电热恒温水浴箱操作程序
1 目的：保证水浴箱工作温度恒定。
2 该SOP变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室技术负责人。
3 适用水浴箱范围：电热恒温水浴箱
4 标准操作：
4.1水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。
4.2在水浴箱内注入清洁温水至总高度1/2～1/3处。
4.3打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。
4.4当水槽内测定温度达到设定温度时，加热中断、指示灯熄灭，温度保持稳定。
4.5在每次水浴箱使用前，放入标准温度计同时监测实际水温，以校正温度。
4.6水浴箱工作温度波动范围是：预设+2 ℃范围。
4.7每天应使用水银温度计水浴箱应记录每天温度；如温度超出正常范 围，该温度应划上红圈，并把修正操作记录下来。
4.8水浴箱内外应保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦拭。
4.9仪器不用时，需套好防尘罩，以免温度控制器受潮影响使用。
5.0 引用的表格：tab_temp_bath
洁净工作台维护和保养程序
目的：对洁净工作台进行适当维护，以保证净化能力。
适用范围：本SOP适用于实验室使用的医用洁净工作台（BC1300型）。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
程序：
4.1 根据环境洁净程度，定期将预过滤器中的滤料拆下清洗，一般间隔时间为3~6个月。
4.2 每次使用洁净台后，均需对洁净台进行清洁。
4.3 定期（一般每半年1次）计测工作区风速，如发现不符合技术参数要求，则可调大风机供电电压。当风机组电压调到最大时，工作区风速仍达不到0.3m/s，则必须更换高效空气过滤器。（由厂家或院仪器维修人员进行）
4.4 做好维护记录。
引用的表格：
5.1 仪器设备维护保养记录表：sop_cl_1
可移动紫外消毒车使用操作程序
1 目的：正确使用紫外消毒车进行消毒。
2 适用范围：适用于本室使用的ZXC型紫外线消毒车（上海跃进医用光学器械厂生厂）。
3 职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 打开保护门；
4.2 用手托住灯臂往上抬至需要位置；
4.3 插上电源，打开带灯开关；
4.4 根据需要设定时间；
4.5 使用完毕将按钮摁到底，同时另一手托住灯臂慢慢将灯管放进灯箱内关上保护门。
4.6 不同实验区的紫外线消毒车勿混用。
5 消毒记录表：tab_cl_record
加样器校准标准操作程序
目的：保证加样器加样的准确性。
加样器范围：各种品牌、型号的固定、可调和多通道加样器。
职责：本SOP由室负责人执行落实。
校准程序
4.1校准环境和用具要求：
4.1.1 室温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。
4.1.2电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时为保证天平内的湿度（相对湿度60～90％），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。
4.1.3 小烧杯：5～10ml体积。
4.1.4 测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。
4.1.5 选择校准体积：⑴ 拟校准体积；⑵加样器标定体积的中间体积；⑶最小可调体积（不小于拟校准体积的1％）。(4)如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。
4.2校准步骤：
4.2.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；
4.2.2 调节好天平；
4.2.3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头；
4.2.4 垂直握住加样器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢（1～3秒）一致的吸取蒸馏水；
4.2.5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；
4.2.6 将加样器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一档，等待1～3秒，再压致第二档，使吸头里的液体完全排出；
4.2.7 记录称量值；
4.2.8 擦干吸头外面；
4.2.9 按上述步骤称量10次；
4.2.10取10次称量值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表Ⅰ所列蒸馏水Z因子计算体积：体积=重量/Z因子
4.2.11按校准结果调节加样器
4.3 新购的合格的移液器出厂前经过厂家校准，使用前无需校准。
4.4 每年移液器进行校准一次，自校或由厂家有关部门校准。
4.5 做好校准记录。
引用的表格
仪器设备校准记录表：tab_pipt_cal
离心机维护保养操作程序
目的：对离心机进行正确的维护，以保证仪器正常运转。
适用范围：本SOP仅适用于本室使用的离心机。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 离心室的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转子旋下，再用中性去污剂（70%的异丙醇/水混合物或乙醇去污染）清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。
4.2 转子的清洁：转子会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转子每月进行清洁维护。每月用中性的清洁剂清洁转子一次，并在仪器使用记录本上作好记录，以延长转子的寿命。
4.3 离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水。（此步仅适用于冷冻离心机）
4.4 离心结束后，使离心机盖打开，然后关机。
温度计校准程序
目的：保证温度计的精确性。
适用范围：适用于本实验室所使用的温度计。
职责：本SOP由室负责人落实。
程序
4.1 由设备科人员送质检局对温度计进行校准。
4.2 每年进行1次。
4.3 经校准过的温度计可作为微量恒温器温度校温的参照。
引用表格：
5.1 仪器设备校准记录：tab_inst_cal
临床非培养标本的采集及处理操作程序
目的：规范临床待检标本的正确采集、送检和处理。
适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。
职责：
3.1 所有采集标本的人员均需按本SOP操作，实验室工作人员有责任向临床医生、护士或病人宣教。
3.2 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序
4.1 本实验室检测标本为：血清或血浆、痰、生殖道拭子标本、尿液及脑脊液和胸腹水。
4.2 做好标本签收，核对检验单与标本标签是否清楚无误，送检标本是否正确、合格，给所有标本按顺序编号，按如下操作规程操作。
4.3 查找抗酸菌操作:将标本置于水浴蒸箱加温杀菌30分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片，液性标本以3000转/分钟离心5分钟，取标本残留物或沉淀物加温涂布玻片并标注编号后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加温(用酒精灯在玻片下来回加温置染色液冒热气，但无气泡产生为宜)染色10分钟，自来水冲洗净染液，以硫酸美兰复染2分钟，水洗凉干。
镜检与报告：油镜下查找分枝、不规则红色杆菌，按如下标准进行结果报告。
1)、镜检100-300个视野（时间不少于4分钟）未发现抗酸菌，继续观察至300个视野仍未发现抗酸菌者报告抗酸菌（—）；
2)、镜检100个视野找到抗酸菌1-2条者，报告抗酸菌可疑（±），或重涂片或重送标本检查；
3)、镜检100个视野找到抗酸菌3-9条者，报告抗酸杆菌阳性（＋）；
4)、镜检10个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（2＋）；
5)、镜检每个视野找到抗酸菌1-9条者，报告抗酸杆菌阳性（3＋）；
6)、镜检每个视野找到抗酸菌多于9条者，报告抗酸杆菌阳性（4＋）。
4.4 查找普通细菌操作：液性标本取离心沉淀物涂片，拭子或脓性标本直接涂布玻片并标注编号后固定。同时取大肠标准株(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌标准株（ATCC25922）涂片，一起行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗后凉干。油镜下查找菌体并观察球杆比例；观察质控菌是否合格。
4.5 墨汁染色查找隐球菌：液性标本离心取沉淀物涂片，脓性或拭子标本直接涂片并写号，以无菌接种环粘取少量印度墨汁与玻片上标本混匀，压盖玻片，先低倍镜下找到视野再转离倍镜观察。若找到透亮，圆形强折光，有厚荚膜的菌体报告墨汁染色阳性；否则报告阴性。
4.6 白带常规检查：盐水管直接将棉签点至玻片后以高倍镜检有无滴虫；涂片标注编号后固定，行革兰氏染色，先滴加第一液染色1分钟，水洗，加第二液媒染1分钟，水洗干净；以95%酒精脱色30秒钟后立即水洗，再加第四液复染30秒钟，水洗凉干后镜检查找革兰氏阴性双球菌、霉菌或阳性球菌、线索细胞等。阴道清洁度的按如下判断标准报告：
Ⅰ度：阴道杆菌为主，并可见大量上皮细胞。
Ⅱ度：有部份阴道杆菌，但亦有部份脓细胞和杂菌，上皮细胞少见。
Ⅲ度：仅见少量阴道杆菌和上皮细胞，有大量脓细胞和杂菌。
Ⅳ度：镜下无阴道杆菌，除少量上皮细胞外，主要的几乎全是脓细胞和大量杂菌。
4.7 肥达试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排5排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；后稀释管再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出肥达反应试验稀释菌悬液，第一列各加入H诊断菌液0.2 ml,第二列各加入O诊断菌液0.2 ml，第三列各加入甲型诊断菌液0.2 ml,第四列各加入乙型诊断菌液0.2 ml, 第五列各加入丙型诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。
结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。
4.8 外菲氏试验：标本标明编号，以3000转/分钟离心5分钟；取试管架，按每标本排3排试管，每排5支；各标本用加样器取100μl血清置于一支稀释用试管(注明检验号)中，加入1.9ml 0.9%生理盐水混匀，第一排加入1：20倍稀释血清各0.2ml，成1：40倍；稀释管留1.0ml再加入1.0ml 0.9%生理盐水，成1：40倍稀释，加入第二排试管各0.2 ml。同样方法对倍稀释至第四排试管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理盐水作阴性对照。从冰箱中拿出外菲氏反应试验稀释菌悬液，第一列各加入OX19诊断菌液0.2 ml,第二列各加入OX2诊断菌液0.2 ml，第三列各加入OXK诊断菌液0.2 ml,混匀，置37℃水浴箱18-24小时。
结果判断：菌体沉淀至试管底成圆点为阴性管，出现散在颗粒状凝集为阳性管。以最高稀释管出现散在颗粒状凝集为报告滴度。若阴性对照出现凝集则需重新稀释配制诊断菌悬液重做试验。
5.2拒收标本记录表：tab_rejec
临床标本的保存程序
目的：临床标本正确保存，以便必要是复查。
适用范围：微生物检验实验室的所有临床检测标本。
职责：
3.1 实验室工作人员必须熟知并遵守本SOP，室负责人监督管理。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
程序：
4.1 未检测的标本经预处理后及时置-20℃保存。
4.2标本当天检测可置4℃保存，如当天不检测应置-20℃保存。报告发出后丢弃。
4.3 原始样本在报告发出前均需置4℃保存，不得丢弃。报告发出后保存2天，以备查。保存2天后标本由室负责人酌情处理。 |
