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项 目	肌酸磷酸激酶（CK）
方 法	DGKC速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂、校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

CK

肌酸磷酸 + ADP ----------- 肌酸 + ATP

HK

ATP + 葡萄糖 --------- 葡萄糖-6-磷酸 + ADP

G6PDH

葡萄糖-6-磷酸 + NADP⁺------------ 6-磷酸葡萄糖酸 + H⁺ + NADPH

NADPH在340nm处有特异吸收，通过测定NADPH生成速率计算出CK活性。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司CK试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=4:1 混合后溶液的浓度
咪唑缓冲液:	100mmol/L PH=6.7
N-乙酰半胱氨酸（NAC）	20mmol/L
EDTA	2mmol/L
NADP	2mmol/L
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH）	>1500U/L
己糖激酶（HK）	>2500U/L
葡萄糖	20mmol/L
肌酸磷酸	30mmol/L
二腺苷-5-磷酸	10umol/L
ADP	2mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂、校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于0.5时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

CK(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；Vt—— 反应液总体积

（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.52%，批间CV<3.21%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

肌酸磷酸激酶浓度为：500U/L时，吸光度变化率ΔA_340nm/min为0.130～0.158。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为1200U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～190U/L。

9．临床意义

肌酸激酶广泛分布于骨胳肌、心肌、脑组织中，肝和红细胞不含此酶。目前在临床上主要用于诊断心肌梗塞。在进行性肌肉营养不良、多发性心肌炎、肌肉损伤、脑膜炎等此酶活性升高。

附录A: 参数

项 目	谷丙转氨酶（ALT）
方 法	IFCC速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂、校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

谷丙转氨酶催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。

ALT

L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 ---------- 丙酮酸 + L-谷氨酸

LDH

NADH + 丙酮酸 + H+---------- L-乳酸 + NAD+

2． 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=5:1 混合后溶液的浓度
R1: Tris缓冲液:	80mmol/L PH=7.8
L-丙氨酸	450mmol/L
LDH	>1200U/L
R2: 起动液
NADH	0.18mmol/L
a-酮戊二酸	18mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂、校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度低于0.8时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为IFCC法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

ALT(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.22%，批间CV<4.21%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

谷丙转氨酶浓度为：300U/L时，吸光度变化率ΔA_340nm/min为0.126～0.154。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:12时，测定上限为600U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～38U/L

9．临床意义

ALT主要存在于组织细胞中，只有极少量释放入血液中，所以血清中此酶活性很低，当这些组织病变时，细胞内的酶大量释放入血液中，使血清中该酶的活性增多。各种肝炎的急性期，肝癌、肝硬化等此酶活性显著增高。

附录A: 参数

项 目	谷丙转氨酶（AST）
方 法	IFCC速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

谷草转氨酶催化L-天冬氨酸的氨基转移与MDH催化的反应偶联，使NADH氧化成NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中的AST的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出AST活性。

AST

L-天冬氨酸 +α-酮戊二酸 ----------- 草酰乙酸 + L-谷氨酸

MDH

NADH + 草酰乙酸 + H+-------------- L-苹果酸 + NAD+

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司AST试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=5:1 混合后溶液的浓度
R1: Tris缓冲液:	80mmol/L PH=7.8
L-天冬氨酸	200mmol/L
LDH	>1.2U/mL
MDH	>0.8U/mL
R2: 起动液
NADH	0.18mmol/L
α-酮戊二酸	12mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度低于0.8时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为IFCC法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

AST(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.34%，批间CV<3.81%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

谷草转氨酶浓度为：300U/L时，吸光度变化率ΔA_340nm/min为0.126～0.154。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:12时，测定上限为600U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～38U/L

9．临床意义

天冬氨酸氨基转氨酶又称谷草转氨酶，它催化L—天门冬氨酸氨基的转移。病毒性肝炎、急性风湿性心肌炎、中毒性肝炎等此酶活性显著增高，AST/ALT比值对鉴别肝脏损害程度和病情变化有重大意义。

附录A: 参数

项 目	肌酸磷酸激酶同功酶（CK-MB）
方 法	DGKC速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂、校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

试剂中加入抑制CK-M的抗体，它能完全抑制CK-M亚基的活性而不影响CK-B亚基的活性，所得结果乘以2即得CK-MB的活性。

CK

肌酸磷酸 + ADP ----------- 肌酸 + ATP

HK

ATP + 葡萄糖 --------- 葡萄糖-6-磷酸 + ADP

G6PDH

葡萄糖-6-磷酸 + NADP⁺------------ 6-磷酸葡萄糖酸 + H⁺ + NADPH

2．本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司CK-MB试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=4:1 混合后溶液的浓度
咪唑缓冲液:	100mmol/L PH=6.7
醋酸镁	10mmoll/L
N-乙烯半胱氨酸（NAC）	20mmol/L
EDTA	2mmol/L
NADP	2mmol/L
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH）	>1500U/L
己糖激酶（HK）	>2500U/L
抑制CK-MM的人抗体	>2000U/L
葡萄糖	20mmol/L
肌酸磷酸	30mmol/L
二腺苷-5-磷酸	10umol/L
AMP	5mmol/L
ADP	2mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的CKMB校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂、校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于0.5时，试剂按照失效处理。

CKMB校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

CK-MB(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.55%，批间CV<4.51%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

肌酸磷酸激酶同功酶浓度为：500U/L时，吸光度变化率ΔA_340nm/min为0.054～0.066。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为1000U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～24U/L

9．临床意义

肌酸激酶同工酶在诊断急性心肌梗塞时有特异性，结合心肌酶图谱，有助于心肌梗塞的诊断。在急性心肌梗塞胸痛发作后，血清CPK－MB上升，24小时达高峰，至48小时消失，若CPK－MB再度上升，提示有心肌梗塞复发。 血清CK-MB测定的最重要意义在于诊断急性心肌梗塞。急性心肌梗塞胸痛发作后4～6小时，病人血清CK-MB先于总活性开始升高，12～36小时达峰值；多在72小时内恢复正常。其最高值达对照组4.9～22倍以上。如果梗塞后3～4天，CK-MB仍持续不降，表明心肌梗塞仍在继续进行，如果已下降的CK-MB再次升高则提示原梗塞部位病变扩展或有新的梗塞病灶；如果胸痛患者在48小时内尚未出现CK-MB升高，或小于总活性的2%，即可排除急性心肌梗塞的诊断。临床上常以CK-MB超过CK总活性的3%（离子交换柱层析法）或10%（免疫抑制法）作为急性心肌梗塞的诊断依据。用CK-MB诊断急性心肌梗塞时必须注意无论是CK-MB的绝对活性或占总活性百分率的界限值，均不适用于14岁以下的儿童，因为婴幼儿和儿童的CK-MB均高于成人。各种类型的心脏手术后可引起血清CK-MB活性增强，在并发术间或术后心肌梗塞时升高更为显著。进行性肌营养不良病人血清CK-MB亦升高。

附录A: 参数

项 目	γ谷氨酰转肽酶（GGT）
方 法	速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

r-谷氨酰对硝基苯胺和双甘肽在r-谷氨酰转肽酶作用下，生成对硝基苯胺及r-谷氨酰双甘肽，所释放出的对硝基苯胺与r-谷氨酰转肽酶活力成正比，通过在405nm处测定对硝基苯胺的变化，可求出r-谷氨酰转肽酶活力。

r-GT

r-谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺 + 双甘肽 ------------ 对硝基苯胺 + r-谷氨酰双甘肽+

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司GGT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=5:1 混合后溶液的浓度
R1: Tris缓冲液:	100mmol/L PH=8.25
甘氨酰甘氨酸	150mmoll/L
稳定剂
R2: 起动液
r-谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺	2.9mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于1.2时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

GGT(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.81%，批间CV<3.05%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

r-谷氨酰转肽酶浓度为：300U/L时，吸光度变化率ΔA_340nm/min为0.126～0.154。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:24时，测定上限为500U/L。

7.5 特异性：

该方法测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

男：11～49U/L；女：7～32 U/L。

9．临床意义

r-谷氨酰转肽酶是一种肽移换酶，它催化谷胱甘肽或其它含谷氨酰基多肽上的谷氨酰基团转移到其它合适受体上。血清中r-GT(亦称为GGT)主要来自肝脏，因此各种肝胆系统疾病可引起血清中r-GT活力的增高。

附录A: 参数

项 目	胆碱酯酶（CHE）
方 法	速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂、校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

胆碱酯酶

丁酰硫代胆碱 + H₂O ------------------- 硫代胆碱 + 丁酸根

硫代胆碱 + DTNB ---------5-硫代-2-硝基苯甲酸

DTNB = 5,5-二硫代-2-硝基苯甲酸

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司CHE试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	溶液的终浓度
R1：缓冲液	PH=7.6 0.02mol/L
DTNB	0.25mol/L
R2：
丁酰硫代胆碱	6mmol/L

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂、校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于0.3时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长480nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

ALT(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.25%，批间CV<3.21%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

胆碱酯酶浓度为：300U/L时，吸光度变化率ΔA_480nm/min为0.126～0.154。

7.4 可报告范围：

血清与胆碱酯酶试剂用量之比为1:100时，测定上限为18000U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

4000～11000U/L。

9．临床意义

胆碱酯酶测定试剂盒用于定量测定人体血清中胆碱酯酶的活性。

胆碱酯酶(CHE)可用于有机磷杀虫剂和战争毒剂急慢性中毒的诊断。在病情严重的肝炎患者中，约有五分之四的病人胆碱酯酶降低至正常的60%，危重病人可降至正常的10%以内，甚至完全缺乏。另外，慢性活动型肝炎、肝硬化均可导致胆碱酯酶活力下降。

附录A: 参数

项 目	碱性磷酸酶（ALP）
方 法	SFBC速率法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂、校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

无色的对硝基苯磷酸二钠在碱性磷酸酶的作用下，生成在405nm处有特异吸收的淡黄色对硝基苯酚。通过测定在405nm处吸光度的变化速率来计算ALP的活性。

碱性磷酸酶

对硝基苯磷酸二钠 + H₂O ----------------- 对硝基苯酚 + H₃PO₄

2．本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ALP试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=5:1 混合后溶液的浓度
R1: 缓冲液	PH=10.2
2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）	1.0mol/L
氯化镁	0.5mmol/L
R2: 起动液
对硝基苯磷酸二钠	10mmol/L

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂、校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当应用试剂空白吸光度高于0.7时，试剂按照失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为SFBC法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA/min×Vt×1000

ALP(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F

e×Vs×d

式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数；

Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）；

1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 0.22%，批间CV< 3.4%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

碱性磷酸酶浓度为：400U/L时，吸光度变化率ΔA_405nm/min为0.108～0.132。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:60时，测定上限为800U/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

40～150U/L。

9．临床意义

碱性磷酸酶测定试剂用于定量测定人体血清中碱性磷酸酶的活性。

碱性磷酸酶(ALP)几乎存在于人体的各个组织中。正常人血清中的ALP主要来自骨骼，由成骨细胞产生。故骨骼疾病，特别是当有新骨质生成时和正在生长的儿童期，血液内的ALP活性增高。因为酶由肝脏排泄，且有部分酶来自肝脏，故肝胆疾病特别是胆道堵塞时ALP活性增高。

附录A: 参数

项 目	直胆红素(DBIL)
方 法	钒酸盐氧化法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

钒酸盐

胆红素 ———— 胆绿素

pH 3.0

测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆多主张用EDTANa₂（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司DBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	浓度
R1：
柠檬酸缓冲液	100mM
表面活性剂
R2：
磷酸缓冲液	10mM
偏钒酸钠

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长450nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA_测定

C = ———— × C₀

ΔA_标准

式中：c—— 测定血清中直接胆红素浓度，μmol/L；

ΔA_测定—— 标本管吸光度；

ΔA_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中直接胆红素浓度，μmol/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 1.12％, 批间CV< 3.12％。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

直接胆红素浓度为：20μmol/L时，显色吸光度A_450nm为0.158～0.194。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为430μmol /L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～6.8μmol /L

9．临床意义

胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

直接胆红素是红肝细胞代谢后生成，经胆道系统随胆汁一起排泄。由于各种原因引起的肝内阻塞及肝外阻塞，使胆汁排泄途径受阻或排泄不畅，致使胆汁淤积，肝胆管的内压逐渐升高，导致毛细胆管破裂，直接胆红素经淋巴间隙或血窦进入血液循环，使血中直接胆红素升高。直接胆红素升高于阻塞性黄疸、如胆石症、肝癌、胰头癌等。

附录A: 参数

项 目	直胆红素(DBIL)
方 法	重氮盐法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

对氨基苯磺酸 + HCl + NaNO2 --------- 氯化重氮苯磺酸 + NaCl

胆红素 + 氯化重氮苯磺酸-------偶氮胆红素

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆多主张用EDTANa₂（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司DBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	混合后初始浓度
R1：
对氨基苯磺酸	32mmol/L
盐酸	165mmol/L
R2：
亚硝酸钠	60mmol/L

标准液： 64.5umol/L (3.75mg/dL)

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长630nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

A标本

直接胆红素浓度 = ---------------- ×标准液浓度

A标准

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< #％, 批间CV< #％。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

直接胆红素浓度为：20μmol/L时，显色吸光度A_450nm为0.158～0.194。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为340μmol /L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～8.6μmol /L

9．临床意义

胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

直接胆红素是红肝细胞代谢后生成，经胆道系统随胆汁一起排泄。由于各种原因引起的肝内阻塞及肝外阻塞，使胆汁排泄途径受阻或排泄不畅，致使胆汁淤积，肝胆管的内压逐渐升高，导致毛细胆管破裂，直接胆红素经淋巴间隙或血窦进入血液循环，使血中直接胆红素升高。直接胆红素升高于阻塞性黄疸、如胆石症、肝癌、胰头癌等。

附录A: 参数

项 目	总胆红素(TBIL)
方 法	钒酸盐氧化法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

钒酸盐 测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。

胆红素 ———— 胆绿素

pH 3.0

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆多主张用EDTANa₂（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	浓度
R1：
柠檬酸缓冲液	100mM
反应促进剂
表面活性剂
R2：
磷酸缓冲液	10mM
偏钒酸钠

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1、R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长450nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA_测定

C = ———— × C₀

ΔA_标准

式中：c—— 测定总胆红素浓度，μmol/L；

ΔA_测定—— 标本管吸光度；

ΔA_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中总胆红素浓度，μmol/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 0.67%，批间CV<2.97％。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

总胆红素浓度为：90μmol/L时，显色吸光度A_450nm为0.272～0.332。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为680μmol /L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。

8．参考值

2.0～20.4μmol /L。

9．临床意义

胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

附录A: 参数

项 目	葡萄糖（GLU）
方 法	葡萄糖氧化酶终点法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

在葡萄糖氧化酶的作用下，β-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和葡萄糖酸。过氧化氢在过氧化物酶的存在下与苯酚、4-氨基安替比林氧化缩合成红色醌式染料。此染料在500nm处有最大吸收峰，其吸光度值与葡萄糖含量成正比。

GOD

β-D-葡萄糖 + H₂O + O₂ ----------- H₂O₂ + D-葡萄糖酸

POD

H₂O₂ + 4-氨基安替比林 + 苯酚 ---------- 醌亚胺（红色）+ H₂O

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。常用药物中可致血糖增高的有以下几类。
　　糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对葡萄糖的作用，因而血糖升高。如果大剂量或长期使用糖皮质激素治疗，应密切监测血糖，根据情况适当减少剂量或配合降糖药物应用。
　　甲状腺制剂：甲状腺激素（甲碘胺、甲状腺素、甲状腺球蛋白），可以促进葡萄糖的吸收，加速糖元分解及糖异生，使血糖增高。因而应用甲状腺制剂时应严密观察，特别是糖尿病病人需用甲状腺制剂时应慎重给药。
　　肾上腺素：肾上腺素可动员肝及肌肉的糖元分解，使血糖升高。一般来说，肾上腺素及拟肾上腺素制剂很少会长时间就用，所以对血糖的影响不大。
　　利尿剂：噻唪类利尿剂长时间应用，可使病人的糖耐量降低而升高血糖，可能是抑制胰岛素分泌或使糖元分解的缘故。噻唪类利尿剂致高血糖大多出现在用药2-3个月后，停药能自行恢复。
　　避孕药：包括雌激素与黄体酮样衍生物，这些药物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育龄妇女，不能服用这些避孕药。
　　异烟肼：异烟肼是抗结核病的一线药物，治疗结核病时用药期至少在半年以上。长期用异烟肼可影响糖代谢，使糖耐量降低，因此在用药期间应定期检查血糖并采取相应措施。当糖尿病合并肺结核时，异烟肼忌与磺脲类降糖药合用，否则可能产生不可逆糖尿病。
　　其它：如烟酸及其衍生物、吩噻嗪类药物、生长素、促肾上腺皮质激素、双香豆素、去甲基麻黄碱等药物，均有增高血糖浓度的作用，使用时应注意监测血糖，避免引起高血糖或糖尿。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司GLU试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：

组 成	浓 度
磷酸盐缓冲液	0.1mmol/L PH=7.5
葡萄糖氧化酶（GOD）	>15u/mL
过氧化物酶 （POD）	>1.5U/mL
变旋酶	>2.0U/mL
4--氨基安替比林	0.25mmol/L
苯酚	0.75mmol/L
稳定剂

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为无色至浅粉色，当试剂变色或者在546nm的吸光度高于0.15ABS，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长500nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

A_测定

C = ———— × C₀

A_标准

式中：c—— 测定葡萄糖浓度，g/L；

A_测定—— 标本管吸光度；

A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清葡萄糖浓度，g/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 0.25%，批间CV< 1.87%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

葡萄糖浓度为：10mmol/L时，显色吸光度为0.558～0.660。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为27.8mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸80mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

4.16~6.44mmol/L。

临床意义

血糖(英文名称: glucose)测定试剂盒用于定量测定血清中葡萄糖的含量。

葡萄糖是存在于人体血液中最主要的碳水化合物，葡萄糖浓度的测定常用于内分泌功能的检查。血糖增高常见于甲状腺机能亢进、糖尿病等；血糖降低常见于胰岛素增多症、胰腺癌等。

附录A: 参数

项 目	葡萄糖（GLU）
方 法	己糖激酶终点法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

在己糖激酶的作用下，葡萄糖与ATP反应生成ADP和葡萄糖-6-磷酸。在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下，葡萄糖-6-磷酸与NAD⁺反应生成NADH和6-磷酸葡萄糖。NADH在340nm处有最大吸收，通过测定NADH的生成量与同样处理的葡萄糖标准比较，可计算出血清中葡萄糖的含量。

HK

葡萄糖 + ATP --------- ADP + D-葡萄糖-6-磷酸

G6PDH

葡萄糖-6-磷酸 + NAD⁺ --------------- 6-磷酸葡萄糖酸 + NADH

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。常用药物中可致血糖增高的有以下几类。
　　糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对葡萄糖的作用，因而血糖升高。如果大剂量或长期使用糖皮质激素治疗，应密切监测血糖，根据情况适当减少剂量或配合降糖药物应用。
　　甲状腺制剂：甲状腺激素（甲碘胺、甲状腺素、甲状腺球蛋白），可以促进葡萄糖的吸收，加速糖元分解及糖异生，使血糖增高。因而应用甲状腺制剂时应严密观察，特别是糖尿病病人需用甲状腺制剂时应慎重给药。
　　肾上腺素：肾上腺素可动员肝及肌肉的糖元分解，使血糖升高。一般来说，肾上腺素及拟肾上腺素制剂很少会长时间就用，所以对血糖的影响不大。
　　利尿剂：噻唪类利尿剂长时间应用，可使病人的糖耐量降低而升高血糖，可能是抑制胰岛素分泌或使糖元分解的缘故。噻唪类利尿剂致高血糖大多出现在用药2-3个月后，停药能自行恢复。
　　避孕药：包括雌激素与黄体酮样衍生物，这些药物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育龄妇女，不能服用这些避孕药。
　　异烟肼：异烟肼是抗结核病的一线药物，治疗结核病时用药期至少在半年以上。长期用异烟肼可影响糖代谢，使糖耐量降低，因此在用药期间应定期检查血糖并采取相应措施。当糖尿病合并肺结核时，异烟肼忌与磺脲类降糖药合用，否则可能产生不可逆糖尿病。
　　其它：如烟酸及其衍生物、吩噻嗪类药物、生长素、促肾上腺皮质激素、双香豆素、去甲基麻黄碱等药物，均有增高血糖浓度的作用，使用时应注意监测血糖，避免引起高血糖或糖尿。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司GLU试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：

组 成	R1:R2=5:1混合后浓度
缓冲液	100mmol/L PH=7.6
己糖激酶（HK）	>100U/ml
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶	>300 U/ml
ATP	4.0mmol/L
NAD+	3.0mmol/L
叠氮钠	0.09%

葡萄糖标准液 5.55mmol/L( 100mg/dl)

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为无色至浅粉色，当试剂变色或者在546NM的吸光度高于0.15ABS，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

A_测定

C = ———— × C₀

A_标准

式中：c—— 测定葡萄糖浓度，g/L；

A_测定—— 标本管吸光度；

A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清葡萄糖浓度，g/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 1.1%，批间CV< 2.8%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

葡萄糖浓度为：10mmol/L时，显色吸光度为0.558～0.660。

7.4 可报告范围：

血清与试剂R1、R2用量之比为1:100:20时，测定上限为38.9mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸80mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

4.16-6.44mmol/L。

临床意义

血糖(英文名称: glucose)测定试剂盒用于定量测定血清中葡萄糖的含量。

葡萄糖是存在于人体血液中最主要的碳水化合物，葡萄糖浓度的测定常用于内分泌功能的检查。血糖增高常见于甲状腺机能亢进、糖尿病等；血糖降低常见于胰岛素增多症、胰腺癌等。

附录A: 参数

项 目	甘油三酯（TG）
方 法	GPO-PAP法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

2.2 静脉采血：。

2.3 抗凝剂：

2.4 标本处理：

3．试剂

3.1 试剂：

3.2校准血清：

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

4．仪器

5．操作

6．计算

7．操作性能

7.1 精密度：

7.2 准确度：

7.3 灵敏度：

7.4 可报告范围：

7.5 特异性：

7.6 干扰：

8．参考值

9．临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

脂肪酶

甘油三酯 + H₂O------------ 甘油+ 酯肪酸

甘油激酶

甘油 + ATP ------------------- 甘油-3-磷酸 + ADP

甘油磷酸氧化酶

甘油-3-磷酸 + O₂ --------------------- 磷酸二羟丙酮 + H₂O₂

过氧化物酶

H₂O₂ + 4-氨基安替比林 + 对氯苯酚 ----------------- 醌染料 + H₂O

醌染料在500nm有最大吸收，颜色的强度与血清中甘油三酯含量成正比。

3. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：本科适用湖南永和阳光科技有限责任公司TG试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：

组 成	浓 度
缓冲液	40mmol/L PH=7.0
4-氨基安替比林	0.25mmol/L
酯肪酶	>150U/L
甘油激酶	>0.4U/ml
甘油磷酸氧化酶	>1.5U/ml
ATP	1mmol/L
叠氮钠	0.05%
过氧化物酶	>5000U/L
对氯苯酚	25mmol/L
稳定剂

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为无色至浅粉色，当试剂变色或者在546nm的吸光度高于0.15ABS，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长500nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算 A_测定

C = ———— × C₀

A_标准

式中：c—— 测定血清甘油三酯浓度，mmol/L；

A_测定—— 标本管吸光度；

A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中甘油三酯浓度，mmol/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.56%，批间CV<1.45%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

甘油三酯为2mmol/L时, 显色吸光度A_520nm为：0.141-0.186。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为11.4mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸200mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

<1.71mmol/L（150mg/dl）

9．临床意义

人体各种组织广泛分布着甘油三酯，占全身89%以上的甘油三酯储存在脂肪组织中。原发性或继发性高脂蛋白血症、动脉粥样硬化、糖尿病以及肾病综合症等，可使血清甘油三酯含量增高。原发性脂蛋白缺乏症，甲状腺机能亢进、肾上腺机能不全以及消化吸收不良等，则血清中甘油三酯含量降低。

附录A: 参数

项 目	总胆固醇（TCH）
方 法	终点法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

2.2 静脉采血：。

2.3 抗凝剂：

2.4 标本处理：

3．试剂

3.1 试剂：

3.2校准血清：

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

4．仪器

5．操作

6．计算

7．操作性能

7.1 精密度：

7.2 准确度：

7.3 灵敏度：

7.4 可报告范围：

7.5 特异性：

7.6 干扰：

8．参考值

9．临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

酯化的胆固醇经酶水解后，经胆固醇氧化酶氧化，所产生的H₂O₂与 4-氨基安替

比林和苯酚反应生成醌亚胺。醌亚胺在520nm 有特异吸收，反应产生的颜色与

胆固醇含量成正比。

胆固醇酯酶

胆固醇酯 + H₂O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇氧化酶

胆固醇 + O₂ ------------------- 胆淄烯酮 + H₂O₂

过氧化物酶

H₂O₂ + 4-氨基安替比林 + 苯酚 ----------------- 醌亚胺 + H₂O

3. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：本科适用湖南永和阳光科技有限责任公司TCH试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：

组 成	浓 度
缓冲液	30mmol/L pH=6.5±0.2
4-氨基安替比林	0.25mmol/L
胆固醇酯酶	>150U/L
胆固醇氧化酶	>100U/L
过氧化物酶	>5000U/L
苯酚	25mmol/L
叠氮钠	<0.01%

胆固醇标准液 200mg/dL (5.17mmol/L )

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为无色至浅红色透明，当试剂变色或者在546NM的吸光度高于0.15ABS，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长520nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

A_测定

C = ———— × C₀

A_标准

式中：c—— 测定血清总胆固醇浓度，mmol/L；

A_测定—— 标本管吸光度；

A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中总胆固醇浓度，mmol/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<0.56%，批间CV<2.31%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

总胆固醇为2mmol/L时, 显色吸光度A_520nm为：0.141-0.186。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为19.3mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸200mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

<5.17mmol/L（200mg/dl）

9．临床意义

检测血清中胆固醇的含量，主要用于辅助诊断高血脂症。胆固醇的含量和动脉

粥样硬化有一定关联。

附录A: 参数

项 目	载脂蛋白A1（APOA1）
方 法	免疫比浊法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

APO A-1与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。通过测定标准品，建立一个吸光度对APO A-1浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APO A-1浓度。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOA1试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	混合后的浓度
R1: 聚乙二醇	<4%
氯化钠	106mmol/L
Tris/HCL 缓冲液	15mmol/L
R2: 抗人APO A-1抗体
表面活性剂

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

项血脂类标准液或APOA/B标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，2-8℃储存可稳定一周，参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

△A_测定

C = ———— × C₀

△A_标准

式中：c—— 测定血清载脂蛋白A1浓度，g/L；

△A_测定—— 标本管吸光度；

△A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中载脂蛋白浓度，g /L；

△A ＝A2－A1

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 1.78，批间CV< 3.65。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

载脂蛋白A1浓度为：1.1g/L时，浊度吸光度A340nm约1.151~1.256。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为2:260:65时，测定上限为2.4g/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

1.2-1.8 g/L

9．临床意义

载脂蛋白A1 测定试剂盒用于定量测定血清中载脂蛋白A1的含量。

ApoA可分为ApoAⅠ，AⅡ, AⅣ。ApoAⅠ和AⅡ大部分分布在HDL中，是HDL的主要载脂蛋白。

ApoAⅠ主要存在于HDL中，在HDL₃中ApoAⅠ占载脂蛋白的65％，在HDL₂中ApoAⅠ占载脂蛋白的62％，在CM、VLDL和LDL中也有少量存在。血浆中呈现β迁移率的一种β-HDL，其内80％为ApoAⅠ。

ApoAⅠ的生理功能有：①组成载脂蛋白并维持其结构的稳定性与完整性。实验表明，纯化的ApoAⅠ在水溶液中可以自发地和脂类结合。用CNBr法将ApoAⅠ裂解成四个肽段，发现仅有羧基末端的肽段可自发和磷脂结合。后来进一步确认这一段是ApoAⅠ224-242段，这一段既可维持双性螺旋的结构，又可以维持和脂质结合所具备的疏水性。②ApoAⅠ可以激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）的活性。已经证实，ApoAⅠ是通过激活LCAT，再催化胆固醇酯化。ApoAⅠ肽段Ⅲ（肽段116-151）是激活作用的中心。③ApoAⅠ可作为HDL受体的配体，含ApoAⅠ脂蛋白可以和转铁蛋白及铜蓝蛋白形成大分子复合物以运输铁和铜离子。

载脂蛋白A1是抗动脉搏粥样硬化的指标，检测血清中载脂蛋白的主要用于诊断冠心病。

附录A: 参数

项 目	载脂蛋白B（APOB）
方 法	免疫比浊法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

APOB与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。通过测定标准品，建立一个吸光度对APO B浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APO B浓度。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOB试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	混合后的浓度
R1: 聚乙二醇	<4%
氯化钠	106mmol/L
Tris/HCL 缓冲液	15mmol/L
R2: 抗人APO B抗体
表面活性剂

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

项血脂类标准液或APOA/B标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，2-8℃储存可稳定一周，参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

△A_测定

C = ———— × C₀

△A_标准

式中：c—— 测定血清载脂蛋白B浓度，g/L；

△A_测定—— 标本管吸光度；

△A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中载脂蛋白浓度，g /L；

△A ＝A2－A1

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 1.32%，批间CV< 3.35。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

载脂蛋白B浓度为：1g/L时，浊度吸光度A340_nm约0.372~0.454 。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为3:250:50时，测定上限为2.24g/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0.6-1.14 g/L

9．临床意义

载脂蛋白B 测定试剂盒用于定量测定血清中载脂蛋白B的含量。

载脂蛋白B是低密度脂蛋白（LDL）的主要成份。APO-B的浓度与动脉硬化相关联，是评价冠心病的有效指标。目前的研究结果表明：冠心病患者一般具有比较低的APO A-1水平和比较高的APO- B水平。

附录A: 参数

项 目	高密度胆固醇（HDL）
方 法	直接测定法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

1. 试剂1使血清中低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。

胆固醇酯酶

胆固醇酯 + H₂O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇氧化酶

胆固醇 + O₂ ------------------------- 胆淄烯酮+ H₂O₂

过氧化氢酶

H₂O₂ ------------------ O₂+H₂O

2. 试剂2中的变性剂释放出高密度脂蛋白后，对HDL进行测量。

胆固醇酯酶

胆固醇酯 + H₂O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇氧化酶

胆固醇 + O₂ ------------------------- 胆淄烯酮+ H₂O₂

过氧化物酶

H₂O₂ + 4-氨基安替比林 + HDAOS -------------------- 醌染料 + 4H₂O

在600nm醌染料的吸光度的与胆固醇的含量相关。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司HDL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	初 始 浓 度
R1：缓冲液	100mmol/L PH 7.0
4-氨基安替比林	1mmol/L
MgCl2	100mM
R2：缓冲液	100mmol/L PH 7.0
HDAOS	1mM
胆固醇脂酶	1KU/L
胆固醇氧化酶	1KU/L
过氧化物酶	4KU/L

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1和R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

HDL/LDL标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长600nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

△A_测定

C = ———— × C₀

△A_标准

式中：c—— 测定血清高密度胆固醇浓度，mmol/L；

△A_测定—— 标本管吸光度；

△A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清中高密度胆固醇浓度，mmol/L；

△A ＝A2－A1

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<1.78%，批间CV< 3.89%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

高密度胆固醇浓度为：2.0mmol/L时，显色吸光度A600_nm约0.219~0.261。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:90:30时，测定上限为3.9mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

大于1.15mmol/L

9．临床意义

高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒用于定量测定血清中高密度脂蛋白的含量。

HDL的作用是将胆固醇运输到肝脏。HDL的含量是评价冠心病的危险度的一个重要因素。血清中HDL－C水平与冠心病发病率呈负相关，HDL－C或HDL－C/TC比值能更好地预测心脑动脉粥样硬化的危险性。HDL－C降低见于以下疾病：（1）脑血管粥样硬化，冠心病。　　（2）急、慢性肝病，心肌梗死、外科手术、损伤等应激反应，糖尿病，甲状腺功能亢进或甲低，慢性贫血。

附录A: 参数

项 目	低密度胆固醇（LDL）
方 法	直接测定法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

1. 试剂1使血清中高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白经化学反应被消除。

胆固醇酯酶

胆固醇酯 + H₂O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇氧化酶

胆固醇 + O₂ ------------------------- 胆淄烯酮+ H₂O₂

过氧化氢酶

H₂O₂ ------------------ O₂ + H₂O

2. 试剂2中的变性剂释放出低密度脂蛋白后，LDL进行以下反应。

胆固醇酯 + H₂O -------------------- 胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇酯酶

胆固醇 + O₂ ------------------------- 胆淄烯酮+ H₂O₂

胆固醇氧化酶

过氧化氢酶

H₂O₂ +4-氨基安替比林+N,N-二甲基间甲苯胺 ----- H₂O₂ +4-氨基安替比林+N,N-二甲基间甲苯胺------------- 醌染料 + 4H₂O

通过在600nm测定醌染料的吸光度，计算出低密度脂蛋白胆固醇的含量。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

肝素或EDTANa₂（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司LDL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成	初 始 浓 度
R1：缓冲液	100mmol/L PH 7.0
4-氨基安替比林	1mmol/L
胆固醇酯酶	800U/L
胆固醇氧化酶	507U/L
过氧化氢酶	800U/L
R2：缓冲液	100mmol/L PH 7.0
N,N-二甲基间甲苯胺	1.2％
过氧化物酶	4KU/L

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1和R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

HDL/LDL标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长600nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

△A_测定

C = ———— × C₀

△A_标准

式中：c—— 测定低密度胆固醇浓度，mmol/L；

△A_测定—— 标本管吸光度；

△A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准血清低密度胆固醇浓度，mmol/L；

△A ＝A2－A1

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 0.25%，批间CV< 0.87%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

低密度胆固醇浓度为：5.0mmol/L时，显色吸光度为0.435～0.531。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:90:30时，测定上限为25.8mmol/L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物为HB1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、Vitc300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

小于3.36mmol/L。

9．临床意义

低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒用于定量测定血清中低密度脂蛋白的含量。

LDL的浓度是诊断冠状动脉硬化的一个重要指标。低密度脂蛋白（LDL）是由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来的。LDL的主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，但主要是运输到肝脏合成胆酸。每种脂蛋白都携带有一定量的胆固醇，但体内携带胆固醇最多的脂蛋白是LDL。体内三分之二的LDL是通过受体介导途径吸收入肝和肝外组织，经代谢而清除的。而余下的三分之一是通过一条“清扫者”通路而被清除的，在这一非受体通路中，巨噬细胞与LDL结合，吸收LDL中的胆固醇，这样胆固醇就留在细胞内，变成“泡沫”细胞。因此，LDL能够进人动脉壁细胞，并带人胆固醇。故LDL水平过高能致动脉粥样硬化，使个体处于易患冠心病的危险中。

附录A: 参数

项 目	类风湿因子RF
方 法	免疫比浊法

目 录

1．检测原理

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3．试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4．仪器

5．操作

6．计算

7．操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8．参考值

9．临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

340nm

样本中RF+ 试剂中的RF抗体 -----------------大分子免疫复合物

在340nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中RF含量成正比。

1. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

不使用抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

R1：磷酸盐缓冲液（pH7.4）；50mmol/L。

含0.095%的叠氮化钠。

R2：RF抗体试剂

抗人IgG抗体。含0.095%的叠氮化钠。

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

计算吸光度的差值（OD2－OD1），并建立标准液吸光度－浓度工作曲线。

计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 3.03%，批间CV< 4.80%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

RF浓度为58 U/mL时，吸光度A_340nm约为0.0614。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为15:200:40时，测定范围为0～300 U/mL。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

0～50 U/mL

9．临床意义

类风湿因子（RF）是对抗人体IgG（免疫球蛋白G）的自动抗体，其在血清中的高浓度常见于类风湿性关节炎。RF是用以描述能与人体IgG和动物源IgG反应的抗体（大多为IgM（免疫球蛋白M）类型）的术语。

附录A: 参数

项 目	抗链球菌溶血素O（ASO）
方 法	免疫比浊法

目 录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3．试剂

3.1 试剂

3.2校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4．仪器

5．操作

6．计算

7．操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8．参考值

9．临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

660nm

样本中ASO + 包被SLO的胶乳 -----------------大分子免疫复合物

在660nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中ASO效价成正比。

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

最好不要使用血浆检测，不使用抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ASO试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组 成
R1：缓冲液	200mmol/L（PH=8.6）
叠氮钠	0.09%
R2：包被SLO的胶乳	2.5mg/dL
叠氮钠	0.09%

3.2：校准血清

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色或出现沉淀，按照试剂失效处理。

多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长660nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清。本法为两点速率法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

A_测定

C = ———— × C₀

A_标准

式中：c—— 测定血清ASO滴度，IU/mL；

A_测定—— 标本管吸光度；

A_标准—— 标准管吸光度；

C_O—— 校准液中ASO滴度，IU/mL；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 3.10%，批间CV< 4.83%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

ASO滴度为：124U/mL时，比色吸光度变化率A_660nm约0.006-0.007/分钟。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为3:250:50时，测定上限为900IU/mL。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。

8．参考值

成人：0-180IU/mL，儿童0-250IU/mL。

9．临床意义

链球菌溶血素O（SLO）是链球菌的一种胞外产物，它能溶解细胞膜从而导致溶血。抗链球菌溶血素（ASO）是SLO 的抗体。ASO测试能为早期的链球菌所导致的感染提供证据，主要应用于急性风湿热、链球菌感染后的血管球性肾炎、患有咽炎的个人以及其它急性感染。

通常，与抗原对应的抗体在急性链球菌感染后三周左右达到峰值，并保持在峰值水平3 - 4个月，然后逐渐降低到正常水平。

附录A: 参数