一步法，两步法的区别？

请问各位大佬：
   化学发光上的一步法，两步法具体怎么理解，为什么有些项目是一步法，有些是两步法，有什么区别，哪位大神给解释一下，万分感谢！

试剂样品一次加入孵育冲洗后反应的项目是一步法项目，βhCG这些都是一步法项目。
试剂样品分两次加入，两次孵育两次冲洗反应的项目是二步法，T3/T4这些是二步法项目。
当然厂家也有把二步法的项目做成一步法试剂使用的，效果如何各说各话。可以理解为生化的单试剂和双试剂的区别，其实还有三步法的项目，等同三试剂的理解。只不过发光不同于生化，每一步孵育都要清洗后才能加入下一种试剂，然后再孵育。
这些你阅读各厂家的操作手册就可以很容易看明白，阐述的非常清楚。

楼正正解

感谢老大细心讲解

学习了

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谢谢

郑振寰 发表于 2018-11-15 23:08
试剂样品一次加入孵育冲洗后反应的项目是一步法项目，βhCG这些都是一步法项目。
试剂样品分两次加入，两次 ...

学习了

可以理解为各厂家根据各自的配方和试剂性能选择的模式，每个项目的反应方法各厂家也不一样。最终目的是提高试剂的灵敏度、线性范围，解决Hook效应等。

学习了

张刘 发表于 2018-11-30 16:38
可以理解为各厂家根据各自的配方和试剂性能选择的模式，每个项目的反应方法各厂家也不一样。最终目的是提高 ...

感谢

郑振寰 发表于 2018-11-15 23:08
试剂样品一次加入孵育冲洗后反应的项目是一步法项目，βhCG这些都是一步法项目。
试剂样品分两次加入，两次 ...

对发光这块我还不是很理解，比如说：一步法加入样本后是直接加试剂（包含了磁珠和酶吗？），还是说两步法加入样本后加试剂1（磁珠）到后面加试剂2（酶）呢？

一步法就要加试剂1和磁珠。二步法要再加一种试剂。

郑振寰 发表于 2018-12-21 13:08
一步法就要加试剂1和磁珠。二步法要再加一种试剂。

谢谢，老师

学习了
谢谢

小白菜菜 发表于 2018-12-21 10:38
对发光这块我还不是很理解，比如说：一步法加入样本后是直接加试剂（包含了磁珠和酶吗？），还是说两步法 ...

一般情况下，一步法样本、磁珠、酶一起加，两步法先加样本和磁珠，分离后再加酶

张刘 发表于 2018-12-24 19:02
一般情况下，一步法样本、磁珠、酶一起加，两步法先加样本和磁珠，分离后再加酶 ...

分离后再加酶？不是分离后后就加发光底物了吗？

小白菜菜 发表于 2018-12-25 12:11
分离后再加酶？不是分离后后就加发光底物了吗？

两步法是分离后加酶，然后再分离，完了再加底物