1. 原理:
1.1 方法学:尿酸酶-过氧化物酶偶联比色法。
1.2 方法原理:尿酸会在尿酸脢的催化下,氧化生成尿囊素(allantoin)和过氧化氢。过氧化氢又会与4-氨基安替比林(4-AAP)和3,5-二氯2-羟基苯磺酸(DHBS)在过氧化酶的催化下,形成有颜色的产物(醌亚胺化合物),其色泽深浅与样品中尿酸浓度成正比。BECKMAN SYNCHRON CX9 PRO系统生化仪器会自动的将适量的试剂及样本加入反应管(cuvette)中。机器会自动侦测520 nm吸光度的改变,吸光度的改变直接与尿酸的浓度成正比。
1.3 反应方程式:
尿酸酶
尿酸(Uric Acid)+ O2 + H2O ――――→ 尿囊素(allantoin)+ CO2 + H2O2
过氧化物酶
H2O2 + 4-AAP + DHBS ――――――→ 醌亚胺(有色化合物)+ H2O
2. 样本:
2.1 样本类型:
2.1.1 生物学的体液样本应该以同样的方式来收集,以便用来测试任何实验室中的试验。
2.1.2 新鲜的、刚被抽出的血清、血浆或尿液样本是最佳的选择。
2.1.3 如果用血浆作样本,可以使用肝素(29 IU/ml)作抗凝剂。
2.1.4 全血是不被推荐的样本。
2.2 样本保存:
2.2.1 采血管应该一直保持垂直、塞住的姿势。血清或血浆应该立即被分离,避免接触到血球部分。从采血到上机的最长时间限制是2小时。
2.2.2 分离的血清或血浆在15℃到30℃的环境下保存不应该超过8小时。假如测试无法在8小时内完成时,血清或血浆应该被保存在2℃-8℃的环境中;假如测试无法在48小时内完成,或分离的样本无法储存超过48小时,样本应该冰冻在-15℃~ -20℃的环境中。冰冻的样本只能解冻一次,有时分析物产生降低或恶化的情形多半是因为重复冰冻及解冻的原因所造成。
2.2.3 假如使用尿液样本时,整个收集的过程应该在2小时内完成。若是检测24小时尿液的样本,保存样本的容器应该放置在室温。样本中应该加入适量的NaOH使尿液维持碱性的环境。
2.2.4 稀释过的尿液样本需要保存在+4℃的环境下不超过48小时。 |