[转发]全自动加样系统和全自动酶标分析系统优化组合模式初探

全自动加样系统和全自动酶标分析系统优化组合模式初探
谭明科（郴州市中心血站，湖南郴州 423000）

在使用全自动加样系统和全自动酶标分析系统中，笔者探索出一种组合模式，使全自动加样系统和全自动酶标分析系统完善结合，使运行时达到省时省力的效果。简介如下：

1、 仪器 软件 试剂

1.1 仪器和软件 MicroLab STAR和MicroLab STAR用户软件2.0版本。24/20型FAME和FANE User Software Version 用户软件2.1版本由瑞士哈美顿公司提供.

1.2 试剂 厦门新创HBsAg、抗-HCV、抗-HIV试剂；北京万泰HBsAg、河南理利抗-HCV、抗-HIV试剂。

2、 STAR和FAME实验步骤的编制和设计

2.1 STAR实验步骤的编制和设计：进样→进板架→加新创抗-HCV稀释液→加理利抗-HCV稀释液→加理利抗-HIV稀释液→加样（初/复检6块板一次完成）→加质控品（设空白2孔，阴性3孔，阳性2孔，质控1孔）→创建条码文件。

2.1 FAME实验步骤的编制和设计：见表1

表1 ：初、复检FAME实验步骤的编制和设计

		新创			万泰	理利
		HBsAg	抗HCV	抗HIV	HBsAg	抗HCV	抗HIV
准备板	时间(min)	2	2	2	2	2
孵育	温度（℃）	37±2	37±2		37±2	37±2	37±2
	时间(min)	——	25±2	——	——	20±2	30±2
洗涤	板洗涤模式（遍）		5			6	6
	浸泡时间（S）		20			20	20
加酶	量（50μL/孔）	50	100	50	50	100	100
孵育	温度（℃）	37±2	37±2	37±2	37±2	37±2	37±2
	时间(min)	60±5	25±5	60±5	60±5	15±2	20±2
洗涤	板洗涤模式（遍）	5	5	5	5	6	6
	浸泡时间 （S）	20	20	20	20	20	20
加底物	量（100μL/孔）	100	100	100	100	100	100
孵育	温度（℃）	37±2	37±2	37±2	37±2	37±2	37±2
	时间(min)	15±2	10±2	15±2	10±2	10±2	10±2
加终止液	量（100μL/孔）	50	50	50	50	50	50
振荡	时间（S）	5	5	5	5	5	5
比色	测量波长（nm）	450	450	450	450	450	450
	参考波长（nm）	620	620	620	620	620	620

3、 设备设置

3.1 STAR设备设置：高级选项RS232，加样通道8，采用纲针模式，24针交替进行。

3.2 FAME设备设置：装载模式设置为自动模式，时间安排模式设置为距前一板架20分钟和0分钟，分别用20min和0min表示。运行过程中由软件程序自动优化安排。

4、 FAME工作表的排列模式：用“1”表示初检厦门新创HBsAg、抗-HCV、抗-HIV试剂，用“2”表示复检万泰HBsAg、理利抗-HCV、抗-HIV试剂。

4.1 当1≤Sampler≤88时，有两种排列方式，见表2：

表2：当1≤Sampler≤88时的两种排列方式：

排列模式	运行时间
	20min	0min
1 1 2	1h 43min	1h 49min
2 2 1	1h 47min	1h 42min

4.2 当88＜Sampler≤176时的6种排列方式，见表3：

表3：当88＜Sampler≤176时的6种排列方式

排列模式	运行时间
	20min	0min
1 1 2 1 2	2h 39min	2h 59min
2 2 1 1 2	2h 31min	2h 25min
3 1 1 2 2	2h 35min	2h 53min
4 1 2 2 1	2h 47min	2h 58min
5 2 1 2 1	2h 25min	2h 56min
6 2 2 1 1	2h 55min	2h 50min

4.3 当176＜Sampler≤264时，有20种排列方式，见表4。

表4：当176＜Sampler≤264时的种排列方式

排列模式	运行时间
	20min	0min
1 1 2 1 2 2 1	3h 46min	4h 26min
2 1 2 2 1 2 1	3h 35min	4h 06min
3 1 2 2 1 1 2	3h 38min	3h 37min
4 1 2 1 2 1 2	3h 47min	4h 03min
5 2 1 2 1 2 1	4h 39min	4h 06min
6 2 1 2 1 1 2	4h 02min	3h 45min
7 2 1 1 2 1 2	3h 51min	3h 26min
8 2 1 1 2 2 1	3h 53min	3h 28min
9 1 1 1 2 2 2	3h 57 min	3h 39min
10 1 1 2 2 2 1	3h 43 min	3h 50min
11 1 1 2 1 2 2	3h 35 min	3h 30min
12 1 1 2 2 1 2	3h 34min	3h 42min
13 1 2 1 1 2 2	3h 34min	4h 03min
14 1 2 2 2 1 1	3h 37min	3h 50min
15 2 2 2 1 1 1	3h 38min	3h 40min
16 2 1 2 2 1 1	3h 52 min	4h 35min
17 2 1 1 1 2 2	3h 36min	3h 34min
18 2 2 1 1 1 2	3h 30min	3h 57min
19 2 2 1 2 1 1	3h 32min	3h 44min
20 2 2 1 1 2 1	3h 46min	3h 39min

从表2、表3中可见，STAR加样速度一定，当1≤Sampler≤88时，FAME工作表的排列模式对FAME运行速度影响不大；当88＜Sampler≤176时，FAME工作表的排列模式对FAME运行速度有一定的影响；当176＜Sampler≤264时，FAME工作表的排列模式对FAME运行速度有较大影响，最快的FAME工作表的排列模式比最慢的FAME工作表的排列模式缩时近1/3（FAME最快运行速度为3h26min，最慢运行速度为4h39min）；实验速度还取决于STAR的加样速度，我市无偿献血达100%，所以同一样本采用初、复检加样一次完成，其效率远大于初、复检分开加样。从表4不难看出，在实际能运行的8种模式中，以模式7或模式8同时设置距前一板架0min运行速度最快，效率最高。

5.2 是否距前一板架延迟20min，对FAME影响运行速度影响不一。当88＜Sampler≤176时，应同时考虑第二架第一板与前一回最后一板的间隔时间，以加样时间略大于间隔时间为宜。当88＜Sampler≤176，虽然表3中模式2和模式5均可达到最佳运行效果，但模式5第二架第一板与前一加最后一板的间隔时间不到20min，所以模式2为宜。实际上，当Sampler＞176时，也只须考虑第二架第一板与第一架最后一板的间隔时间，因第二架第一与前一架最后一板的间隔时间远远大于加样时间。

谢谢！