[转发]PCR 仪480使用标准操作流程

原理：聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/ml，取0.1ml即为109拷贝，而1mg人基因组DNA才含1.4´106拷贝的单拷贝基因片段，因此使得PCR扩增反应具有强大的扩增能力，提高了检测的敏感性。此外，利用PCR反应，还能够对感染因子实施定量分析，实时监测其在宿主体内的动态变化，有利于指导临床诊疗。

主体内容（操作步骤，必填项目）：
开启PCR仪电源至ON 位置；屏幕显示版本信息后，出现step to edit file# 3.
SOAK file# 1的编辑：
file# 1是在某一温度下持续无限长时间，即只可修改温度。按 file →1→Enter键；显示SOAK temperature （0-100） 25℃；可根据实验需要修改温度，如要30℃，按3，0，再按Enter键，显示End of file，RUN-STORE-PRINT, 按NO，使光标至store 的下方，按Enter 或yes键显示：File store Enter user# 选择自己的数码代号，按数字键盘后，按Enter键，显示: file store Enter file#选择空白程序号，按数字键盘，按Enter键，显示 Yes to store User # ××× file # ××× 按yes键，此号即为用户存储程序。
Time delay File # 2 的编辑：
Time delay file #是在某一温度下保温有限时间，按 file →2→Enter键，显示：Time delay File Step to edit file # 2 按step 键，显示 delay time (0-999) 7 min 0 sec 按要求修改后按enter键，调好min, sec后，显示beep while delay? NO- YES, 按NO→Enter，显示 link to a stored file, 若无需连接，按0→Enter, 按NO，让光标停留在store 下方，按Enter, 按自己的数码代号，按Enter, 按程序代号，按 yes (yes to store)。
File # 3 的编辑：
File # 3是温度循环，温度上升和下降比File # 4慢，编此程序大致同File # 4。
File # 4的编辑：
File # 4是程序循环，温度上升和下降快。按File → 4→Enter,显示 step- cycle file Step to edit File # 4, 按step, 显示：seg1 target temperature 94℃，如需修改则按数字键后，按enter, 否则直接按enter, 显示：seg1 segment time （0-999）1 min 0 sec 修改好min, sec 后，按enter,显示：seg2 target temperature 37℃ 温度时间修改方法同上，完成后按enter, 显示：seg3 target temp 72℃, 温度时间修改同上，seg 4 全部按0, 按 enter,显示：auto seg extension NO- YES, 按NO，显示：auto seg extension，NO- YES，
按enter(step/yes) 回答 yes, 显示： extension per cycle （0-59）1 如果每个循环是延长1 sec, 按enter, 否则修改后按enter 键，显示：cycle count （1-99）25，修改后， 按 enter 键，显示 link to store file (0-99, 0= shut off) 0，若不与其它程序连接则按0，enter. 若与其它程序连接则按程序号，按enter, end of file RUN –STORE-PRINT 按NO，光标至 STORE 下方，按ENTER，显示： file store enter file # 按程序代码，按enter, 显示 yes to store User # ××× file # ×××按YES.

清除程序
按 file →所要清除的程序号→enter, 按file →clear, 显示 file # ×× deleted, enter new file #, 这样你所需要清除的程序被清楚，这一空白程序则可编入新程序。

引用文献：
本研究所操作规程和网上搜索