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来源：实验室生物安全手册
三级生物安全水平的防护实验室是为处理危险度3 级微生物和大容量或高浓度的、具有高度气溶胶扩散危险的危险度2 级微生物的工作而设计的。三级生物安全水平需要比一级和二级生物安全水平的基础实验室更严格的操作和安全程序。在本章中所列出的指标是在一级和二级生物安全水平的基础实验室的标准之上所需增添的部分，因此三级生物安全水平的防护实验室首先必须应用基础实验室的指标。主要的增添部分和修改
为：
1、操作规范
2、实验室设计和设施
3、健康和医学监测。
三级生物安全实验室应在国家或其他有关的卫生主管部门登记或列入名单。
操作规范
除下列修改以外，应采用一级和二级生物安全水平的基础实验室的操作规范：
1、张贴在实验室入口门上的国际生物危害警告标志（见图1）应注明生物安全级别以及管理实验室出入的负责人姓名，并说明进入该区域的所有特殊条件，如免疫接种状况。
2、实验室防护服必须是正面不开口的或反背式的隔离衣、清洁服、连体服、带帽的隔离衣，必要时穿着鞋套或专用鞋。前系扣式的标准实验服不适用，因为不能完全罩住前臂。实验室防护服不能在实验室外穿着，且必须在清除污染后再清洗。当操作某些微生物因子时（如农业或动物感染性因子），可以允许脱下日常服装换上专用的实验服。
3、开启各种潜在感染性物质的操作均必须在生物安全柜或其他基本防护设施（参见第10 章）中进行。
4、有些实验室操作，或在进行感染了某些病原体的动物操作时，必须配备呼吸防护装备
实验室的设计和设施
除下列修改以外，应采用一级和二级生物安全水平的基础实验室的设计和设施：
1、实验室应与同一建筑内自由活动区域分隔开，具体可将实验室置于走廊的盲端，或设隔离区和隔离门，或经缓冲间（即双门通过间或二级生物安全水平的基础实验室）进入。缓冲间是一个在实验室和邻近空间保持压差的专门区域，其中应设有分别放置洁净衣服和脏衣服的设施，而且也可能需要有淋浴设施。
2、缓冲间的门可自动关闭且互锁，以确保某一时间只有一扇门是开着的。应当配备能击碎的面板供紧急撤离时使用。
3、实验室的墙面、地面和天花板必须防水，并易于清洁。所有表面的开口（如管道通过处）必须密封以便于清除房间污染。
4、为了便于清除污染，实验室应密封。需建造空气管道通风系统以进行气体消毒。
5、窗户应关闭、密封、防碎。
6、在每个出口附近安装不需用手控制的洗手池。
7、必须建立可使空气定向流动的可控通风系统。应安装直观的监测系统，以便工作人员可以随时确保实验室内维持正确的定向气流，该监测系统可带也可不带警报系统。
8、在构建通风系统时，应保证从三级生物安全实验室内所排出的空气不会逆流至该建筑物内的其他区域。空气经高效空气过滤器（high-efficiency particulate air filters，HEPA 过滤器）过滤、更新后，可在实验室内再循环使用。当实验室空气（来自生物安全柜的除外）排出到建筑物以外时，必须在远离该建筑及进气口的地方扩散。根据所操作的微生物因子不同，空气可以经HEPA 过滤器过滤后排放。可以安装取暖、通风和空调（HVAC）控制系统来防止实验室出现持续正压。应考虑安装视听警报器，向工作人员发出HVAC 系统故障信号。
9、所有的HEPA 过滤器必须安装成可以进行气体消毒和检测的方式。
10、生物安全柜的安装位置应远离人员活动区，且避开门和通风系统的交叉区（见第10 章）。
11、从Ⅰ级和Ⅱ级生物安全柜（见第10 章）排出的空气，在通过HEPA 过滤器后排出时，必须避免干扰安全柜的空气平衡以及建筑物排风系统。
12、防护实验室中应配置用于污染废弃物消毒的高压灭菌器。如果感染性废弃物需运出实验室处理，则必须根据国家或国际的相应规定，密封于不易破裂的、防渗漏的容器中。
13、供水管必须安装防逆流装置。真空管道应采用装有液体消毒剂的防气阀和HEPA 过滤器或相当产品进行保护。备用真空泵也应用防气阀和过滤器进行适当保护。
14、三级生物安全水平的防护实验室，其设施设计和操作规范应予存档。三级生物安全水平实验室设计的实例见图4。
实验室设备
在三级生物安全水平实验室中选择设备［包括生物安全柜等］的原则，与二级生物安全水平的基础实验室一样。但在三级生物安全水平，所有和感染性物质有关的操作均需在生物安全柜或其他基本防护设施中进行。像离心机等需要另外配置防护用附件（如安全离心桶或防护转子）的仪器需要进行特别考虑。有些离心机或其他设备（如用于感染性细胞的分选仪器）可能需要在局部另外安装带有HEPA 过滤器的排风系统以达到有效的防护效果。健康和医学监测一级和二级生物安全水平的基础实验室的健康和医学监测的目的也适用于三级生物安全水平的
防护实验室，但需作如下修改：
1、对在三级生物安全水平的防护实验室内工作的所有人员，要强制进行医学检查。内容包括一份详细的病史记录和针对具体职业的体检报告。
2、临床检查合格后，给受检者配发一个医疗联系卡（如图5 所示），说明他或她受雇于三级生物安全水平的防护实验室。卡片上应有持卡者的照片，卡片应制成钱包大小，并由持卡者随身携带。所填写的联系人姓名需经所在机构同意，应包括实验室主任、医学顾问和／或生物安全官员。
图5 医疗联系卡的推荐样式 | 
