[转帖]酶免疫标记技术

　　免疫酶技术就是将抗原和抗体的免疫反应和酶的催化反应相结合而建立的一种新技术。酶与抗体或抗原结合后，既不改变抗体成抗原的免疫学反应的特异性，也不影响酶本身的酶学活性，即在相应而合适的作用底物参与下，使基质水解而呈色，或使供氢体由无色的还原型变为有色的氧化型。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜和电子显微镜观察，也可以用分光光度计加以测定。呈色反应显示了酶的存在，从而证明发生了相应的免疫反应。所以，这是一种特异而敏感的技术，可以在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。 4.3.2 基本原理(RIA) 　　酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可导致大量的催化过程，所以极为敏感。它的催化过程有两种基本形式： 　　(1)E十S →(ES)→E十P 　　(2)E十S →＝(ES) 　　(ES)十D1 →E十P十D2 　　E为酶，S为酶作用的底物，P为底物分解后的产物，D，为供氢体，D：为D1的氧化型。如P或D：为有色化合物，即可用呈色反应显示酶的存在。 4.2.3 常用的酶及其底物 　　到目前为止，所应用的酶大多是辣根过氧化物酶，其次有：碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、A-D-半乳糖酶，每种酶通过与自己的特殊作用底物反应，而产生不同的颜色。