[转发]DiaSys R/S 2003 尿沉渣定量分析工作站临床应用及评价

DiaSys R/S 2003 尿沉渣定量分析工作站临床应用及评价
王振华
【摘要】 本文旨在探讨DiaSys R/S 2003 尿沉渣分析工作站对尿液沉渣分析的应用价值，主要作了三方面的工作：一、计数板法与R/S工作站法比较，结果显示两种方法对细胞计数无显著差别，平均CV值<5%，相关性检验s=0.986 (P<0.05)。二、计数格数对计数结果有一定的影响，特别对尿中微量细胞计数影响较大，一小格计数CV值高达9.1%，而对中量细胞计数影响较小，CV值<5%。三、R/S工作站法与定性法比较显示，R/S工作站法能够明确的表达尿中有形物的数量程度，且不同的操作人员对检验结果的报告基本一致。定性法在量的表达上远不及R/S工作站法，不同操作人员对检验结果的报告也有较大的差异。
评价：R/S工作站法对尿液有形成分计数结果可靠，可作为常规仪器应用于临床，使尿液分析标准化必备的实验仪器。
【关键词】DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作站 尿沉渣定量 尿沉渣定性
The Clinical Application and Evaluation of the DiaSys R/S Plus Urine Sediments Workstation Wang Zhenhua, Department of Clinical Laboratory, Changzheng Hospital Shanghai 200003
【Abstract】The text tried to inquire into the applied value of DiaSys R/S 2003 PLUS. The three kinds of work had been done: 1. To compare the method of DiaSys R/S 2003 PLUS with the count-broad method. The result showed no obvious difference between the two methods (P<0.05). 2. To test the effect of the count chequer number to count result, especially to the micro-cell count (>9.1%). 3. TO compare the method of DiaSys R/S 2003 PLUS with the qualitative method. DiaSys R/S 2003 PLUS could show the amount of visible materials in urine sample clearly and definitely and had no obvious difference in the test result among different operators.
Evaluation: The count result of the visible materials in urine samples made by DiaSys R/S 2003 PLUS was reliable. DiaSys R/S 2003 PLUS was an indispensable experimental instrument to standardize the urine analysis, and it could use in clinical test as routine instrument.
【Key Words】DiaSys R/S 2003 PLUS, quantitative analysis of urine sediments, qualitative analysis of urine sediment
DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作站的引进，解决了尿液分析标准化中的尿沉渣定量问题，我们在R/S工作站性能和使用方面做了以下工作。
一、材料
1 仪器
作者单位：200003上海市，长征医院实验诊断科
1.1 DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作站
1.2 血球计数板
1.3 一次性专用离心管
2 试剂
2.1 稀释清洗液：0.9%NaCl生理盐水
2.2 漂洗液：0.5%次氯酸钠溶液
二、方法
1．人工血尿液制备
2．R/S工作站法
3．血球计数板计数法
结 果
一 、计数板计数法与R/S工作站法比较显示：两种方法对细胞计数结果无显著差别（见表一）。相关性检验 :r=0.986(n=100 P<0.05) Y=5.04+1.03X

二 、R/S计数格数对结果影响结果显示：
只计数一格对微量血尿红细胞影响较大，CV值达9.1%，对中度血尿红细胞计数影响较小，CV值5%左右。计数二小格以上对计数结果影响明显减小，CV值小于5%（见表二）。

三、R/S工作站法与定性法差异
1．取一高浓度的血尿模型梯度稀释，用两种方法各做10次，结果R/S工作站法能够准确地表达尿中有形成份的程度，而定性法在量的表达上远不及R/S工作站（定量法）准确。见表三

2．双盲法比较R/S工作站法与定性法差异同一血尿样本不同人员操作：
R/S工作站法对检测结果影响不大，CV值为4.1%。定性法报告结果多样，范围达3-12/HP（见表四)

讨 论
一、戴西斯R/S工作站法计数结果可靠与有关报导基本一致。
二、一小格计数对微量细胞计数有一定影响，计数二小格对结果影响不大。在实际工作中我们只计数一个小格，当发现小格中仅有1个细胞时，则多计数相邻另一小格，即二个小格。这样，既保证结果准确，又能提高检测速度。
三、R/S工作站法能很好地表达尿中有形成分量的程度，受到临床医生的欢迎
四、定量分析尿沉渣是尿液分析标准化的重要内容之一，是检验质量上台阶上水平的一次飞跃。
评 价
戴西斯R/S工作站法对尿液有形成分计数结果可靠，可作为常规仪器应用于临床，是尿液分析标准化必备的实验仪器.

DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站临床应用评价
陈国强 俞小洁 胡庆丰 费鲜明 刘建栋
作者单位：310014杭州市，浙江省人民医院检验医学中心
【摘要】 目的 评估DiaSys R/S 2003尿沉渣定量工作站性能及临床应用。 方法 用pH6.5新鲜尿液配制红细胞理论值5个量级单位做准确性分析；用双盲法对同一标本中有形成分重复充池计数十次，求出其CV%。随机取100例病人尿标本分别用UF-100和R/S 2003对白细胞和红细胞作可比性试验。同时对475例不同年龄和性别的人群进行正常人参考值调查。 结果 红细胞5个量级的理论值与实测值之比，其偏差<-2.5%，CV为4.2%，白细胞CV为4.5%。上皮为6.8%，管型为7.6%；与UF-100比P>0.05，差异无显著性；红细胞、上皮细胞及管型的携带污染率为0，白细胞的携带污染率为1.5%；475例正常人参考范围分别是：红细胞，男性为0-3个/ul，女性为0-5个/ul；白细胞：男性为0-3个/ul，女性为0-6个/ul。 结论 R/S 2003尿沉渣工作站主要性能指标符合设计要求，可作为目前临床实验尿沉渣检验较为理想的分析工具。
【关键词】尿沉渣 尿沉渣分析仪 仪器评价
Clinical Applying evaluation about the DiaSys R/S 2003 Urine Sediments Workstation Chen Guoqiang, Yu Xiaojie, Hu Qingfeng, etc. Laboratory Medicine Centre of Zhejiang Provincial Hospital, Hangzhou 310014
【Abstract】Objective To evaluate the performance and clinical application of DiaSys R/S 2003 Urine Sediments Workstation. Methods We detected the fresh urine of PH6.5 and five artificially different concentrations of red blood cell (RBC), and analyzed their times with double incubation and calculated the CVs. At the same time, we quantified the RBC and WBC of 100 patients’ random urine samples with UF-100 and R/S 2003, and got their comparable results. At last, we gave the references by determining the urine of 475 volunteers of different ages and sex. Results It shows that the deviation is less – 2.5% and the CV is 4.2% between theoretical and actual results of RBC. But CV of RBC is 4.5%, epithelial cell 6.8% and cast 7.6%. And no significant difference exists between results of R/S 2000 and that of UF-100. The contamination rate is zero in RBC, epithelial cell as well as cast, but that of WBC is 1.5%, and the normal references of RBC are 0-3/ul (male) and 0-6/ul (female). Conclusion The designing requests accord with the chief performance parameters of R/S 2003 Urine Sediments Workstation. So R/S 2003 is a better urine sediments analyzer in clinical laboratory at present.
【Key words】Urine Sediments Analyzer Application Evaluation
尿沉渣检查标准化，规范化是目前世界各国临床实验室急待解决问题。传统分析方法由于缺乏标准化，不易定量，结果报告不统一，又缺乏可比性。美国NCCLS推荐的DiaSys R/S 2003定量尿沉渣工作站集尿沉渣分析标准化，定量化和自动化为一体。较好地解决了目前实验室尿沉渣分析中检验质量不理想的主要问题。为了解分析仪的主要性能和临床实际应用情况，我们对其进行了系列参数的评价并对我国正常人参考值范围进行初步调查。
材料和方法
一、 材料
1 仪器：
1.1 DiaSys R/S 2003尿沉渣定量工作站（美国DiaSys公司生产）。
1.2 UF-100流式尿沉渣分析仪及配套试剂（日本Sysmex公司生产）。
1.3 尿干化学仪及配套试剂由韩国盈东公司提供。
2 尿样：用一次性有盖无菌尿杯收集住院病人清洁中段尿50ml待用。
二、 方法
1 尿沉渣检查方法
1.1 DiaSys R/S 2003分析仪：取混匀尿样10ml于特制上宽底夹的刻度试管中，置400G离心5分钟，弃上清液9.75ml，留取尿沉渣0.25ml混匀，用工作站可调加样器吸取0.2ml于流动计数池中双盲法计数红、白细胞数。
1.2 UF-100流式尿沉渣分析：参照操作说明书。
2 评价方法
2.1 准确性检查：取H6P.5新鲜尿经干化学分析结果正常的Ph6.5新鲜尿离心沉淀，用上清液配制成红细胞含量（理论值）分别为400/ul, 200/ul, 80/ul,25/ul及10/ul共5个等级。再用UF-100和R/S 2003分析仪分别测定两次取均值。
2．2 精密度分析：用同一新鲜尿标本，按R/S 2003操作规程，重复充池计数十次，计算出各有形成分的变异系数（CV%）。
2．3 可比性比较：用UF-100和DiaSys 2003分别测定病人尿红、白细胞值，用t检验做可比性分析。
2．4 携带污染率：先取一份红细胞>200/ul，白细胞>225/ul，管型5条/ul和上皮细胞20个/ul的尿样，重复计数三次，接着用一份红细胞15/ul，白细胞8/ul，上皮细胞3/ul及管型1条/ul尿。重复计数三次，按公式求污染率。
2．5 将含1000个ul红细胞分别稀释成75%，50%，25%，10%和5%五个浓度为横轴，用R/S 2003工作站测定三次取均值作为纵轴求线性。
2．6 取475例各年龄段健康正常人清洁中段尿按工作站操作方法进行正常人参考值范围调查。
结 果
一、 准确性检查：红细胞准确性为97.5%，见表1。
二、 精密度分析：R/S 2003尿沉渣分析工作站具有良好的精密度，结果见表2。
三、 可比性比较：R/S 2003与UF-100分别测定不同浓度红、白细胞，结果无显著性差异，祥见表3。
四、 携带污染率：经实验表明，R/S 2003分析工作站红细胞、管型及上皮细胞无携带污染率为0，白细胞为1.5%。
五、 稀释线性：与稀释理论值呈直线相关，相关系数为γ=0.999，直线回归方程Y=0.1589±0.98x。
六、 用DiaSys R/S 2003分析工作站测定475例正常人尿液中红、白细胞数值经D检验数据呈偏正态分布，其参考值范围用百分倍数（P95）计算结果见表4。


讨 论
DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作站是一台由计算机控制，可调吸样器和一个标准化流动计数池组成，再配以人工智能分析软件，每次充池定量，有形成份分布均匀，背景清晰，具有准确性好，精密度高等优点，而且尿沉渣显微镜检查仍然是尿液有形成份鉴定的金标准。我们认为由NCCLS所推荐的DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作是尿沉渣标准化检查的理想仪器。[1]
工作站对红、白细胞及管型等主要参考数重复性好，可反复悬浮，变异系数小。与UF-100相比P>0.05，具可比性，充池时间为3秒，有形成份完全沉淀约50秒，分析一个尿沉渣平均约需2分钟，正常人尿样本所需时间更少。检测速度基本满足一般实验室的要求。工作台有自动冲洗功能，各主要有形成份较少有携带污染，但实际工作中我们也发现如霉菌等不易冲洗，工作中应提防其携带污染的发生。依据全国临床检验操作规程，[2]尿沉渣检验应在10-20个视野，用工作站时应根据实验情况不少于10个小方格（计数量为0.1ul）。以XX个/ul来报告。特别是同室操作人员应统一计数方式，以减少实验误差。据我们对475例正常人的参考值调查，红、白细胞值男、女间存在一定的差异，其结果要比许建邦等人的报告略高。可能是不同地方，不同人群，不同的实验方法所致，但两者具参考性。我们认为不同实验室应当建立自己的参考值范围以指导临床诊治。
综上所述，DiaSys R/S 2003尿沉渣分析工作站具有快速准确，操作简便，有助于实验室鉴别血尿，脓尿，结晶尿等尿道疾病。[3]是临床实验室适用于尿沉渣分析较为理想的仪器。
参 考 文 献
1 SchumanGB,TebbsRD,Comparison of slides used for srandardized Routine microscopic urinalysis , J MEO Technol, 1986,3:54-58.
2 全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997,133-134.
3 Schuman GB, SchumanJL, MarcassenN, Cytodiagnostic urinalysis of Renal and Lower urinary Tract Disorders , New YORK , Ny: Lgaka-shoin:1995.

DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站在临床应用的评价
林 桢 邓小燕 周 强 黄远荀 许建邦
作者单位：510260广州市，广州医学院附属二院
【摘要】 目的 评估DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站性能及其在临床上的应用。方法 用新鲜尿配制红细胞、白细胞理论值6个数量级单位作准确性鉴定；运用双盲法对同一标本的有形成份重复计数十次计算其均值、标准差及变异系数值。随机选择152例尿标本分别用工作站法、牛鲍氏计数板法和传统玻片法对红细胞、白细胞及管型作可比性比较。结果 红细胞6个数量级的理论值与实测值的误差≤1.12%,CV值为0.71%;白细胞6个数量级的理论值与实测值的误差≤1.32%,CV值为1.02%，稀释试验显示了良好线性范围；与牛鲍氏计数板法比较红细胞、白细胞和管型显示相关在显著意义（r>r0.01）,与传统玻片法比较显示相关无显著意义(r>r0.05)。结论 DiaSys R/S 2003工作站的主要指标符合术要求，准确度高、精密度好、操作简单、速度快捷、安全可靠、节省成本等优点。在临床应用中其结果与临床符合，是目前理想的尿沉渣分析仪。
【关键词】 DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站 尿沉渣检查 仪器评价
Valuation of diasys R/S 2003 urinary sediment analysis bend in clinic Application Lin Zheng,, Den Xian Yen, Zhou Qiang, Hluang Yuan Xun, Xu Jian Bang
【Abstract】 Objective to evaluates nature and application in clinic quanrirative analysis bench. Methods Missed up classification unit suspeusion of red blood cell and white blood cell using fresh urine , for appraising result preparatory; The shape componeuts of the same sample recounted tens to get its average standard and coefficient of variation with double-blind method. Compare the comparability of red blood cell white blood cell and cast slide, based on the random selection 152 urinary sample. Results in six classification unit of red blood cell, the error of the theoretical value and the actual measurement =<1.12%. in six classification unit of the white blood cell, the error=<1.325, CV1.02%, Dilution test displayed better linear range; The correlation displayed significant mean in red blood cell, white blood cell and cast of dench and the neubauer (r>r0.01). the correlation didn`t display significant mean(r>r0.05).Conclusion the main objective of diass accuracy, the easy operation, the more quick, the safety reliability, the saving cost ect, It is meet with the clinic result It is the idea urinary sediment analisys equipment;
【Key words】 urinary sediment equipvaluation diasys K/S 2003 bench
传统的尿沉渣分析方法，由于缺乏标准化的仪器和检查手段，结果不能客观地反映检测的真实情况，更缺乏可比性，所以尿沉渣检查的标准化成为当今急待解情况，我们用临床标本对其准确度、精密度、携带污染率、稀释功能等进行评估，并在同一标本用工作站法与牛鲍氏计数板法及传统玻片法进行比较，其决的问题。NCCLS（美国临床检验标准委员会）推荐，FDA（美国食品药品管理局）认可的DiaSys R/S尿沉渣定量分析工作站（简称工作站）为尿沉渣标准化检查提供有利工具。为了解工作站的性能和临床应用的结果如下。
材料和方法
一、 材料
1. 仪器
1.1 DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站（U.S.DiaSys Corportion生产）。
1.2 牛鲍氏计数板
1.3 载玻片及盖玻片
标本采集：按NCCLS文献GP-16A（ISBN 1-56238-282-9）〔1〕的要求，用一次性尿杯收集住院病人清晨中段尿（50~60ml）152例，随即送检。
二、 方法
1． 检查方法
1.1 工作站法：取混匀尿液10ml于特制管中（工作站随机附送）用400G相对离心力离心沉淀5分仲，弃去上层尿液9.8ml,留取尿沉渣0.2ml，用工作站可调加样器全部吸入流动计数室中分别计数每微升内红细胞、白细胞和管型数。
1.2 牛鲍氏计数板法：参照全国临床检验操作规程尿沉渣定量检查法进行〔2〕。
1.3 玻片法：参照全国临床检验操作规程尿沉渣镜检法进行〔2〕。
2． 评估方法
2.1 准确性检查
取新鲜尿液离心沉淀，留上清液配成红细胞含量（理论值）为1673个/μl ，1255个/μl，836个/μl，431个/μl，167个/μl，84个/μl；白细胞含量（理论值）为1858个/μl，1393个/μl，929个/μl，465个/μl，186个/μl，93个/μl，共6个数量级单位，分别计数红细胞、白细胞2次，以均值报告。
2.2 精密度检查
取同一新鲜尿标本，按工作站操作规程用双盲法分别对红细胞、白细胞重复计数10次，计算各自变异系数（CV5%）值。
2.3 携带污染率
分别取新鲜的高值红细胞尿三份（10492个/μl，10385个/μl，10513个/μl）、低值三份（36个个/μl，305个/μl，35个/μl）；高值白细胞尿三份（5792个/μl，5709个/μl，5687个/μl）、低值三份（61个/μl，60个/μl，59个/μl）；高值管型尿三份（287条/μl，283条/μl，302条/μl）；低值三份（5条/μl，4条/μl，3条/μl），分别重复充池计数3次，按下公式计算：
低值高限值-低值低限值
携带污染率(%)= ×100%
高值高限值-低值低限值
2．4 将含白细胞1500个/μl白细胞尿分别稀释成75%，50%，25%，10%，5%的浓度为横座标，每浓度计数3次，以均值为纵座标绘图。
2. 5 可比性分析
同一标本共152例用工作站法，牛鲍氏计数板法得玻片法分别进行红细胞、白细胞管型计数并用相关系数和直线回归进行分析。
结 果
一、 准确性检查
红细胞计数准确率为100.1%，白细胞计数准确率为99.4%（详细表一）。

二、 精密度检查
工作站计数细胞有良好精密度，红细胞的CV值为0.71%，白细胞的CV值为1.02%（详见表二）。

三、 携带污染率
工作站携带污染率极低，接近“0”值，测得红细胞携带污染率为0.009%，白细胞携带污染率为0.035%，管型携带污染率为0。事实上，经冲洗后，流动计数室非常清晰，无有形物质沉积（详见表3）。

四、 线性范围
细胞稀释后工作站显示了良好的线性（详见表四）。

五、 可比性分析
工作站法牛鲍氏计数法比较，红细胞 、白细胞和管型有相关非常显著性意义。（r>r0.01），直线回归分析：
红细胞y=2.25+0.80×35.51;白细胞y=0.52+0.88×24.97;管型y=0.13+0.16×0.24（详见表五）。

工作站法与用工玻片法比较，红细胞、白细胞、管型均相关无显著意义（r>r0.05），直线回归分析：红细胞y=4.42+0.14×2.13；白细胞y=3.80+0.08×3.15；管型y=0.003+0.0002×0.08（详见表六）。

（注因玻片法是半定量估算法，>10个/HPF细胞及管型以“+”号表示，不列入统计。）
讨 论
尿沉渣显微镜检查是尿液分析的重要组成部份，对有形成份鉴定起确证作用。过去由于检测方法不标准，也不规范，造成结果差异极大，操作者之间，实验室之间缺乏可比性，直接影晌临床诊断价值。按NCCLS要求研制的DiaSys沉渣定量分析工作站提供了解决尿沉渣检查标准化的理想仪器。
工作站是由微电脑控制台，可调加样器，流动计数室三部分组成，它根据动力管道产生吸力的原理，蠕动泵自动把尿沉渣吸入并重悬浮在流动计数室内，由于充池量是衡定的，计数视野是衡定的，每格的容积是衡定的（每大格为0.25μl ，每一小格为0.01μl），加上背景清晰，容易辨认有形物质，使检查更加准确，用单位体积（XX个/μl报告符合NCCLS和CCCLS的要求）更受临床医生及病人的欢迎；它的全部操作都在密封管道中自动进行，从加样，冲洗全程只需秒，大大缩短振摇、加样、洗涤时间，计数一份标本平均仅在2分钟以内；对有形成份多的尿样可自动进行定量稀释，完全避免人工操作造成污染和人为的误差，更因它基本不需消耗品（如：吸管、玻片、盖玻片、牛鲍氏计数板等），冲洗液及清洁剂是用生理盐水5%次氯酸钠溶液，节省大量经济开支和仪器洗涤工作。从我们临床用过程中，它的准确度高，红细胞为100.1%，白细胞为99.4%；生复性好，红细胞CV%值为0.71，白细胞CV%值为1.02%，有形成份稀释后具有良好线性范围，其携带污染率为“0”，与牛鲍氏计数法比较有良好相关性（r>r0.01），与手工玻片法比较则相关无显著意义（r>r0.05），说明目前沿用玻片法显微镜检查是非常粗糙和落后的方法，建议在适当时候应予标准定量法代替。
综上所述，我们认为DiaSys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站具有准确度高、精密度好、操作简便、速度快捷、安全可靠、节省成本等优点，值得推广使用。
参 考 文 献
1 NCCLS LITERATURE GP-16A （ISBN 1-56238-282-9）（内部资料）
2 全国临床检验操作规程.第二版.南京:东南大学出版社,1997.133-134.

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