HBsAg 检测的标准操作程序

HBsAg 检测的标准操作程序

实验室名称	项目	编号	制定日期
******	ELISA方法	******	**年**月**日

【目的】

保证检测结果准确可靠.

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【标本的采取和保存】

随机静脉血2ml，分离血清备用。也可使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免无溶血，避免反复冻融，不可用NaN₃防腐。

【操作程序】

1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1:20稀释。

2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设HBsAg阳性对照2孔，HBsAg阴性对照2孔，空白对照1孔。

3．加酶结合物：每孔0.05毫升，空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。

4．洗 板：

1)手工洗板：弃去反应板条孔内液体拍干；用洗涤液注满每孔，静置5—10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。

2)洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。

5．加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05毫升；再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育15分钟。

6．终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。

7．测定：用酶标仪读数，可选择唯波长450nm(以空白孔校零)或双波长450／630nm，读取各孔OD值。

【结果判断】

Cutoff值计算：COV=阴性对照平均OD值×2.1

标本OD值>COV为阳性，标本OD值<COV为阴性

注：阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。

【注意事项】

1．试剂使用前应摇匀，并弃去1-2滴后垂直滴加，注意均匀用力。

2．从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内贮藏备用。

3．洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

4．不同批号试剂请勿通用。

5．结果判断须在10分钟内完成。

6．封片不能重复使用。

7．用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。

操作人员 部门主管 质量负责人

姓名 ****** ****** ******

日期 **年**月**日