[转发]OLYMPUS AU5400全自动生化分析仪的应用实践与体会

钟兰。林瑜。何芳 作者简介：钟兰(1966—12)．海南省琼海市人，主管检验师。
(海南省人民医院检验科，海南 海口 570311)
关键词LYMPUS AU5400全自动生化分析仪；实践；体会
中图分类号：R446 文献标识码：A
我科于2002年购买了日本OLYMPUS AU5400型全自动生化分析仪，在这四年的使用过程中，我们严格操作和精心保养，该仪器使用效率很高。经不断的实践和摸索，我对该仪器有了更深的认识，并积累了一些操作、维护保养、故障排除等经验，总结如下。
1 保持AU5400全自动生化分析仪的良好工作环境
1)环境温度：18℃～32℃ ，工作中波动小于4±2℃ ．热量11000KJ／U。湿度：40—80％RH，并无冷凝。若室温不稳定，应安装空调。安装场在通风好，仪器不应暴露在流动空气中。
2)避免阳光直射、远离高频电磁波等。
3)给水及排水：仪器使用去离子水，去离子水器安装在距水龙头10M 内，去离子水电阻率大于0．5Mn，用0．5ram 的
过滤网过滤细菌。去离子水及排水孔安装在仪器10M 内．废液管连到医院的传染病处理装置处。
4)AU5400全自动生化分析仪接有效的稳压、不间断电源(UPS)，以防停电造成仪器损坏或数据丢失。有保护性接地线，以防电击和仪器故障。
5)实验室整洁，空间足够，室内无化学腐蚀性试剂，无烟雾和水蒸气。
2 AU5400技术性能评价
1)基本性能：测试速度320o～5000测试／小时，ISE900测试／小时。反应温度37℃ ，可选择波长13种，340～800nm。
2)样品系统：试剂位192个，样品位300个，全反应过程监测，前后自动稀释，最小样本量1．6ul．最小试剂量120ul。
3)分析系统：反应杯为特殊硬质玻璃。反应时间8分20秒，反应总量150～550ul，自动记录质控，自动冲洗，耗水量
平均125升／小时。
3 仪器操作人员
应指定专业技术人员负责仪器的维护工作。操作人员应经过专业培训．具有独立自动生化分析仪的资格能力。熟悉掌握仪器的校准、参数设定、试剂准备、151常维护、常规操作等基本技能㈦。
4 AU5400生化试剂选择和特点
1)试剂有国家标准的生产、销售经营许可证．使用方法符合中华医学会检验分会或美国FDA推荐方法，试剂配方是中华医学检验学会或国际上推荐的配方。
2)系统使用四种规格的试剂瓶：
120ml试剂瓶、60ml试剂瓶、30ml试剂瓶、15ml试剂瓶。当使用15ml或30ml试剂瓶时．必须使用相应的挡板固定试剂
瓶；当使用120ml试剂瓶时，取出试剂瓶之间的挡板，在试剂冰箱内设置120ml试剂瓶时要求两个60ml试剂瓶的宽度。
5 参数设置体会
1)Samle volume and Dilution(样品量和冲洗量)，样品分配量范围1．6～25ul或稀释量1．6～20ul， 冲洗分配量0或
10ul：Reagent R1 vol and Dilution(第1试剂量和稀释量)试剂范围15～250ul或稀释水量0或235ul；ReagentR2v0landDilution (第2试剂量和稀释量)试剂范围15—250ul或稀释水量0或235td．若R2为0，此项不能设置。一般按商品试剂说明书上的推荐量，结合仪器中规定的样品和试剂的最小加样量、加样范围和最小反应总体积按比例进行缩减。足够精密度的情况下．尽可能减少样品的用量．以减少样品中的成分对测定的影响。一般情况下．样品体积占反应总体积的10％。
2)WavelengthPri(主波长)Sec(副波长)。实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。通常选最大吸收峰为主波长，双波长的设定．最好向该试剂厂家索取最为安全，因为不同的双波长测定抗干扰不同。
3)Method(方法学)可设置END终点法、RATE速率法、FIXED 两点法、END1、RATE1、FIXED1。前三种是以试剂为空白．后三种是以比色杯为空白的。
END终点分析法检测的是反应达到平衡时的吸光度值：RATE速率法适用于呈零极反应的酶催化活性浓度的测定，其基本原理是基于恒定期(零级反应期)酶促反应速率和酶催化活性浓度呈正比。
FIXED固定时间法是动态反应期的吸光度变化累加各读点问隔吸光度差值．取吸光度差值的累加值计算结果。
4)Reaction(反应方向)：+，一。END与FIXED法不起作用，但RATE法一定要输入正确。
5)Pointl Fst Lst(测量l，输入光电检测起始点和结束点)；和Point2FstLst(测量2．输入光电检测起始点和结束点)。Pointl为主测定，Point2为辅助测定。终点分析法测定时间的选择应允分考虑到干扰的问题．读点提前，反应达不到平衡，读点缓后，非检测物质反应．干扰物质生成，影响测定值，如溴甲酚绿法检测白蛋白。BCG试剂在PH4．2时．不但能与白蛋白起反应．而且还与血清中多种球蛋白起反应．但白蛋白与BCG的反应是在60秒以内完成的，而其他球蛋白与之反应要在30分钟后才能完成。因此．为使测定结果趋于准确，读数不应超过10分钟测定 ：RATE法对于一种物质的测定．由于选择试剂和分析方法不同．其测定时间也随之变化， 因而对于特定的试剂和分析方法，应先做出反应进程曲线，从曲线上选择最佳的测定时间。如α— L一岩藻糖苷酶(北京九强公司试剂盒)RA TE 法，其始我们按照厂家提供参数设置8—14，检测数据常常出现零或者负值，曲线进程曲折不平，考虑选择读点不是最佳测定时间，经几次的读点试验，我们把读点确定了15～24，现在曲线平滑稳定，零和负值数据也消失了。
6)Linearity(线性范围)不同试剂公司的试剂质量不同，基测定的线性范围也不同。对于酶活性来说，可取一高值样品作倍比稀释，按分析项目的波长、样品量与试剂量、孵育时间测定各管活性浓度，以活性浓度对稀释度作图，在测定线性内的最高浓度为测定线性上限，最低浓度为测定线性下限。对于带标准的其他生化项目的测定，可配置系列浓度的标准液，测定各浓度的吸光度变化绘制标准曲线，同样可以求得测定线性。
6 做好室内质控
在每天的操作中，质控样品的测定数据被贮存下来，进行质控数据的变异检查。
1)进行质控分析申请操作Individual,Requisition。
2)在系统内放置设有质控样品的绿色样品架。
3)进行了质控分析申请后．开始分析，分析操作开始。
4)分析绿色样品架后，检查质控数据有无错误。
5)用【Routine]-[QC Monitor]质控监测菜单检查质控变异图，确定有无异常数据。
7 AU54oo常规性维护
7．1 每R维护
1)检查样本和试剂分配器是否有渗漏。
2)目视检查洗剂原液Detergent B桶内液面是否足够。
3)检查／清洗样本针、试剂针和搅拌棒。
4)检查ISE试剂分配器有否渗漏．自动冲冲样品池和电极通路。
7．2 每周维护
1)手工清洗样本针、试剂针和搅拌棒。
2)进行W2(自动冲洗比色杯、搅拌棒、试剂探针与废液管路)。每周交替使用酸性或碱性洗液作W2(酸性洗液浓度为lmmol／L的盐酸，碱性洗液有效浓度为5％的次氯酸钠)。
3)进行Photoca1(光电校正)。平均值：Men．Check Range：0．030，吸光度差值：Abs．Check range：0．1。常见杯错误有：擦伤检查错误(绿色)；数据分散检查错误(红色)：数据比较检查错误(兰色)
4)清洗样品预稀释瓶。
5)检查ISE电极选择性。
7-3 每月维护
1)清洗样本探针、试剂探针和搅拌棒冲洗池。
2)清洗空气过滤网。
3)清洗去离子水和样品针过滤片。
4)每两个月ISE电极维护，如果电极已经失效，不会得到恰当的分析结果。
每两个月或每2o000个测试量要更换一次最先坏的电极。
7A 每三个月维护
1)清洗冲洗管嘴。
2)清洗离子水桶。
3)更换水机棉芯、活性碳。
4)ISE每三个月维护更换混合物和废液滚动泵管。
7．5 每六个月维护
1)更换光源灯泡。光电数据任意波长100％ 的吸光度超过1．7354或低于0．01时应更换光源灯泡：出现“lampdark”或者项目出现大量“ ’报警标志．反应曲线呈波浪样改变并排除冲洗头堵塞时应更换光源灯泡。更换光源灯泡后，一定要进行光电校正(Photoea1)。
2)清洗比色杯与比色杯轮盘。清洗清洗比色杯与比色杯轮盘后，一定要进行光电校正
7．6 非经常性维护
1)检查比色杯、样品针与试剂针、搅拌棒、冲洗头管、样品和试剂分配器、清洗液蠕动泵、离子水过滤器、样品针过滤
器，如果有出现故障及时更换。
2)ISE非常规性维护。必要时应更换
参比电极；添加参比液；更换相应试剂。
8 AU5400故障排除及应对措施 该仪器常见的报警信息及处理方法分析如下
1)3103 POWER FAILURE DETECTED。
原因：异常关机，启动UPS储备电源，电力检测失败。
处理方法：开主机电源EM／STOP(黄色键)，再按复位开关RESET(~色键)，再分电电源POWER-ON(绿色键)，直到光电校正灯稳定才能开始分析，大约20分钟。
2)3288 R1 REAGENT REF．COVER 0PEN。
原因分析：试剂冰箱盖未完全关闭．或者试剂盘未被固定钉子定位。
处理方法：水平放置试剂盘．对准固定销，按下固定钉，关闭盖子，重新检测试剂
3)2101 REAGENT ID READ ERROR
原因分析：试剂被放错位置。
处理方法：设置合适的试剂瓶。
4)3274 REAGENT SHORT／3275EMPTY。
原因分析：试剂少了／试剂空了。
处理方法：认真检查，补足试剂用量。
5)3202／3202 D1 WATER SH0RT／EM 。
原因分析：去离子水少了／去离子水空了，纯水输出管道堵塞或者纯水机故障。
处理方法：检查纯水机或输出管道工作状态是否正常，必要时找医院维修组。
6)3205／3206 Dl11ERGENT B SHOR11／EMPTY。
原因分析：洗液原液B少了／洗液原液B空了。
处理方法：及时补充清洗原液。
7)3293 REAGENT TRANSPOSI．110N DISABLED。
原因分析：定标时报警未检测到试剂。
处理方法：删除未放置试剂单元的项目或者增加试剂，重新定标。
8)3292 CL0T SAMPLE DETECT
原因分析：样品探针被堵塞．样品包含有较多的纤维和蛋白。
处理方法：弃去纤维或做必要的处理和过滤，检查是否有其他物质混入．用钢丝插入样品探针除去阻塞。
9)3171 RACK DETECTED 0N RACK FEEDER／3173 RACK DETECTED ON RACK BUFFER
原因分析：仪器复位时，轨道中有架子。
处理方法：拿开架子，重新复位即可。
10)4()25 REAGENT REF．TEMPERATURE HIGH。
原因分析：冷冻单元)试剂冰箱温度高”。
处理方法：保留系统背面要求的空间，检查放置系统设备的室温，调节空调温度。也可能是冰箱温度传感坏了，联系
0LYMPUS服务。
l1)3137 RACK CLASS ERR0R。
原因分析：标本架位置不正确．条码标签被污染或损坏。
处理方法：调整标本架的位置．正确的贴上新标签。
12)1 3231 REAGENT PR0BEUP／D0WN ERROR；3221 SAMPLE PR0BEUP／DOWN ERROR
原因分析：试剂臂与样品臂上下抬升和转动障碍。
处理方法：检查试剂瓶位置是否正确，瓶盖是否已经打开：或者取出试剂臂和样品臂，用纱布擦净灰尘，重新涂上滑
润油，安装复位即可。
13)4001 N0 SAMPLE CUP／4002 SAMPLE 0P。
原因分析：已录入试验项目，但标本架相应位置未放待测标本或者待测标本已进入测试位置，但试验项目未录入。
处理方法：认真检查试剂项目录入与待测标本的对应。
14)3262 LAMP DARK。
原因分析：光源不足或者清洗剂吸头被堵塞，反应杯浸水
处理方法：换灯泡或者用提供的鱼丝除去清洗剂吸头阻塞的污染物．如果清洗之后， 问题没有解决． 联系OLYMPUS服务部。
结束语
仪器操作人员应具有高度的责任心，熟悉仪器的特点，遇到问题认真分析并及时解决。只有正确的使用、定期科学性养护，才能发挥仪器的最佳性能．延长仪器生命，提高工作效率，从而为医院带来更好的经济效益和社会效益。
参考文献
1 徐国宾，夏铁安临床生化分析仪自动化装备的现状．临床检验及实验室设备，2004，6(2】：2
2 李忠信，蔡忠．董书华等生化分析仪临床应用专家座谈会纪要中华检验医学杂志．2005．28(2)：149
3 牡武杰，罗焰芳．OLYMPUS AU640全自动生化仪的应用体会．广西医学．2003．250)：1792．

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