[转发]一组微生物作业指导书SOP

标 题	院徽 临床微生物实验室 葡萄糖肉汤培养基配制作业指导书					版 本		第一版
						版 次		第0次修改
						页 码		共1页第1页
						受控状态		在 控
						编 号		WSW/ PYJ/009
1、目的 用于血液增菌。 2、范围 使用原料制备各种培养基 3、职责 3.1责任人 临床微生物实验室当班工作人员精确称量，正确配制。 3.2完成时间 配制当天完成。 4、该作业指导书变动程序 本作业指导书程序的改动，可由任一使用本作业指导书的工作人员提出，并报经下述人员审核、批准和签字：专业主管、科主任。 5、工作程序 5.1蛋白胨(或月示 胨)10g，氯化钠5g，肉浸液（或心浸液）1L，葡萄糖3g，枸橼酸钠3g，5g/L对氨基苯甲酸水溶液10ml，1mol/ L硫酸镁溶液20ml，青霉素酶1000 U。 5.2将蛋白胨、氯化钠混合于肉浸液中加热溶解，再加入葡萄糖、枸橼酸钠、对氨苯甲酸及硫酸镁，继续煮沸5min，并补足失水，调整pH至7.8。过滤分装，每瓶50ml，高压灭菌115℃20min后，每瓶加入青霉素酶50 U，经无菌试验合格后，冷却备用。 6、用法 将采取的血液标本，以无菌手续注入培养瓶中（血液 1ml，培养液10ml），置35℃培养箱内，每天1次取出观察结果。如有细菌生长，可出现数种不同的表现，应随时作分离培养， 可选用血琼脂、伊红美蓝琼脂及巧克力琼脂平板等。无细菌生长表现的培养瓶，需连续观察7d，仍无细菌生长方可弃去。在观察的过程 中，至少应作两次分离培养。 7、质量控制 伤寒沙门菌ATCC 50096、白色念珠菌ATCC 10231、化脓性链球菌ATCC 19615、肺炎链球菌ATCC 6305、金黄色葡萄菌ATCC 25923、铜绿假单胞菌ATCC 27853均生长良好。 8、保存 置4℃冰箱保存，3周内用完。 9、引用表格和文件 WSW/JS/0001《培养基制备的标准操作程序》 注: ⑴ 枸橼酸钠为抗凝剂，可使血液加入培养基中不凝固。 ⑵ 对氨基苯甲酸主要中和血液中磺胺类药物的抑菌作用。 ⑶ 硫酸镁主要抑制血液中存在的四环素、金霉素、新霉素、多粘菌素及链霉素的抑菌作用。 ⑷ 本培养基近年来有许多改良配方，如加入0.3%～0.5%酵母浸膏以增加营养；加0.2%核酸刺激细菌生长；加0.1%粘液素能 被覆于细菌的表面，保护细菌免受抗体破坏；加入聚茴香脑磺酸钠（SPS）能中和补体的抗药作用从而提高检出率。
编制/日期		*****/2005.01.20	审核/日期	*****/2005.01.20	批准/日期		*****/2005.02.20

标 题	院 微 临床微生物实验室 革兰染色标准操作程序					版 本		第一版
						版 次		第0次修改
						页 码		共1页第1页
						受控状态		在 控
						编 号		WSW/ JS/0002
1、目的 确保染色结果清晰可靠。 2、范围 球菌、杆菌和弧菌染色 3、职责 临床微生物实验室当班工作人员认真按程序文件操作。 4、SOP变动程序 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员审核、批准和签字：专业主管、科主任。 5、试剂 5.1结晶紫溶液 A液：结晶紫 2g 95%乙醇 20ml Β液：草酸铵 0.8g 蒸馏水 80ml 使用前24小时将A液Β液混合后，过虑后装入试剂瓶内备用。 5.2碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 5.3脱色液： 95%乙醇 5.4复染液 储存液：沙黄 2.5g 95%乙醇 100ml 应用液：储存液 10ml 蒸馏水 90ml 6、工作程序 6.1待检标本用无菌生理盐水涂片，经自然干燥后用火焰固定。 6.2加结晶紫液染1分钟，清水冲去染液。 6.3加碘液染1分钟，清水冲去染液。 6.4加95%乙醇脱色液，不时摇动约10-30秒钟，至紫色已脱落为至，水冲洗。 6.5加复染液（伊红），染30秒钟，水冲洗。 6.6待涂片自然干燥后，油镜镜检。 7、质量控制 金黄色葡萄球菌为革兰氏染色阳性,大肠埃希菌为革兰氏染色阴性。 8、引用表格和文件
编制/日期		***/2005.01.20	审核/日期	***/2005.01.20	批准/日期		***/2005.02.20

标 题	院 微 临床微生物实验室 革兰染色标准操作程序					版 本		第一版
						版 次		第0次修改
						页 码		共1页第1页
						受控状态		在 控
						编 号		WSW/ JS/0002
1、目的 确保染色结果清晰可靠。 2、范围 球菌、杆菌和弧菌染色 3、职责 临床微生物实验室当班工作人员认真按程序文件操作。 4、SOP变动程序 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员审核、批准和签字：专业主管、科主任。 5、试剂 5.1结晶紫溶液 A液：结晶紫 2g 95%乙醇 20ml Β液：草酸铵 0.8g 蒸馏水 80ml 使用前24小时将A液Β液混合后，过虑后装入试剂瓶内备用。 5.2碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 5.3脱色液： 95%乙醇 5.4复染液 储存液：沙黄 2.5g 95%乙醇 100ml 应用液：储存液 10ml 蒸馏水 90ml 6、工作程序 6.1待检标本用无菌生理盐水涂片，经自然干燥后用火焰固定。 6.2加结晶紫液染1分钟，清水冲去染液。 6.3加碘液染1分钟，清水冲去染液。 6.4加95%乙醇脱色液，不时摇动约10-30秒钟，至紫色已脱落为至，水冲洗。 6.5加复染液（伊红），染30秒钟，水冲洗。 6.6待涂片自然干燥后，油镜镜检。 7、质量控制 金黄色葡萄球菌为革兰氏染色阳性,大肠埃希菌为革兰氏染色阴性。 8、引用表格和文件
编制/日期		***/2005.01.20	审核/日期	***/2005.01.20	批准/日期		***/2005.02.20

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实验室名称	项目	编号	制定日期
******	高压锅的使用	******	****年**月**日

【目的】

确保高压效果的可靠性。

【适用范围】

蒸气式高压锅。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【操作方法】

1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。

2．打开排气阀。

3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。

4．观察排气阀的排气情况，待排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到0.05mPa时，关闭排气阀。

5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。

6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在0.15mPa。电加热时，可切断电源，维持压力 持续15分钟，至多不超过30分钟，否则营养物质破坏。

7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。

8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。

操作人员 &n bsp; 部门主管 质量负责人

姓名 &nbs p; ****** ****** ******

日期 **年**月**日