[转帖]电泳仪与光密度仪

电泳仪与光密度仪常用来作血红蛋白、血清蛋白、脂蛋白等的分离、鉴定和含量测定。是临床医学和基础医学常用化验仪器之一。

电泳法：电泳是指胶体颗粒、氨基酸、核苷、病毒、细胞等一系列生物物质在电场作用下的移动.

在临床上用血清蛋白电泳法、糖蛋白电泳法等，对恶性肿瘤、多发性骨髓瘤、肝癌、肝硬变、乙型肝炎、肾病综合症、冠心病等都有一定的诊断价值。

斯托克斯定理（Stoke’s Law）

根据斯托克斯定理：一球形颗粒在溶液中移动时，其摩擦系数k=6π·rη。代入公式可得：

u=Q/k=Q/6π·rη （12-5） 式中： r——表示球形颗粒的半径； η——表示溶液的粘滞系数。

从式（12-5）可知：当颗粒为球形时，其迁移率的大小与颗粒本身所带的电量成正比，而与颗粒的半径和溶液的粘滞系数的乘积成反比。

一般来说，不同成分的物质，其颗粒本身所带的电量以及颗粒的半径（或摩擦系数）都是不同的，所以它们的迁移率各不相同，利用这一原理即可把物质中各种不同的成分分离开来。

例如，血清中各种蛋白质都有它特有的等电点，各种蛋白质在各自的等电点时呈电中性状态，它的分子所带正电荷量与所带负电荷量相等。将蛋白质置于pH比其等电点较高的缓冲液中，它们将游离成带负电荷质点，在电场中均向正极泳动。由于血清中各种蛋白质的等电点不同，带电荷多少不同，此外由于分子量及分子大小差异，所以在同一电场中泳动速度也不同。蛋白质分子带电荷多者，移动速度较快，分子大而带电荷少者移动较慢。血清中所含的各种蛋白质在电场中按其运动速度可以分出如下顺序的区带，是前面的（在正极）为白蛋白，依次为α1球蛋白α2球蛋白β球蛋白及γ球蛋白等五种区带。

电泳仪的分类

电泳仪是用于作电泳实验的仪器。在临床诊断、工业制备和基础理论研究中有着广泛的应用。

根据仪器在应用中输出电压的高低不同，把它分为：

“常压”：电压一般在400伏以下，电泳时使用的电势梯度为：2～10V/cm，它的分离速度较慢，需数小时到数天。

“高压”电泳仪电压高达1500～10000V，使用的电势梯度为50～200 V/cm，它的分离速度较快，有时只需数分钟，但这种电泳仪需要解决散热问题，必须有冷却装置。

电泳仪的结构

无论哪种型号的电泳仪，都由以下两个部件组成。

1、主机

它是一台可调式直流电源，利用它来产生电场。主要由整流器、可控硅、滤波器、稳压装置、脉冲信号发生器等组成。并装有电压表和电流表，用于指示输出电压的高低和输出电流的大小，不同型号的仪器，有不同的规格，可根据需要选用。

2、电泳槽

电流槽多用透明塑料模压（或用有机玻璃胶合）而成，有平卧式电泳槽和立式电泳槽等几种。平卧式其内有三个可移动的液槽，用来装缓冲溶液，槽内接有电极（直径为0.5mm左右的铂丝或镍铬合金丝），槽口上方装有三个可移动的搁板，支持物就架放在两搁板之间，支持物的两端必须与缓冲液连接，以形成盐桥。通电后，电流只能在支持物上通过，电泳物质即在其上泳动。立式电泳槽，用于作板状、柱状各种垂直电泳。采用上、下两槽垂直电泳的结构，不用搭桥就能使缓冲液与载体相接触，并在槽内直接使用冷却系统。

支持物的种类很多，常用的有滤纸条、淀粉板、琼脂凝胶、淀粉凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、醋酸纤维薄膜、琼脂糖等。利用这些支持物进行电泳时，分别称为“纸上电泳”、“淀粉板电泳”、“琼脂凝胶电泳”、“淀粉凝胶电泳”、“聚丙烯酰胺凝胶电泳”、“醋酸纤维薄膜电泳”、“琼脂糖电泳”等。

由于电泳槽通电后会发热，故在其左右两侧装有冷却水接头，以便用水冷却。电泳时必须盖上槽盖，否则由于缓溶液的水份蒸发，不仅使其浓度增大，而且容易使支持物变干，导电能力下降，影响电泳的速度。