全血HLA-B27测定标准操作规程

全血HLA-B27测定标准操作规程 美国BD公司的HLA-B27 Kit 1、抗体标记 1.1 取FALCON管一支，加荧光抗体20μl，再加摇匀的抗凝全血标本100μl，涡旋振荡数 秒； 1.2 避光室温放置20分钟； 1.3 FALCON管中加1×溶血素2 ml，涡旋振荡数秒； 1.4 避光室温放置10分钟； 1.5 离心，1000 rpm×5分钟、室温； 1.6 弃上清后加2 ml PBS，涡旋振荡数秒； 1.7 离心，1000 rpm×5分钟、室温； 1.8 弃上清后加0.5ml PBS，准备上机。 2、流式细胞仪分析 2.1从苹果菜单进入，选择HLA-B27软件； 2.2 点击右下角Accept； 2.3 在展示的窗口，在Data Source选择From Cytometer，在Automatic Saving Options，File Name Prefix, View Reports中,操作者的按所需要求进行诸项选择，最后点击Accept； 2.4在展示的窗口，如需进行FACSComp则点击Launch FACSComp，亦可直接进行样本检测则点击Skip FACSComp→Continue； 2.5在展示的窗口，顺序输入样本姓名(Sample Name)，点击Run Tests，得分析结果。 二、全血TBNK淋巴细胞亚群流式分析 美国BD公司的MultiTESTTM IMK Kit 1、标本染色 1.1 取FALCON管2支，分别编号A、B，加对应荧光抗体20ul，再加抗凝全血标本50ul，涡漩振荡数秒； 1.2 避光室温放置20分钟； 1.3 加1×溶血素450 ul，涡旋振荡数秒； 1.4 避光室温放置15分钟； 1.5 24小时内上机检测。 2、流式细胞仪分析 2.1从苹果菜单进入，选择MultiSET软件； 2.2 点击右下角Accept； 2.3 在展示的窗口，在Data Source选择From Cytometer，在Automatic Saving Options，Entry Level File Name Prefix, View Reports中,操作者的按所需要求进行诸项选择，最后点击Accept； 2.4 在展示的窗口，如需进行FACSComp则点击Launch FACSComp，亦可直接进行样本检测则点击Skip FACSComp； 2.5 在展示的窗口，在Physicians Report Choices, Laboratory Report Choices, Summary Report ID, Report Reference Ranges, QC Message For Out OF Normal Range中，操作者的按所需要求进行诸项选择，最后点击Accept； 2.6 在展示的窗口，顺序输入样本姓名和测试项目，选择Calib.LNW作为获取条件；点击Run Tests，得到分析结果。