[原创]浮动界标和固定界标的讨论

此贴是回复labsKy上的帖子，在这里备份一下。

浮动界标和固定界标是细胞计数的两个识别方法，首先，要取得细胞信号，通过电路的放大整形后送到a/d转换器，cpu经过对转换信号的识别取得各个细胞脉冲信号的高度，把临近高度的信号累计计数（这就是所谓的通道技术），这样通过256/512/128个通道的数据累计和描点，得到各个参数的曲线（也就是直方图，主要是wbc\rbc\plt的直方图，如果采用rbc\plt单通道技术，那么就会得到rbc和plt的一个整体直方图）。

那么得到这个直方图，各个细胞的总数也就得到了，如何进行分类就是界标技术了（主要是wbc分类，如果rbc和plt公用一个直方图，那么还要将rbc和plt区分开也叫rbc/plt分类）。

浮动界标重点在软件上，通过算法识别出直方图的两个峰，以左侧峰的起点开始计算总数，以右侧峰的落点停止计算，那么这左右两个界标就将总数（也就是计算范围）确定下来，在wbc直方图上，除了两个计数范围的界标，还要识别出左侧峰的落点和右侧峰的起点，且这两个点之间要有一定的距离，这个距离是有要求的同时这4个起始点的在直方图上的高度时有一定要求的，这些要求都符合，那么就会增加两个界标，就是中间细胞分群的界标，这样wbc分类就出现4个界标线，通过这4个界标线就将wbc总数和分类确定下来，由于通过软件算法得到，那么直方图在坐标上的位置每个标本是不同的，而且界标线的位置也是根据不同标本的不同直方图形态也就不相同。在硬件方面以sysmex为代表的浮动界标电路比较复杂，其独有的pda技术无人可抵，浮动界标的校准一般通过标准品进行软件的灵敏度和硬件灵敏度的矫正，而其他的厂家的浮动界标技术就不那么讲究了。至于是否能够手工分类那只是sysmex的一个附属产品，固定界标也可以采用（只是没有依据罢了）。对rbc和plt，浮动界标技术仅仅是将一个峰的起止点判断出来并将其标定界标，计数仅计数界标内的数量，在rbc和plt公用直方图的设计里面（sysmex xt1800i,abbott 3700等都采用，据迈瑞的资料，其设备也有采用），会得到一个左侧是plt的峰，右侧是rbc峰的类似wbc的直方图，浮动界标要做的就是将他们的起止点找到并区分开。浮动界标的算法非常多，条件设定也很复杂，判断依据也很多。

固定界标技术是在直方图出来后，由于硬件电路设计比较复杂，而且在硬件上设置了直方图的起点和增益，软件的工作仅仅是直方图上显示出来的图形范围进行总数计数，并且根据大量的统计数据（各个厂家不同）设定出中间细胞的范围，这样wbc同样是4个界标线，但这4个界标线都是固定不变的（不同厂家设定不同，coulter的中间细胞界标是90--110fl，abx是100-150fl等等，这是根据电路的增益和试剂作用的不同来决定的，每个厂家都有自己的统计数据，这也就是为什么不同厂家的试剂不大能通用的原因之一，浮动界标也是如此），如果要矫正固定界标，那么一般需要通过有两个标准值的标准品进行增益矫正，这两个值实际上是左侧峰和右侧峰的峰值，只要把这两个峰值确定了，那么整个图形的宽度也就确定了，起点由电路设置死了，那么整个总数和分类信息也就确定下来了。rbc和plt也是如此。

两种方法的区别，除了软硬件上的区别外，在实际应用中，浮动界标如果得到的图形不符合其算法识别的设定，就无法进行分类甚至无法进行总数计算，而且在分类过程中，sysmex的中间细胞的识别往往偏高，而利用他们的标准品进行灵敏度矫正的数值又是准确的，所以，经常会出现总数或者分类---***等情况，也有的出现只有一个到两个分类值剩下的没有。出现前面的原因一般是直方图无法符合软件设定的要求，干扰的存在是主要的，像电极，电极线，计数池，屏蔽，管道，地线等等，根源多种多样但结果的影响是一样的。而固定界标由于是硬件起着决定作用，只要有直方图它就能进行总数和分类计算，可以说不管直方图什么样子，经常能够看到直方图压缩或者拉伸很严重，界标明显切割两个峰，但依然有总数和分类，几乎不存在没有总数和分类的情况。

当然，无论固定界标还是浮动界标都有自己的验证标准，2次计数，3次比对，堵孔电平，计数时间，压力温度检测等等，每个峰的起止点和峰值的范围都有一定的要求，超过这个设定，即便勉强有数值出现，也会跟随大量的提示信息如“---，！，*，？，wl,r1,r2,r3...,l1,l2,g1,g2”等等符号通知检测人员是否进行复查或者镜检。

固定界标是以coulter这个鼻祖级的厂家首先采用的，并在欧美各厂家广泛使用，浮动界标是以sysmex这个检验设备新贵倡导使用并在日本和中国厂家经常能够看到，以wbc为例，固定界标的图形一般从26---450fl之间（不同厂家不同），而浮动界标一般在350fl以内。由于起止点的选取不同,浮动界标的总数一般低于固定界标,分类百分比却差不多.

两种方法互有优劣不足，孰是孰非其实没有多大意义，毕竟是筛查设备，仅提供一个参考，不能作为标准的东西来看待。

大师级的评论

大师

牛啊

非常好，谢谢！