[讨论]荧光染料配制工艺讨论

很多人在配制荧光染料的时候，会发生各种状况，造成批间差异较大，尤其是由于荧光染料的灵敏度较高，些微差异就能在产品中放大，造成客户的不满。本根据造成差异的缘由进行简要讨论，希望能对大家有所帮助，由于某种原因，这里以流式细胞分析仪使用的荧光染料为例，大家可以举一反三。

荧光染料在流式分析或其他分析中占有试剂组分的比例非常低，但其作用是核心的，其他组分基本都是围绕该类染料的特性进行辅助。比如，采用流式细胞分析仪分析血液细胞，需要一定的溶血剂。溶血剂的作用就是破坏血液细胞的表面，使得荧光染料能够快速进入细胞内部，满足测量时间的需求。而溶血剂以及其他辅料同时还要对细胞内部结构进行一定的作用，或者叫做固化什么的，是定型细胞内部各细胞器和细胞质。这样荧光染料在一定的理化特征下，快速与细胞内部结构的某些组分结合。这种固化作用就是选择辅助试剂的核心，合适的辅助试剂与特异的荧光染料结合作用于细胞，可以保证测量的重复性。

当然，荧光染料的特征非常重要。一些染料的结合比较特异，另外一些染料则具有快速通过细胞膜的特征，而这些特性对于产品而言存在一定风险。比如特异性较强的染料结合细胞内部的DNA（如DNA分子结构中的大沟，或者小沟部位），这种嵌合结合具有非常强的致癌作用，不利于应用于产品中，造成操作者或者环境的危害。这些就不多说了。

在实际配置荧光染料的时候，需要一点小技巧。比如某种荧光染料的溶剂大家都知道，至少看人家的说明书就知道了。但是如果直接将溶剂与染料放在一起搅动，则会发现非常难完全溶解。大家可以注意一下，在溶剂中有一种含量少的溶剂，这个就是启动助容作用的，比如甲醇。其实完全采用甲醇在应用中是可以的，但是由于甲醇的挥发性，应用于产品或者在产品工艺中都是不适用的。一般而言，采用非常少的甲醇，比如3%比例（举个例子而已），先行溶解荧光染料，完全溶解后，再加入如乙二醇溶剂，充分搅动就可以了。

另外一个例子，就是配置工艺过程中，经常有人不注意过滤。完全溶解都是一种理想化的，实际操作中非常难以做到，这样就需要过滤。因为小的未溶解的染料颗粒，一旦应用于测量，就会发现“跳变”现象。这是由于染料颗粒在与试剂、细胞作用后，这次的作用结果是染料浓度大于前次测量或后次测量。

过滤要注意一点，这是有机溶剂，不要像其他水试剂一样过滤，滤膜是不一样的。

另外一个问题就是染料的分解。一般染料是要避光的，当然不是一点光都见不得的，而是尽量避免即可。一般采用浴室里面常用的浴霸照射，在5个小时会产生染料分子结构的分解。

常见的一个问题，大家都知道，染料对液路管道的影响。可以看到一些厂商的产品中，使用或废液管路都是有颜色的，有蓝色的，有红色的，这是染料分解后的分子造成的。当然，也有人号称这种染料环保了。在流式分析中经常使用淬灭剂清洗管路，就是避免染料的携带污染。

也不知道有无价值，也许大家不感兴趣，就随笔写这点吧。

有感兴趣要讨论的，可以单独QQ：1362800336

随笔写了一点，不知道有无错误，欢迎指正。

呵呵，都看就是没有回复的。也不知道有无价值，本想深入讨论各种市场上常用的染料产品，以及其特征，看来没有人感兴趣。下次，换个话题，讨论溶血剂，或者表面活性剂在产品中的应用。

这个论坛维修工程师比较多，搞试剂研发的太少了，所以参与讨论的人几乎没有啊。

楼主可以写一些有关试剂原理、研发、应用方面的原创的帖子，给大家扫扫盲也好。

有道理。整个血球来说，是一个系统。单纯试剂可以从原理来分析，但是离开系统则什么都不是。所谓系统包括测量原理，不同厂商采取不同的测量原理，即使原理一致，包括山寨的原理，血液处理细节、以及液路系统作用方式（比如，sys在DIFF通道是搅拌混匀，而在baso通道则是底部气泡搅动，记得好像如此），时序、测量次序，甚至光学角度等等都与测量结果相关。与临床统计结果直接最相关的就是算法的本事了。闲话少说了。考虑考虑。