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一、仪器开/关机程序
1、开机程序
1.1打开电脑,进入桌面。
1.2打开Roche Lightcycler仪器背面的电源开关。
1.3双击桌面上的软件图标,进入软件的主菜单。
1.4 双击“RUN”,进入运行菜单界面,此时仪器会跳出对话框询问是否需要自检(selftest),点击“start selftest”让仪器自检,过两分钟左右,程序会自动跳出对话框“selftest passed”,表明自检通过可以开始实验。
2、关机程序
2.1 保存数据,退出软件的主菜单。
2.2 关掉电脑,关闭Roche Lightcycler仪器背面的电源开关。
二、程序文件的设置
1、实验程序已预先设定
此时只需单击“Open Experiment File”,找到相应的运行程序,打开。
2、创建新的程序文件
2.1 单击“New Experiment”,输入程序文件的名字,选择保存的路径,单击“保存”。2.2 单击屏幕右上方的“Add”和“Remove”,添加和删除程序步骤(program)。
2.3 在每一步骤(program)下,编写所需的温度(Target Temperature)、时间(Incubation Time)、荧光收集模式(Acquisition Mode)、循环数(Cycles)、和分析模式(Analysis Mode)等参数。
2.4 编辑完成后,单击“Save Experiment File”保存。
三、仪器操作程序
1、编辑样本
1.1 单击“Edit Sample”,进入样本编辑界面。
1.2根据实验情况,编辑标本数量(Maxium Position)、标本名称(Sample Name)和标本属性(type)等,标本属性(type)包括未知样本(Unknown),阴性标本(Negative),阳性标本(Positive)以及标准品(Standard),选择标准品(Standard),同时需输入相应浓度。
1.3 完成后,点击“Done”推出。
2、运行
将装有样本的卡盘放入仪器,点击屏幕左下方的“Run”,输入数据文件的名字,单击保存。
3、数据分析
3.1 双击桌面上的软件图标,进入软件的主菜单。
3.2 点击“Data Analysis”,进入数据分析界面,从屏幕左侧的目录树中找到需要分析的数据,单击“Open”打开。
3.3 选择荧光通道“Fluorescene”,点击“Quantification”或“Melt Curve”进行定量或熔点曲线分析。
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