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凝血酶时间测定试剂盒(TT)
一、适用范围:筛选类肝素抗凝物存在及纤维蛋白原含量减少和作为肝素治疗及溶纤治疗监测
二、原理:待测血浆加入标定的凝血酶溶液,纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶时间。
三、操作步骤:
A.样品及试剂的制备
1.制备待测血浆样品:静脉采血,109mmol/L枸橼酸钠与全血按1:9比例混合均匀。以2500´g离心15分钟,用塑料移液管取出血浆,血浆样品必须在4小时内进行测试。
2.TT试剂: 每瓶凝血酶精确加入1.0ml TT缓冲液,轻轻混匀室温下静置10分钟,温度平衡后备用。
3.如需配制正常参考血浆(或正常质控血浆、异常质控血浆),请按各自说明书配制。
B.测定
以LG-PABER凝血因子分析仪为例,操作步骤如下表
先加入测试珠,然后将样品血浆(或正常参考血浆、异常质控血浆)加入测试杯 |
100ul |
37℃预温区预温180秒。 |
凝血酶(室温) |
100ul |
立即启动仪器进行自动测试并记录结果。 |
C.其它自动化仪器测定
参照相应的仪器操作手册操作。
四、注意事项:
1.试剂及缓冲液严禁冰冻。
2.不同批号的试剂盒各组分不能混合使用。
3.TT试剂仅在室温下使用,不得预温、加温
4. 在测定过程中,所有试管、移液管、注射器必须是塑料的。
5. 待测血浆不能采用肝素、EDTA抗凝,应使用109mmol/L枸橼酸钠抗凝。
6. 如果血球压积<20%或>55%,需按下列公式调整血样与抗凝剂的比例:抗凝剂用量=0.00185×血量(ml)×(100-病人红细胞压积)
7.建议每天用正常参考血浆定标,以凝血酶时间比值报告结果
8.每个实验室必须有一套质量控制程序,这包括采用正常和异常对照来评估仪器,试剂及技术操作。如果对照血浆所得数据不在参照范围内,那么病人的测定结果将被认为是无效的。
9.试剂用后应及时置于2℃-6℃保存,以延长试剂的寿命。
临床意义:延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在,纤维蛋白原降解产物(FDP)增多及DIC、低(无)纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症,常见于肝、肾病等。 |