 | 显示全部楼层

很难理解小东老师对水空白高的解释。

瓦力 发表于 2011-4-26 20:38 | 显示全部楼层

不错,好帖子,分析透彻

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