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[转发]淋巴细胞亚群测定标准操作规程

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郑振寰 发表于 2007-1-30 14:56 | 显示全部楼层 |阅读模式

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1、检验申请

临床医生需认真填写检验申请单。

2、标本采集与处理

2.1 受检者准备:无特殊要求。

2.2 容器准备:洁净干燥试管。

2.3 标本采集:常规静脉采血。

2.4 抗凝剂选择:EDTA抗凝剂。

2.5 标本的标记:送检单和血标本试管上在整个过程中应有统一且唯一的标识符。

2.6 标本保存条件

2.6.1 标本应在24h内进行检测。

2.6.2 已完成测定的标本至少保存7d。

2.7 标本的完整性:如发生标本遗失、原始标本管破裂,均应有完整的说明记录。

2.8 标本的运送/外送

2.8.1 标本的运送必须与检验申请单同时进行。

2.8.2 运送必须包括运送记录,并保存运送记录至少30d。

3、方法原理

特异荧光素连接抗体标记细胞后,受激发照射可得到荧光信号,通过对这类荧光信号的检测和定量分析就能了解所研究细胞参数的存在与定量。

4、试剂及其他用品准备

4.1 试剂盒名称: MultiTESTTM IMK Kit

4.2 试剂盒来源/产品号:美国BD公司试剂/340503

4.3 试剂盒保存:2~8℃保存备用

4.4 试剂盒准备:2~8℃保存备用

4.5 试剂盒主要成分:

CD3/CD8/CD45/CD4抗体

CD3/CD16+CD56/CD45/CD19抗体

FACS(10×)溶血剂

4.6 其他用品准备:溶血剂、PBS、蒸馏水、一次性FALCON管。

6、适用仪器

BD FACSCalibur流式细胞仪 美国BD公司。

7、标本检测步骤

运行FACSComp,调整仪器→加载检测标本→输入患者标本检测项目 → 患者标本测定 → 结果复核 → 报告

8、结果计算

分析仪内部能自动对结果进行定量分析。

9、当校准结果达不到预设标准时的纠正措施

9.1 检查仪器工作是否正常,电压是否正常。

9.2 及时联系维修工程师。

10、 当检验系统(仪器)不能正常工作时应采取的补救措施

10.1 立即报告室主任,及时联系维修工程师。

10.2 联系另一医院具有同类仪器替代使用。

11、 参考值/参考范围及医学决定水平

T T细胞(CD3): 参考值50.0-84.0%

CD3+CD4+: 参考值 27.0-51.0%

CD3+CD8+: 参考值 15.0-44.0%

B细胞(CD19+): 参考值 5.0-18.0%

NK细胞(CD16+/CD56+):参考值 7.0-40.0%

CD4/CD8):参考值 0.71-2.87

每个实验室应根据本地区健康人群建立参考值范围。

12、 临床意义

T淋巴细胞亚群:

CD3:反映细胞免疫功能

CD4/CD8升高:自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、SLE等。

CD4/CD8 降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等。

B淋巴细胞:CD19与机体体液免疫功能有关。

NK淋巴细胞:CD16+56与机体非特异免疫有关。

13、 结果审核以及与相关项目的联系

测定结果必须经过认真审核来确认此检测结果是可靠的,审核通过应有审核者签名。

14、 威胁生命的“紧急值”及报告规定

(尚无)

15、有关引用程序与文件

16、参考文献

仪器操作说明书

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