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ABX PENTRA60五分类血液分析仪是一款结构紧凑，用血量少试剂用量少，五分类实现方法新颖的仪器，它秉承了ABX的一贯传统，小巧，精致，细腻，价格低廉，所以在国内自2000年开始陆续装机接近300台，由于培训和养护工作的不足造成此类机器在使用和保养上存在诸多问题，因此，本站陆续推出PENTRA60系列专业讨论贴，以此来与大家分享和讨论。
一、仪器的主要性能
1）测试项目：测试项目可选择CBC测试和CBC+5DIFF测试，CBC测试模式用血量30ul，提供12项参数，WBC,RBC,HGB,MCV,MCH,HCT,MCHC,PDW,PLT,PDW,MPV,PCT；CBC+5DIFF测试模式用血量53ul，提供26项参数，WBC,RBC,HGB,MCV,MCH,HCT,MCHC,PDW,PLT,PDW,MPV,PCT，LYM # %,MON # %，GRA # %，EO # %,BA # %,LIC # %（巨大不成熟细胞），ALY # %(异常淋巴细胞)。
测试速度为60T/H，提供四个图形，一个分类散射图，三个直方图
二、试剂及用途：
1、稀释液 ：机外放置， 稀释血液标本，在分类中起鞘液作用，ph中性
2、 HGB溶血剂：机内放置，400ml， 结合血红蛋白进行比色，吸光度范围555nm，ph6.65，有含氢化物和不含氰化物两种可供选择。
3、 清洗剂：机内放置，1L，清洗管道及计数池，计数孔，鞘流池,ph9.6
4、 EO试剂：机内放置，1L，血液标本分类使用，染色剂, ph6.9（主要成分氯唑黑E）
5、 BA试剂：机内放置，1L，WBC总数测定及 嗜碱细胞测定,ph2.4
6、 浓缩清洗剂：保养使用，浓缩清洗计数池计数孔。ph 14
试剂消耗用量成本请参见https://www.yeec.com/forum.php?mod=viewthread&tid=157&page=3
三、多通道样本分配技术（MDSS）：
样本采集后在采样针中分为多段分次加入相应的计数/混合池进行分配混合：
在分配过程中依靠严格的步进马达控制注塞泵来精确血量，在混合的时候采用样本加注和试剂加注同时进行并按照切线方向沿计数池内壁旋转流到计数池底部，这样可以保证样本形态的完整，最大限度的减少干扰。
在加注前，所有试剂均经过恒温35摄氏度的预热过程，保证结果准确。
四、测定方法及原理：
1、RBC/PLT: 微孔直径 50um,稀释比例1：10000，整个过程如下：10ul标本进入HGB池与1700ul稀释液混合形成第一次稀释，稀释比例为1：170，然后将第一次稀释液体吸取42.5ul进入RBC/PLT与2500ul稀释液进行二次混合，稀释比例为1：58.8，这样RBC/PLT的稀释比例为1：10000，在负压（200mb）作用下进行2次每次5秒的电阻法计数，得出相应的直方图和数值及计算项目。
2、HGB测试：稀释比例1：250，吸光度为555nm测量，整个过程如下：10ul标本进入HGB池与1700ul稀释液混合形成第一次稀释，稀释比例为1：170，当RBC/PLT二次稀释标本吸走之后，加入400ulHGB溶血剂和400ul稀释液，这样，整个稀释比例就是1：250，在555nm的光源照射下测定其吸光度，然后换算成HGB值。
3、WBC/BAS计数：微孔直径80um,稀释比例1：200，整个过程如下: 10ul血液标本进入wbc/bas池与2000ulBA试剂混合，形成1：200的稀释比例溶液，在负压（200mb）的作用下进行2次每次6秒的电阻法计数，由于采用差别溶解技术，WBC和BAS被一同计数出来，利用界标线进行判别，提供BAS直方图和WBC,BAS # %数值。
上图就是差别溶解之后取得的直方图，WBC总数就是图中WBC和BAS部分的总和，在BAS区域中由于数值很少 ，因此经常是空白，这时由于针式打印机无法细腻的打印出来的结果，如下图：
4、双鞘流（DHSS）分类计数，整个过程如下，25ul血液标本进入LMNE混合池与1000ulEO试剂和1000ul稀释液混合形成稀释比例为1：80的溶液，孵育时间为12秒，这时RBC/PLT/BAS细胞已经被试剂破坏掉，在鞘流泵作用下进鞘流池进行双鞘流计数，首先经过微孔直径为60um的红宝石孔进行电阻法计数，判断细胞体积，然后在200ms之内通过鞘流直径为42um的鞘流通道进行光吸收测定判断细胞内容物，整个计数时间为12秒，通过鞘流液体容积为72ul。这样形成分类散射图，并提供lym,gra,mon,eo,lic,aly的绝对值和百分比。
双鞘流计数是abx的专利技术，详细原理如下：
根据上图可以看到，在进行双鞘流计数的时候，首先进行的是鞘流电阻计数，对细胞进行体积测定，然后再进行光吸收比率测定，对细胞内容物进行测定，最终将这个细胞在散射涂上标注出来，在双鞘流的上下两端分别加上恒流电源，以保证电阻法测量，孵育后的溶液在右侧鞘流泵的作用下经过6号口进入鞘流池从1号口流出，为了保证这些检测细胞能够正确的通过计数孔和鞘流通道，需要利用外来鞘流来进行矫正，这样，在5，7号口通过左侧鞘流泵注入稀释液来形成第一股鞘流，保护所测混合溶液能够直接通过计数孔并且保证其不发生偏移和扭曲，保证结果准确，混合溶液通过计数孔后，2，4口通过中间鞘流泵注入稀释液形成第二股鞘流，来保证吸光度测量的正常。
五、图形及其界标范围的设定：
分类图形及界标设定
上图是一个标准的分类散射图的样本，清晰的标明了各个细胞形态所处的范围和位置。
这是一个利用进口原装试剂测试的正常人标本的结果，拍摄自仪器屏幕：
注意，所有的结果后面都非常干净，在1标注的区域和2标注的区域没有任何提示，在使用不合格的国产试剂后，在1的区域内会出现$,*，H,L等标记，在2标注的区域内会出现FLAG:L1,LL,N1,RM,MN,LN等等标记，非常的不干净，结合图形观看就明显的看出分类图形当中的界标线压住细胞脉冲群，图形压缩无法拉开等等非正常现象，因此选择正确的试剂是保证结果准确地前提，我们这里不过多的讨论试剂是否合格的问题，如果大批量的标本出现提示符号，就应该考虑调整界标线，一般是在新装机或更换试剂品牌的时候进行，条件有二，一是配合镜检，二是观察散射图是否完全拉开仅仅是界标线位置不对。
方法是做正常人的血常规测试，得出报告和散射图，用这个散射图跟上图做对比，观察LYM,ALY,.MON,LIC,GRA,EO六个脉冲群是否在界标范围内，找出那一条界标线位置不正确，配合下图可以准确地找到界标线位置不正确的界标线名称：
之后，进入菜单MENU----5.SETUP------3.LABLIMITS------4.THRESHOLD（密码123）进行调整，各个界标线的名称、含义及范围如下：
NoL：区分开噪音区和左移淋巴区域，标准值是22，最小值0，最大值可以与LL线重合。
NoN：区分开噪音区和左移中性区域，标准值是25，最小可以与NoL重合，最大可以与NoE重合
LL：区分开左移淋巴区域和淋巴区域，标准值是30，最小值可以与NoL重合，最大值可以与AL重合
LN：区分开左移中性区域和中性区域，标准值是35，最小值可以与NoN重合，最大值可以与LMN重合
NoE：区分开噪音和嗜酸细胞区域，标准值是48，最小值可以与NoN重合，最大值可以与CHANNEL127线重合
LMN：区分淋巴，中性，单核细胞的公用界标线，标准值70，最小值可以与LN重合，最大值可以与LMU重合
AL：区分淋巴区域和异常淋巴区域，标准值是68，最小值可以与LL重合，最大值可以与LMU重合
LMU：区分开异常淋巴和单核区域斜线的上点，标准值是78，最小值可以与AL重合，最大值可以与LMG重合
LMD：区分开异常淋巴和单核区域斜线的下点，标准值是90，最小值可以与LMU重合，最大值可以与RM重合
MN：区分单核区域和中性区域斜线的上点，标准值是90，最小值可以与LMU重合，最大值可以与RM重合
RM：区分单核区域和右移单核区域，标准值是118，最小值可以与LMD重合，最大值可以与CHANNEL127线重合
RN：区分中性区域和右移中性区域，标准值是118，最小值可以与MN重合，最大值可以与CHANNEL127线重合。
NL：区分淋巴区域和中性区域，标准值是29，最小值0,最大值可以与RMN重合
RMN：区分右移单核区域和右移中性区域，标准值是51，最小值可以与NL重合，最大值可以与NE重合
NE：区分中性区域和嗜酸区域，标准值是82，最小值可以与RMN重合，最大值可以与CHANNEL127线重合
FLN：NL报警区域的通道数 标准值2
FNE：NE报警区域的通道数 标准值2
FMN：MN报警区域的通道数 标准值2
WBC和嗜碱直方图的界标也在此调整，下图是标准的嗜碱直方图
如果大量的图形出现移动，并且数值不正常就需要调整
BA1:：区分L1绝对值和WBC计数区域，标准值是35
BA2：区分WBC和BAS区域，标准值是110
BA3：BAS结束线，标准值是240
进行重复测试认为合格后，必须用不同类型标本进行反复测试，并且配合镜检直到大部分结果不出现提示为止。
六、正常操作菜单：（密码没有特别说明均为123）
1、START CYCLE 开始测试
2、CALIBRATION 定标
1）AUTOCAL 自动定标
2）CHANGE COEFF. 改变定标值
3）PRINT COEFF.打印定标值
4）REPEATABILITY 测试精度，这是用新鲜血进行3-11次的重复性CBC测试，对于平均值和CV%进行考察以检验仪器的精度。
3、REAGENTS 试剂
1）LEVEL/CHANGE 试剂剩余量和更新
2）DAILY WORKLOAD 每日工作量 5DIFF最大为500，CBC最大为500，根据实际情况变更
3）PRIME 灌注
1。DILUMENT 稀释液
2。CLEANER 清洗剂
3。EOSINOFIX EO试剂
4。BASOLYSEII BA试剂
5。ALPHALYSE HGB溶血剂
6。ALL REAGENT 全部试剂
7。UNPRIME ALL反灌注（试剂排空）
4、MAINTENANCE 维护
1）AUTOCONTROL 自动调节
2）CLEANING 清洗
3）HYDRAULICS SYSTEMS 液路系统
1。BACK FLUSH 反冲
2。RINSE 冲洗
1/ CHAMBERS 计数池冲洗
2/ CYTOMETER 鞘流池冲洗
3。DRAIN CHAMBER 排空计数池
1/RINSE 冲洗池排空
2/FIRST DILUTION 初次稀释池排空 即HGB池排空
3/LMNE 分类混合池排空
4/ WBC/BSAO
5/RBC/PLT
6/ALL CHAMBER
7/DILUENT RESERVOIR 稀释液储液罐排空
4。CONCENTRATED CLEANING浓缩清洗。
4）MECHANICAL SYSTEM机械系统
1。INITIALIZATION 初始化
2。CHECK MOTORS 检查马达
1/SAMPLINGNEEDLE 样品针纵向移动马达
2/CARRIAGE 样品针横向移动马达
3/SAMPLING SYR.样品针注塞泵马达
4/DRAINING SYR.排空/废液注塞泵马达
5/COUNTING SYR.计数注塞泵马达（提供WBC/BAS/RBC/PLT计数负压）
6/CYTOMETER SYR.鞘流注塞泵马达
7/DILUTION SYR.液体分配泵马达
3。CHECK VALVES 检查电磁阀
1/1TO11 1到11号电磁阀检查
2/12TO16 12到16号电磁阀检查
3/17TO18 17到18号电磁阀检查
4/20TO26 20到26号电磁阀检查
5/27TO31 27到31号电磁阀检查
4。MAINTENANCE CARRIAGE POSITION 采样针横向移动位置检查
5）TECHNICIAN 维修（密码1224）
5、SETUP 设定
1）DATE/TIME 日期和时间
1。DAYE FOEMAT 日期格式
1/DD/MM/YY 日/月/年
2/MM/DD/YY 月/日/年/
3/ YY/MM/DD 年/月/日
2。SET DATE/TIME 设定日期和时间
2）UNITS 单位
1。STANDARD 标准
2。S.I. 国际标准
3。MMOL 毫摩尔
3）LAB.LIMITS 试验范围
1。NORMAL RANGE 标准范围
1/CBC
2/DIFF
2。PANIC RANGES 非正常范围
1/CBC
2/DIFF
3。FLAG SENSITIVITY 提示灵敏度
4。THRESHOLDS 阀值，界标线调整
4）RS232串行输出
1。RS232 CONFIGURATION RS232配置
2。SENDING CONFIGRATION 发送配置信息
3。ABX FORMAT 数据格式
1/NUMBER RESULTER 数据结果
2/FLAGES&PATHOLOGIES 提示和病理推断
3/HISTOGRAMS&THRESHOLDS 图形和阀值
4/PATIENT FILE 患者文件
5/RAW DATA 原始数据格式
4。SEND LATEST RESULT 发送最后测试结果
5）PRINTER 打印
1。PRINTER CONFIGURATION 打印机器配置
2。PRINT LATEST RESULT 打印最后测试结果
6）OTHER 其他
1。CALIBRATION 定标
1/CV% LIMITS 精度范围
2/DEFINE OPERATOR 操作定义
2。IDENTIFICATION MODE 鉴别模式
3。AUTOCLEAN FREQUENCY 自动清洗频率
4。CHANGE PASSWORD 改变密码
5。LANGUAGE 语言选择
1/ENGLISH 英语
2/FRENCH 法语
3/GERMAN 德语
4/SPANISH 西班牙语
5/ITALIAN 意大利语
6/PORTUGUESE葡萄牙语
6。 REAGENT CAPACITIES试剂容量
7。CYCLES# 测试计数
8。COMFIGURATION 配置
9。WBC BALANCE WBC平衡调整
七、日常保养：
1、每日用浓缩清洗剂浓缩清洗5个池子，不要用84或次氯酸盐，浓缩清洗剂价格虽贵，但效果好没有副作用，对五分类的机器来说还是值得的。
2、对于试剂要严格检查，正常人的结果数值后面是很干净的，没有提示，报警符号，如果大量出现，就要考虑更换一种或全部的试剂。
3、baso试剂和eo试剂在使用半年后需要进行一次清洗，试剂插入管需要仔细清洗内壁，由试剂插入管到计数池的管道要全部更换，这样做维护成本仅仅几百元而已，但是可以有效的防止wbc本底高，不分类或者分类不好的情况。
[此贴子已经被作者于2005-9-20 20:31:11编辑过]
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