谈MaxM血球仪的五分类技术原理和故障分析方法 [转帖]

作者：陈宇飞 美国贝克曼库尔特仪器公司生产的五分类血球计数仪，除了ACT 5 Diff型号采用染色法以外，其余的,如MaxM,HmX,STKS,Gen’s,HL700系列等均采用流式结构的VCS分类技术。 VCS中S代表激光散射性，反映细胞在聚焦点时的形状和表面特性，与细胞的皱折和表面积大小有关； C是射频传导特性，由流式池内的双电极加高频电流测得，主要反映细胞的核质比大小；V是双电极的直流特性，即利用库尔特原理测量出原态白细胞的体积大小。 下图中从sample in流进的血液，只有原态大小的白细胞。这是因为,由分血片采集到的用于五分类的28微升血样，先与Erythrolyse溶血素试剂混合，其中的红细胞和血小板被pak lyse胀破溶解掉，同时所有的白细胞也已经涨大，但它们马上又与Stabilyse(pak preserve)溶血素混合，将涨大的白细胞收缩回原态大小。 [upload=gif]uploadimages1/xqwx/2004821117192640.gif[/upload] 每次原态白细胞的VCS测量，在MaxM的流式通道中进行，共计数8192个颗粒。这里面可能会含有未溶解的红细胞，大血小板和一些试剂杂质。所以实际测量到的白细胞数量，最多只能为8192个，并且白细胞数量占8192的比重，越大越好。这8192个颗粒通过流式通道的时间，MaxM认为应该与白细胞的总数有关。最优化的时间为白细胞总数去除63。假设此样本的WBC值为6.3，那么它在流式池中通过的最优化时间应该为10秒钟，优化时间范围在9-11秒。（10±1秒）。 *如果在超出优化时间50%以上，仍未数到8192个颗粒，就会报PC1错误。 出现这种情况一般为流式通道堵塞所致，通常用次氯酸做个消毒程序（Disinfection）,可以解决。 *如果在小于1秒钟时间内，马上数到了8192个颗粒，MaxM会认为白细胞通过流式通道的速度太快，机器会报PC2错误。 这种情况下，产生的原因一般是8192个微粒中，有许多未被E-lyse溶解掉的红细胞和血小板（并且占大多数），即pak lyse基本不起作用。孕妇，肾病人血样等会经常出现这种PC2情况，原因是这些样本的红细胞壁太厚，在pak lyse作用下很难涨破。适当增大pak lysel泵入量，可以大大减少PC2报警率。但有一少部分血样需要被稀释后，再测量出五分类的百分比数值。 但是，如果鞘液流动出现问题，也会同样造成PC1和PC2错误。 这一般是由上，下鞘流的液阻堵塞造成。如果上部的液阻（6英寸负压调节器旁的螺旋细铁管）堵塞，会有PC1故障。下面的液阻（mixing chamber旁的细软管）堵塞，会有PC2故障。 还有一种情况，在没有任何报警下，机器不报告五分类结果。显示…..，遇到这种情况，先做一个乳胶质控（Latron Control 2），看一看V,C,S的增益值和CV值是否在控。它们的增益可以分别用电位器R17，R26和R8来调节，c的cv值可以通过更换RF射频电子管来满足要求，s的cv值由TTM的激光束聚焦位置决定（一般在出厂后，无需再调整）。