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[转发]ABI7000/7300/7500定量PCR仪的日常维护

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郑振寰 发表于 2007-5-28 09:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
作者:陈云地 来源:AB公司

7000/7300/7500的日常维护

1.电脑及软件的维护
2. 定量PCR仪主机的维护

电脑及软件的维护
1.专机专用:
AB的工程师现场安装时,会确认计算机是合乎要求的。
不可以自行更换电脑,不可以自行安装其他第三方软件
2.预防电脑病毒:
不使用与实验无关的光盘。
使用U盘转实验数据时,必须先把U盘格式化。最好使用专用的U盘。
3.数据线的拔插:
避免经常拔插连接计算机与定量PCR仪的数据线。
必须在关闭电脑及主机的情况下才可以拔插数据线。
删除多余的USB设备。
4.执行计算机硬盘碎片整理程序:
a.每月一次。
b.碎片比例达到20%。
5. 访问美国应用生物系统公司网站https://www.appliedbiosystems.com并更新SDS 软件:
每半年检查一次有无更新。
如果升级为用户可安装程序,您可从美国应用生物系统公司网站,下载升级程序。
6. 更新操作系统软件:
何时执行Windows Service Pack 更新?
除非美国应用生物系统公司代表通知您更新操作系统,否则请不要更新连接定量PCR 仪的计算机的操作系统。新版本的Microsoft Windows 操作系统可能与SDS 软件存在冲突,并导致仪器不能正常运行。如果您希望安装service pack(更新包)以更新操作系统,应查看随SDS 软件提供的版本说明,避免兼容性问题。
7. 备份实验数据:
每周一次。

应该备份SDS文件:刻录光盘或转移数据到其他电脑。

定量PCR仪主机的维护
1.实验室的环境:
a.电源:UPS或稳压器。
b.通风:仪器的通风应该没有阻挡。
c.温度:实验室应该配有空调。
d.湿度:20-80%。
e.空间:易于操作,安全。
2. 关闭并打开计算机和仪器电源开关:
如果主机和计算机一直在开机使用,每周应该进行一次以下操作:
关闭主机电源开关,关闭计算机,然后重新打开计算机和仪器电源开关。
3.使用不脱毛的布块擦拭仪器表面:
重要!切勿使用有机溶剂清洁7000/7300/7500 PCR 仪。
每周一次。
4.执行背景校正(Background calibration):
使用背景校正板。
每月一次。
5.执行纯荧光校正(Pure Dye Calibration):
使用纯荧光反应板。
每半年一次。
6.执行目标区(ROI) 校正:
使用ROI 校正反应板。
每半年一次。
7.去除样本块中的污染物:
需要时:当一个或多个反应孔连续显示出不正常的高信号,并表明可能存在荧光污染物时,可执行此步骤。
8.确认已去除样本块中的污染物:
运行背景校正板,确认污染已除去,并使用最新的背景校正。
清洗样本块后。
9. 更换卤素灯:
重要!当您拿取卤素灯时,需要时请戴上无粉手套。
10. 样品板、样品架的正确使用:
7000/7300/7500可以使用:
•96孔板
•0.2ml光学反应管
•0.2ml八连管

7000/7300/7500的日常维护提问?

电脑及软件的维护

删除多余的USB设备:
1.Control panel选择Add/Remove Hardware
2.选择Unplug Hardware
3.在设备列表中删除多余的USB设备

计算机硬盘碎片整理:

1. 为何整理硬盘碎片?

当运行实时定量PCR 仪及使用软件分析实验结果时,计算机会删除并创建若干文件,计算机硬盘的空闲空间会被分割成越来越多的小块。

当硬盘驱动器上文件以分解的碎片存储时,程序需要更长的时间才能存取文件,因为必须多次寻找文件碎片以存取不同的片断。

碎片整理实用程序将一个文件分解开的多个碎片合并在一起,并存储到硬盘的同一个位置,从而清除文件碎片,进而优化系统性能。

2. 如何整理硬盘碎片?
•在Windows 桌面上,选择(开始)start,(我的电脑)My computer。
•在(我的电脑)窗口中,用鼠标右键单击硬盘驱动器,并选择(属性)property。
•在(本地磁盘属性)对话框中:
a. 选择Tools (工具)选项卡。
b. 单击(开始整理)Defragmentnow。
•单击(碎片整理)Defragment。
•当显示“碎片整理完毕”对话框时,单击(确定)。
•在“本地磁盘属性”对话框中,单击(确定)。
•为计算机机中剩余的驱动器重复步骤2 至6。

定量PCR仪主机的维护

关于背景校正(Background calibration):
背景校正程序测量定量PCR 仪的环境荧光强度。
在运行校正程序期间,定量PCR 仪在10 分钟内连续地读取背景校正反应板的荧光强度,运行温度为60 °C。
随后,SDS 软件计算运行期间所收集到的荧光强度的平均值,提取出结果并保存到校正文件中。
软件在今后的分析中将自动调用此校正文件,从实验数据中减去背景信号

运行背景校正试验
•准备背景反应板:
a.光谱校正盒(Spectral calibration kit)中的背景板(Background plate)
b.如果光谱校正套件中的背景反应板多次使用后不好了,您可自己创建一个背景反应板以执行背景校正。


运行背景校正试验
•创建背景校正反应板文件:

运行背景校正试验
•运行背景反应板:

运行背景校正试验
•分析背景数据:

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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-5-28 09:39 | 显示全部楼层

关于纯荧光校正(Pure Dye Calibration):


•纯荧光校正根据一系列荧光标准品收集荧光数据。
•软件将不同纯荧光标准品的荧光信息分析并存储到程序中。

•每次实验运行中,SDS 软件接收原始光谱信号。

软件将原始光谱与纯荧光文件中包含的纯荧光标准进行比较,以确定样本中使用的每一种荧光的光谱表现。



运行纯荧光校正(Pure Dye Calibration):
•准备校正
重要!在每次执行纯荧光反应板之前,您必须执行ROI 校正和背景校正。

运行纯荧光校正(Pure Dye Calibration):
•准备纯荧光反应板文件

运行纯荧光校正(Pure Dye Calibration):
•运行纯荧光反应板


运行纯荧光校正(Pure Dye Calibration):
•分析纯荧光数据



关于目标区ROI 校正:
ROI 校正用于生成目标区(ROI) 数据。
校正期间生成的数据,允许SDS 软件映射样本块(Block)上反应孔的位置,从而在仪器操作期间,使软件可判断出反应板上特定反应孔中荧光强度的增量。
由于定量PCR仪使用一组滤光片分离检测运行期间生成的荧光能量,所以必须为每个滤光片生成校正图像,以修正光学系统中的微小差异。

运行ROI校正:
•准备ROI 校正
•7000:FAM™Pure Dye Plate
或者calibration plate
•7300:7300 ROI校正反应板
•7500: 7500 ROI校正反应板

运行ROI校正:•运行ROI 校正

运行ROI校正:•分析并产生ROI 校正



去除样本块中的污染物:

•确认污染孔


去除样本块中的污染物:
•找到样品块上对应位置

去除样本块中的污染物:
•清洁样本块中污染的反应孔:
a. 用移液器吸取少量乙醇并滴入每个污染的反应孔中。
b. 吹打数次。
c. 将废液吸入废液杯中。
•重复以上步骤:乙醇三次,去离子水三次。
•确认反应孔中的残留液体蒸发完。

确认已去除样本块中的污染物:

•运行背景校正板,

•确认污染已除去,

•如未除去,重新清洁,

•使用最新的背景校正。





更换卤素灯:


样品板、样品架的正确使用:
•96孔板

样品板、样品架的正确使用:
•96孔板

样品板、样品架的正确使用:
•0.2ml光学管

样品板、样品架的正确使用:
•0.2ml八连管

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谢谢楼主分享
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