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发光基础

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一把大力钳 发表于 2020-3-17 19:00 | 显示全部楼层 |阅读模式

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化学发光免疫分析简介:
(ChemiLuminescence ImmunoAssay, CLIA)
化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸收化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术,即为化学发光免疫分析。
化学发光的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光时间很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光时间从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量,必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器,也可以配有全自动化仪器。
     化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者,是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛,已占各种免疫分析的首位。
目前已有若干国际知名公司的CLIA系列产品及配套仪器进入我国,但试剂与仪器的价格都很贵,不适应在我国广泛的普及和应用。目前我国的CLIA产品基本尚属空白。因此,我国亟待研究开发符合国内条件及需求并在国内有竞争力的CLIA系列产品,使我国的免疫分析能尽快赶上当今世界范围内免疫分析发展的趋势和步伐。

化学发光免疫分析的优点:
1.灵敏度高:这是CLIA关键的优越性,其灵敏度可达10-16mol/L(RIA为10-12mol/L)。又如化学发光底物(如AMPPD)可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏5х105倍。
2.宽的线性动力学范围:发光强度在4~6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度(OD值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围,但放射性限制了其应用。
3.光信号持续时间长:辉光型(glow type)的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。
4.分析方法简便快速:绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂(或复合试剂)的一步模式。
5.结果稳定、误差小:样品系直接自己发光,不需要任何光源照射,免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。
6.安全性好及使用期长:在上述优点前提下,更免除了使用放射性物质。到目前为止,还未发现CLIA的危害性。
综合以上优点,目前已有的各种免疫分析尚没有出其右者,现在国外发达国家在CLIA的研究和开发方面进展很快,已有全自动的化学发光(闪光型和辉光型)与电化学发光免疫分析等系列产品。我国在化学发光免疫分析方面的研究还比较落后,这就是我国急需研究和发展CLIA的原因。
化学发光免疫分析的研究现状:
类型        原理及试剂        发光类型
化学发光免疫分析(CLIA)
用化学发光物质直接标记抗原或抗体组成
吖啶酯(acrydinum esters)闪光型
化学发光酶免疫分析(CLEIA)
不用化学发光物直接标记免疫制剂。在酶免疫分析完成后加入化学发光底物,产生化学发光
1.         辣根过氧化物酶(HRP)/H2O2/Luminol系统 辉光型
2.  碱性磷酸酶(AP)/1,2二氧乙烷稳定衍生物(AMPPD)系统 辉光型

电化学发光免疫分析(ECLIA)
应用电致化学发光标记物与电化学手段相结合产生化学发光的免疫分析        三联吡啶钌(Rucbpy)32+
三丙胺氨系统 闪光型


化学发光免疫分析可检测项目:



内分泌 (Endocrinology)
T3 三碘甲状腺原氨酸
T4 甲状腺素
FT3 游离三碘甲腺原氨酸
FT4 游离甲状腺素
TSH 人促甲状腺激素
Cortisol  皮质醇
FSH 促卵泡激素
LH 促黄体生成素
Testosterone 睾酮
Progesterone 孕酮
PRL 催乳素
Estradiol(E2) 雌二醇
Insulin  胰岛素
C-peptide  C-肽
Folic acide  叶酸
维生素B12

肿瘤标志物系列
AFP 甲胎蛋白
PSA 前列腺特异性抗原
CEA 癌胚抗原
β-HCG β-人绒毛膜促性腺激素
CA125 卵巢癌相关抗原
CA15-3 乳腺癌相关抗原
CA19-9 消化道癌相关抗原
CA50 消化道肿瘤相关抗原
β2-MG β2-微球蛋白

传染病系列
HbsAg/ Anti-HBs/ HbeAg/ Anti-Hbe/Anti-HBc/ 乙肝五项
HAV Ab 甲型肝炎抗体
HCV Ab 丙型肝炎抗体
HDV Ab 丁型肝炎抗体
HEV Ab 戊型肝炎抗体
HIV-1/2 Ab 人类免疫缺陷病毒1型和2型抗体
TP 梅毒螺旋体抗体

心肌标志物
CK-MB 肌酸激酶同工酶
Myoglobin 肌红蛋白
Troponin I 肌钙蛋白I
Troponin T 肌钙蛋白T

治疗药物监测
Carbamazepine 卡马西平
Cyclosporine 环孢霉素
Digoxin 地高辛
Phenytoin 苯妥英
Phenobarbital 苯巴比妥
Theophylline 茶碱


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LEAVES 发表于 2020-3-17 22:00 来自手机 | 显示全部楼层
学习了
cuic 发表于 2020-3-17 22:42 来自手机 | 显示全部楼层
谢谢分享
suxi 发表于 2020-3-18 08:01 | 显示全部楼层
谢谢楼主的经验分享啦
gengen 发表于 2020-6-16 14:40 | 显示全部楼层
谢谢分享
ycfun 发表于 2020-6-16 17:11 | 显示全部楼层
学习了
kefang-gZ 发表于 2020-8-17 15:29 | 显示全部楼层
谢谢分享,学习了
yj114 发表于 2020-8-17 19:44 | 显示全部楼层

学习了
不变的音乐 发表于 2020-10-15 18:01 | 显示全部楼层
学习
yj114 发表于 2020-11-14 06:56 来自手机 | 显示全部楼层
谢谢分享
yeeb 发表于 2020-11-14 17:25 来自手机 | 显示全部楼层
各位大神,流式化学发光国际有哪几家?
ycfun 发表于 2021-3-5 14:09 | 显示全部楼层
谢谢分享
kuga 发表于 2021-3-30 09:22 | 显示全部楼层
谢谢分享
catinmask 发表于 2021-3-30 23:47 | 显示全部楼层
谢谢分享,学习
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