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库尔特七个常量之外的常量一最佳溶血效果
纪国伟① 汤陌生。
作者简介
纪国伟，男，(1966一)，现就职于浙江省丽水人民医院，工程师，长期从事医疗设备维修及LIS管理
[文章编号】1672—8270(2009)08—0020—02 [中图分类号] TH 788 [文献标识码]B
[摘要】贝克曼库尔特血细胞分析仪电阻抗法计数原理所涉及到的七个常量如果发生变化，将对样本的检测结果造成直接的影响，理解这七个常量的含义，对该类仪器的日常维修保养工作来说会起到事半功倍的作用，同时，七个常量之外的因素对检测结果的影响也应引起重视。
[关键词】贝克曼库尔特血细胞分析仪；七常量；最佳溶血效果
贝克曼库尔特血细胞分析仪计数部分是根据库尔特电阻抗法计数原理研制而成，它是通过在宝石小孔内外两端设置电极并流过一定大小的稳定电流，利用细胞对稀释液来说是相对不良导体这一特性，在一定时间内检测按一定速度流过小孔的细胞悬液中的血细胞在dqL电流作用下所产生的电脉冲数量和幅度，来达到细胞计数的目的，同时获得细胞的大小分布情况。
1 七常量含义
对维修工程师来说，库尔特七个常量对贝克曼库尔特血细胞分析仪的维修工作非常有用。这七个常量是小孔大小不变，小孔电流不变，计数负压不变，试剂成分不变，稀释比例不变，阈值大小不变，计数时序不变。下面分别论述：
RB C小孔直径是5 0um ，W B C小孔直径是100um。在计数时小孔的大小不能改变，否则影响最明显的参数是体积参数，如MCV，MPV等。
小孔的电流受小孔电源电压， 电源分压阻抗，小孔阻抗以及电解液的电导度的影响。小孔电源电压，电源分压阻抗与电路板有关。理论上小孔阻抗会大大小于电源分压阻抗，所以提供给dqL的电压源可以等效成为恒流源。电解液的导电性能也会影响整个电路回路的阻抗。
计数负压指6 inch Hg的负压，是细胞悬浮液从外室流经小孔最后到达内室的动力。贝克曼库尔特的血球仪在计数时计数时间都是固定的。如果计数负压增加，则在恒定的时间内流经小孔的细胞悬浮液的体积就会增加，计数的结果就会相应增加。反之，计数的结果就会相应减少。
试剂成分会影响电解液的电导度。稀释比例对于RBC而言是1.6：10000=1：6250，对于WBC而言是28：7040=1：252。
阈值大小对于RBC而言是36fl，WB C而言是35fl，PLT而言是2～20fl。
计数时序指计数时间。
2 七常量之外的因素对检测结果的影晌及维修实例一例
对于计数部分的故障，大部分的问题都与这七个常量有关，也就是说这七个常量中的某个发生了变化。其中小孔大小变化，计数负压变化，稀释比例变化这三个是最常见的故障。但笔者在前段时间维修贝克曼库尔特公司生产的GEN．S五分类血细胞分析仪时，发现了另外一个因素对WBC的结果影响很大，就是溶血效果。
该故障现象是WB C计数结果偶尔非真实性偏高(指的是实测结果相较真实值升高，而不是相较参考范围升高)，但是重复性很好，其它项目结果未发现明显异常。这里要说明的是我院有GEN．S血细胞分析仪，操作人员发现有些标本这两台仪器的WBC计数结果相差很大，而有些标本两者的结果差不多。比如某些标本在l号机上做，wBC结果是6．5，而2号机则是12．2。两台仪器各自的重复性都非常好。与另两台三分类血球仪(一台库尔特JT，一台亚培CELLDYN1700)进行结果比较及手工计数板计数都确定2号机有问题。
检查2号机WBC计数池的排空，进样，混匀，稀释比例，液面高度都正常，溶血剂管路中也没有发现气泡。WBC计数池隔离腔(隔离腔中存有6 inchHg的负压)中的液体下滴速度正常。最后观察下图中透明三通的情况，发现了两台仪器的区别。三通的左侧是样本(28ul)与稀释液(6 m1)，右侧是溶血剂(1．04 ml)，上端进入WBC计数池。1号机的情况描述如下：样本到达三通处时，溶血剂也刚好到达三通处，并且溶血剂插入样本中间。看到的现象是样本被拉长，而且样本前半段比后半段浓。而2号机样本拉长现象不明显。
可以做一个实验来验证样本被拉长：夹住溶血剂泵的气路，使溶血剂不进入WBC计数池，观察此时样本通过三通处的长度，很短。再与正常有溶血剂进入时的样本长度比较，可以发现两者明显不一样。
鉴于WBC稀释液泵与溶血剂泵的气路中都有一个可调气阻，用于调整稀释液(与样本)和溶血剂到达WB C计数池的速度。先从简单人手，拆下两个气阻及与其相连的相应管道，用注射器吸取蒸馏水对之反复进行吹吸抽打，干后装回，观察两机样本拉长现象已没有明显差异，最后对WBC稀释液泵下端的气阻进行仔细微调，使2号机的三通情况与1号机相同，故障彻底解决。
由于机器长期使用，气路中会有一些污物或结晶粘附在管壁或相关器件上，器件本身随着时间的推移，其固有参数也会逐渐发生变化，这些因素导致本例中2号机稀释液(样本加于其中)和溶血剂加入的时机出现偏差，达不到最佳的溶血效果，某些个体差异较大的样本中有一部份RBC没有被完全溶解掉并混入宝石小孔被计数，致使测得的WBC计数结果非真实性偏高。
参考文献
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