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活化部分凝血活酶时间(APT T) (鞣花酸)
[检测原理]
待测血浆加入部分凝血活酶溶液,存ca+参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)。APTT
测定足内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验,也可作为内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Ⅷ因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因于Ⅷ、Ⅸ、ⅪⅫ和前肽释放酶的测定。同时,APTT测定可用于肝素治疗监控。本试剂盒是用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间测定。
[试剂盒组成及主要成份]
1.APTT(鞣化酸)试剂:10瓶
(内含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂)
2 0.025 mol/I CaCl2:1瓶
(内含氯化钙、防腐剂)
[规格]1 5m1
[样本采集与保存]
静脉采血,置于含有1/1体积0.109mol/L,枸橼酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份个血)的塑料管或硅化玻璃管内,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。样本在不同条件下可保存时间如下:
-80℃保存,小宜超过30天。-20℃保存,不宜超过14天。2~8℃保存,不宜超过6小时。22~24℃保存,不宜超过2小时测定。
[使用方法]
l、试剂使用前请振摇均匀。
2、半自动血凝仪、于工测定
(1)取待测血浆(正常质控血浆或正常混合血浆)0.1ml,加入37℃预温APTT试剂0.1ml,37℃孵育5min。
(2)加入37℃预温0.025 mol/CaCL2溶液0 .1mL,记录凝固时问。
3、全自动血凝仪测定
请按仪器提供的参数操作。
[适用仪器] 血凝仪
[正常值] 22~38秒
[主要技术指标]重复性:CV≤5%
[注意事项]
1、采血必须使用 次性塑料沣射器或硅化玻璃注射器,贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化。
2、采血时止血带不口束缚过紧,并不应赳过5分钟,否则导致凝血及纤溶冈子活化。
3、样本内若有残留细胞,经冻融细胞膜可破坏而影响结果。
4、样本暴露于空气中可使PH值升高,因此若不能立即测定,应将样本加塞保存。
5、-80℃及-20℃保存样本,测定时37℃迅速融化,不可反复冻融。
6、实验材料不能有去污剂存在。
7、样本采集避免浒血及组织液污染。
8、血液应立即加抗凝剂,血浆制备必须及时,血浆分离应尽量去除血小板。血浆分离后应尽快测定。
9 、APTT(鞣花酸)试剂预温不可超过15分钟。半自动血凝仪测定时,预温试剂应按每天实际使用量量取预热,末用完的预热试剂应弃用。
10、用浊度法测定终点的自动化凝血仪,溶血和较明显的黄疸及脂血会影响测定结果,此时宜用手工法或电了机械式凝血仪测定。
11、红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。抗凝剂体积(ml)=0.001 85×血液体积(m1)×(100一比容)。
12、建议各实验审建立自己的参考值范围。
13.待测血浆不宜使用EDTA·Na2、肝素、草酸盐抗凝,应使用0.109mol/L,枸橼酸钠抗凝。
14、口服避孕药、雌激素、妊娠、香豆索类药物、肝素、天冬酰胺酶、纳络酮可影响APTT。
15.、APTT(鞣花酸)试剂与血浆温育时间不宜少于5min。
16、手T操作时,光线要充足,活化部分凝血活酶时间的终点计算以出现混浊的初期凝固为准。
17、测定温度36.5~3 8.5℃,过低或过高温度均使APTT延长
18 、APTT(鞣花酸)试剂应于2~8℃保存,清勿冻结。
19、APTT(鞣花酸)试剂长期保存后可能会形成黄色沉淀,用前请振摇均匀。
[贮存方法] 2~8℃保存,有效期十五个月
[临床意义]
APTT延长:见于凝血因子II、V、Ⅷ、IX、XI、Ⅻ减低,纤维蛋门原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在(如血内肝索含星增加及口服抗凝剂),是监控肝素
治疗的重要指标。
APTT缩短:见于高凝状态,血栓性疾病,如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合症等 |