希森美康血凝仪CA-530型的实验性能评价[转帖]

来源：中华医学检验杂志 作者：王学锋　胡翊群　吴京　胡晓波　于方治

血栓与止血专业近10年来，无论理论和技术均有迅速发展，如今该领域研究已远远超过以往出血性疾病的范畴，涉及到临床各科^［1］。测定技术已由手工操作进入半自动和全自动仪器的时代，此次作者等对日本希森美康(Sysmex)公司CA-530型血凝仪作了初步实验评价。该仪器为小型全自动仪，有4个通道作散射比浊测定，另设1个通道供AT-Ⅲ比色测定。测定项目为凝血酶原时间(PT)、激活部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)及凝血酶时间(TT，TT因未作全部评价故省略未报)。

材料与方法

　　评价样品为门诊及住院患者常规测定血浆及DADE质控血浆，试剂CA-530均为配套DADE试剂，比较试验ACL-3000⁺所用试剂为ACL-3000⁺配套试剂。评价内容：批内精密度、天间精密度、Fbg及AT-Ⅲ可报告范围，以及溶血、脂血、胆红素的干扰，干扰品为Sysmex提供。实验按说明书进行，仪器校准后测试，散射比浊为660 nm波长，比色为405 nm波长。

结果

　　1.精密度：以二种水平(X₁、X₂)质控品分别作PT、APTT、Fbg、AT-Ⅲ批内精密度测定，重复10次(n=10)，以另二种水平(X₃、X₄)质控品作日间精密度测定，重复10天(n=10)，结果见表1。

表1　批内日间精密度评价结果(n=10)

质控品	PT (s)	APTT (s)	Fbg (mg/L)	AT-Ⅲ (活性%)	吸光度
批内
X1
1	9.76	33.40	2 700	89.00	0.349
s	0.11	0.29	39	2.55	0.01
CV%	1.10	0.86	1.45	2.86	2.86
X2
2	30.80	152.40	4 800	108.7	0.43
s	0.22	1.30	72	2.75	0.011
CV%	0.70	0.86	1.50	2.52

天间
X3
3	11.9	31.20	2 590	80.30	0.316
s	0.26	0.60	82	2.54	0.01
CV%	2.18	1.92	3.24	3.16	3.16
X4
4	14.9	78.5	4 700	47.30	0.64
s	0.14	3.28	151	1.57	0.01
CV%	0.94	4.18	3.21	3.32	0.78

2.Fbg可报告范围：Fbg测定仪器设有1∶5、1∶10、1∶20三种不同稀释比例，正常血浆用1∶10稀释，低值用1∶5稀释，高值用1∶20稀释，由于有三种稀释，使Fbg的可报告范围大为扩大，而此种稀释均由仪器根据设置自动操作。关键在于1∶10稀释模式是否有较好线性。制备有浓度梯度的血浆即理论值为2 830 (mg/L)、2 263、1 697、1 132、566的血浆5份进行评价，实际测定结果为2 830、2 249、1 710、1 032、554(mg/L)，理论值与实测值的回归方程为Y=1.019X-55.6；r=0.999。
　　由于自554～2 830 mg/L存在线性，因此高值可达5 660 mg/L(1∶20稀释模式)，低值可至283 mg/L(1∶5稀释模式)，故可报告范围为0.28～5.6 g/L。
　　3.AT-Ⅲ可报告范围：AT-Ⅲ活性%与吸光度A值呈负相关，仪器报告活性以125%为限，大于125%时不再报告具体结果，概以＞125%表示，而吸光度则在＞125%仍可报告，为求了解高活性百分率，则可2倍稀释后再测，乘以稀释倍数即可得活性百分率。先制备有梯度的血浆5份，其理论活性为107.8(%)、86.2、64.7、43.1、21.6，测定结果为107.8(%)、84.2、64.2、42.1、24.8。在25%～107%之间存在线性。
　　设84.2%为预先作2倍稀释后测定样品，则结果乘2，相当于活性168%，故预AT-Ⅲ活性结合2倍予稀释可报告范围为25%～168%，如不预稀释则为25%～125%，大于125%者概以＞125%表示。
　　4.主要干扰物的影响：收集新鲜血浆若干份，混合，然后加入血红蛋白液、胆红素液及乳糜液，观察加入前后测定变化，血红蛋白加入量达4.8 g/L，胆红素达222 mg/L，乳糜目测明显乳浊，PT、APTT、Fbg及AT-Ⅲ%均未受显著干扰，故在中轻度溶血、黄疸血或乳糜时，可认为不受干扰。
　　5.Fbg CA-530血凝仪与测定值Clauss法对比试验：纤维蛋白原测定方法众多，国外近年推荐Clauss法为参考法，故以此法为参比作了比较，共对比测定样品32份，=3 460 mg/L，=3 430 mg/L，Y=1.078X-308，r=0.98，经t检验差异均无显著意义。
　　6.CA-530与ACL-3000⁺的比较试验：取新鲜血浆50份，分别在ACL-3000⁺与CA-530上测定PT、APTT、Fbg及AT-Ⅲ，PT于测定后根据各自仪器所用试剂的国际敏感度指数(ISI)值和各自的正常均值，计算国际标准化比值。并计算国际标准化比值的回归方程，其他项目亦均以回归方程表示，以ACL-3000⁺为X，CA-530为Y，结果见表2。

表2　ACL-3000⁺与CA-530的比较试验

项目	斜率	截距	r
PT(s)	0.656	2.615	0.964
INR	0.960	-0.076	0.956
APTT(s)	1.627	-10.370	0.703
Fbg(mg/L)	1.227	-528	0.964
AT-Ⅲ(%)	1.038	5.315	0.977

讨论

　　CA-530血弟仪器是一种近年新上市产品，国内使用尚缺少经验，经我们测试精密度、可报告范围等结果基本接近田中等报告结果^［2］，由于仪器设计模拟最佳手工操作，又严格控制加液量、温度、时间、搅拌等因素，故其重复性优于手工操作。
　　Fbg和AT-Ⅲ测定结果适当稀释，使测定有较宽的可报告范围，本机测定Fbg有自动稀释功能；AT-Ⅲ则可根据活性＞125%及A值，视情况决定是否予稀释后再测，有利于节省时间和试剂。
　　对于一些最多见的溶血、脂血、黄疸等干扰因素，在一般中轻度水平，不致影响结果，此乃由于仪器采用先进的电散射光测试并结合百分比凝固时间测定原理所致。但临床实践中，还有不少干扰，仍应有所注意。
　　Fbg测定方法较多，经与Clauss法比较，CA-530测定值虽斜率与相关系数尚属良好，但截距稍大，t检验二种结果差异未见显著意义。
　　CA-530与ACL-3000⁺比较试验，斜率以PT、APTT二项较差，相关系数以APTT为较差，但PT经用二种试剂仪器各自的正常均值和ISI，分别计算各测定值的INR^［3］，再作二种INR的回归分析，则斜率、截距有明显改善(ACL-3000⁺正常均值为12.6 s，试剂ISI为1.38，CA-530正常均值为11.3 s，试剂ISI为1.64)。由此可见国际标准化比值监控抗凝治疗的重要性，至于APTT未能有效改善数据关系。从比较试验结果说明：使用一种新仪器，有必要建立新的参考值，不可以传统手工法参考值，或别的仪器参考值替代。
　　CA-530仪设有比色、比浊二种通道，尚有质控、贮存数据、试剂冷却等功能，每小时可测同种项目约50份，是一种智能化的新颖仪器，适合于各级医院的需求。

作者单位：王学锋（200025 上海第二医科大学附属瑞金医院检验科）
　　　　　胡翊群（200025 上海第二医科大学附属瑞金医院检验科）
　　　　　吴京（上海市胸科医院检验科）
　　　　　于方治（上海市胸科医院检验科）
　　　　　胡晓波（上海市临床检验中心临检室）
　　　　　金大鸣（上海市临床检验中心临检室）

参考文献

　1　丛玉隆.积极开展血栓与止血实验及质量控制.中华医学检验杂志，1998，21：261-262.
　2　田中雅美，?野信子，田边久美子，他.全自动血液凝固分析装置CA-530 の基础的?讨.Sysmex Jouznal,1998，21：162-170.
　3　朱忠勇.凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定标准化.中华医学检验杂志，1998，21：308-312.