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[转发]关于测定出现负值的问题!

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郑振寰 发表于 2006-11-7 01:12 | 显示全部楼层 |阅读模式

大家总会提出为什么测定会出现负值的问题,我从仪器角度解释一下测定数据是如何计算出来的,如果大家能熟悉这一计算过程,对于出 现负值的原因查找会有帮助。咱就以2点终点法为例子吧

首先是吸光度度的计算,下图给出的是一个尿酸标本测定曲线,其中黑色圈内的测光点是我们计算用的,分别是15点与16点的吸光度 均值A1、33点与34点的吸光度均值A2。其公式为

A=A2 - K * A1

其中K为液量修正系数,其计算方法为

K= (S + R1)/ (S + R1 + R2) S是标本量、R1、R2分别是试剂一、二的量

这时我们得到吸光度A值后,开始浓度的计算

浓度C =[K * ( A — B) + C1]* IFA + IFB

其中B是S1ABS吸光度,也就是空白或第一标准液的吸光度,

C1是空白或是第一标准液浓度,

K是K系数,也就是下图中所做标准曲线的斜率(图中已标出)

IFA、IFB都是仪器常数,在一般情况下IFA=1,IFB=0,C1=0,所以该公式可以简化成C = K *(A — B)

K系数的计算是通过仪器测定S1(标准液1)、S2(标准液2)的A值以及给定的浓度来计算的。

通过以上计算我们可以知道结果为负值有两个环节可能出现,一是A2—K*A1时,第二是A — B(空白吸光度)时,前一种情况说明试剂质量完全失效,应更换,但是日常出现这样情况非常少见,而第二种情况是最多见的,所以为 什么总是推荐大家每天做空白校正,就是这个原因。每天的试剂都在变化,试剂空白吸光度也在变化,这样既可以预防试剂过期,也可以 减少被测物含量很低的标本出现负值的几率。


[此贴子已经被作者于2006-11-7 8:58:39编辑过]

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 楼主| 郑振寰 发表于 2006-11-7 01:13 | 显示全部楼层

小东版主的这篇帖子要不是我半夜上网还真给漏了.labsky的帖子太多,很快就会沉了。

大家都看看吧,很能说明问题,很有功力的,揭示了大家长久以来的困惑。

schistosoma 发表于 2006-11-14 22:59 | 显示全部楼层

为什么我只能看到前四排???

netgerm 发表于 2006-11-24 09:42 | 显示全部楼层
好复杂,看得不是很明白。
dzq007 发表于 2006-12-27 14:17 | 显示全部楼层
谢谢!斑竹的贴太强了,对老弟很有帮助。
xl888 发表于 2007-1-5 14:05 | 显示全部楼层

好贴!很受启发!!

Da-dragonh77111 发表于 2007-1-5 14:49 | 显示全部楼层

不错不错

lqsong 发表于 2007-1-11 23:53 | 显示全部楼层
不错~~
zhangjuqing 发表于 2007-1-29 00:26 | 显示全部楼层

好贴!

胖子 发表于 2007-1-31 23:35 | 显示全部楼层
看不到图啊
 楼主| 郑振寰 发表于 2007-2-1 08:33 | 显示全部楼层
都奇了怪了,怎么会看不到图呢?
ytzyjhs 发表于 2007-2-1 14:47 | 显示全部楼层

谢谢

fyf9727 发表于 2007-2-7 14:52 | 显示全部楼层

出现负值的原因有几点:1、试剂 过期或者设定参数不正确,第二种的可能性不大,一般通过定标可以校准过来,第一种的也比较好排除,就

是采用替换法,换用新的试剂,但如果整批试剂都出问题就不好排除了,还有一种可能就是试剂样本比量设置太

大,样本比例过小,造成定标系数过大,反应度不足,很容易受到副反应的干扰

2、光路 光源衰减太严重或者光路传输率不够都可能影响到一部分反应,特别是ALT,BUN

3、反应杯 反应杯清洗不干净或者有杂物存在,影响吸光度的稳定

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亮亮维修 发表于 2007-2-14 21:13 | 显示全部楼层
我看不懂啊,惭愧啊。
yangjhsf 发表于 2007-2-26 14:53 | 显示全部楼层
为什么只能看到一部分
 楼主| 郑振寰 发表于 2007-2-26 14:55 | 显示全部楼层
只看到一部分是因为你装的是IE7,这个论坛程序不支持IE7.
hk1197 发表于 2007-2-28 12:09 | 显示全部楼层
好啊!!!
dxt2611505 发表于 2007-2-28 16:05 | 显示全部楼层
不错
binzhou21cn 发表于 2007-4-8 17:45 | 显示全部楼层

在速率法测定中出现负值一般都是仪器测光漂移造成

bigzoom 发表于 2007-4-30 17:46 | 显示全部楼层

这些都是好仪器(所有测量点都参与计算),有一些仪器的空白是在加完试剂没加样本的请况下测的.就更容易出现问题.

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