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LightCyclerTM荧光定量PCR仪

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郑振寰 发表于 2005-11-2 22:28 | 显示全部楼层 |阅读模式

罗氏诊断 明星制造

LightCyclerTM荧光定量PCR

1 超高速 30分钟内完成40个循环;

2 实时性 荧光测量结果实时显示在电脑监视器上,在线监控扩增过程;

3 高灵敏 在一个人基因组当量中检出单拷贝基因(单拷贝对应于一个病毒);

4 范围广 可在10~1010拷贝范围内作单一运作,无须将样品稀释;

5 可重复 每一台仪器反应之间的CV小于2%,重复性极佳;

6 费用低 反应体积为20ml,节省大量试剂消耗

7 功能强 定量PCR(内、外标),突变检测,熔解曲线分析,混合PCR检测;

8 精度高 具有试剂和软件两种颜色补偿,极大地提高了测量的准确性;

9 轻便式 机器仅重20公斤,体积为45x30x40cm3

10 开放性 自行设计实验,自由配套试剂。

应用于基础研究,该机器可以帮助您:

1. 精确定量mRNA的差异表达;

2. 核酸突变相关研究;

3. 遗传病的分子生物学研究。

瑞士罗氏(Hoffmann.La.Roche)公司收购德国宝灵曼(Boehringer.Mannheim)公司后罗氏公司事实上已成为全球最大的医学诊断产品制造商。罗氏分子生化部拥有PCR技术全球专利的基础上,推出的明星产品LightCyclerTM荧光定量PCR系统,充分结合士精工制造和美国创新专利,适合为基础研究生物医学研究、临床诊断和病人疗效监测等方面提供创新、符合成本效益、及时和可靠的方案!

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 楼主| 郑振寰 发表于 2005-11-2 22:28 | 显示全部楼层

LightCycler

1. 超高速的热循环 由于采用空气迅速改变温度,以及利用有高表面积/体积比的光学玻璃毛细管模式,使升降温速度最高可达20oC/秒,温控±0.3 oC 2030分钟便能完 3040个循环。

2. 采用1020ul反应体系,节约试剂,降低检测成本。

3. 实时监测 结果立刻联线地显示在电脑监视器,因此在反应进行时可实时地跟踪PCR的动态。

4. 开放系统,可灵活使用多种检测模式,如杂交探针、水解探针(罗氏专利技术)及SYBGreen I 染料。因为杂交探针法对探针及引物设计的限制最小, 因此 可最灵活地设计您的实验,并且亦可方便地选择合适大小的扩增子 ( 1 00 1000bp)

5. 三种荧光通道,在单一反应中取得更多资料。荧光波长分别为530nm640nm710nm,一方面提供有效的FRET(荧光共振能量转移),同时产生最少的光谱“交叉干扰”,最终无法避免的一点重叠则可以通过使用颜色补偿软件得到校正。

6. 利用熔点曲线分析功能,可进一步作PCR后分析

--- 检测非特异扩增并作矫正

--- 鉴别基因型而又无需采用测序凝胶

--- 检测点突变,并可利用双色检测及颜色补偿软件在同一反应中分

析较复杂的突变

7. 提供全套PCR通用试剂及专用试剂,包括细胞因子` 肿瘤相关基因`

转基因动植物` 食品分析` 遗传病检测等。

8. 采用即用型密封的光学玻璃毛细管,可避免在PCR期间及PCR之后产物受到污染,确保结果的准确性和重复性。

9. 通过对PCR反应对数现行期的数据分析,准确地取得定量结果。

10. 高度灵敏的检测,可在人的基因组当中检出单拷贝基因。

11. 提供宽广的动力学范围 (101010 拷贝),而无需将样品稀释。

12. 每一部仪器都产生可重复的结果,反应之间的CV<2%

13. 采用LED冷光源,寿命10000小时以上,无需预热,开机即用,免维护,无需定期调试。

14. 所有样本共用同一热室,通过同一光路单独检测,完全避免管间的温控及荧光检测差异,使系统误差降到最低。

15. 可与全自动的核酸分离纯化系统MagNA Pure LC配套使用,实现全程自动 化操作,避免手工操作带来的人为误差,保证实验结果的准确性和重复性。

重点问题说明

*** 为什么使用DNase-Free & RNase-Free 的石英玻璃毛细管?

1、石英玻璃毛细管的光学性能好,适合荧光讯号的测定,类似光纤的形状,保证荧光讯号的准确捕获。

2、缩短了PCR反应时间,特别是荧光激发的时间,保证了反应成分的稳定性, 尤其是荧光染料的稳定性。

3、玻璃反应管可加快热传导速率。

4、毛细管增加表面积/体积比,确保空气和反应成分之间的温度迅速平衡。

5、减小反应体系, 降低检测成本。

*** 1991年罗氏公司获全球PCR专利,1996年成功推出AMPLICOR 系列试剂 盒,经FDA批准可用于临床。

*** 1999年底正式推出LightCycler,拥有进口医疗器械注册证, 注册证号为 SDA(I)20000755〕;目前已有配套 科研试剂100多种,国际上使用 Light Cycler已发表200余篇文献,国内诊断 试剂厂商均以LightCycler为平台开发 新试剂。国内用户近80家,年内超过100家。

*** 在上海、北京、广州、成都、武汉、 西安等地均设有办事处 ,提供专业、 及时的售后服务和技术支持。

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 楼主| 郑振寰 发表于 2005-11-2 22:29 | 显示全部楼层

设备名称:LightCyclerä荧光定量PCR系统

二、用途:应用聚合酶链式反应(PCR)技术,对病原体感染、转基因食品进行确认、实时定量分析,同时可以对相关药物的疗效进行评价;对基因突变、基因型以及基因多态性进行分析和研究等。

三、技术参数和规格

1. 电源:110-240V, 最大功率800W

2. 样品:

a.样品数量:每次运行样品量:32

*b.反应管:石英玻璃。透光性能好,热传导快。

*c.样品反应体积:1020微升。节省试剂成本。

3. PCR温度

a.温度范围:室温-100

b.变温精度:±0.4

*c.变温方式: 采用电偶和新型无氟冷却系统空气循环加热和冷却循环。热传导快。

*d.升降温速度:连续可调节(0.1-20/秒进行变化)。速度快,参数设置灵活。

*e.平均运转时间:30分钟可以完成40个循环。速度快。

4. 光源

*a.类型:发光二极管(LED),运行功率为0.1毫瓦,至少稳定10,000小时,寿命长。

b.激发波长:470490nm

5. 检测器

*a.检测光路:>2个通道同时检测

*b.荧光获取参数调结范围:从1256可调

*c.数据安全性:对用户操作程序和结果具自动保护功能,防止数据丢失。

6. 软件

a.软件升级情况:免费升级

*b.软件分析功能:可进行定量、熔解曲线分析突变

c.免费提供引物和探针设计软件

7. 应用参数

*a.监控方式:实时、在线。随时观察运行情况和实验结果。

*b.定量方式:外标法,竞争性内标法。

*c.检测模式:SYBR Green I,杂交探针、Taqman,分子信标等模式分析,适用试剂范围广。

*d.扩增子大小:1001000bp,方便试剂选择和科研开发。

*e.检测范围:101.0E +10拷贝,无需稀释样品。

*f.重复性:CV(Cross Point)值小于2%,仪器结果稳定。

*g.日常维护:免维护

其它:

a.开机预热:无

b.试剂开放:开放

c.配套试剂和仪器:有相配套的科研试剂盒和自动化模板纯化和加样系统-MagNA Pure LC

*d.国家认证:获得国家进口医疗器械注册

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