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[转发]全自动尿沉渣分析仪UF-100的临床应用

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郑振寰 发表于 2007-6-25 22:39 | 显示全部楼层 |阅读模式

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尿沉渣细胞资料的综合分析
仪器通过对前向散射光波形(散射光强度和散射光脉冲宽度)、荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类。
前向散射光信号主要反映细胞体积的大小
Fsc(前向散射光强度):反映细胞横截面积
Fscw(前向散射光脉冲宽度):反映细胞的长度
荧光信号反映细胞染色质块的大小
Fl(荧光强度):反映细胞染色质的强度
Flw(荧光脉冲宽度):反映细胞染色质的长度

UF-100尿沉渣检查各参数的临床意义
1.红细胞(RBC)
红细胞出现在散射图的左角。由于红细胞在尿液中直径大约是8.0um,没有细胞核和线粒体,所以荧光强度(Fl)很弱,红细胞在尿液标本中大小不均,且部分溶解成小红细胞碎片,或者在肾脏疾患时排出的红细胞也大小不等,因此红细胞前向散射光强度(Fsc)差异较大。一般来看,Fl几乎极低和Fsc大小不等都可为红细胞。
该仪器除给出尿红细胞数量(每微升的细胞数和每高倍视野的平均红细胞数)参数外,还可报告尿红细胞其他参数,如均一性红细胞(Isomorphic RBC)的百分比,非均一性红细胞(Dysmorphic RBC)的百分比,非溶血性红细胞的数量(Non-Lyse RBC#)和百分比(Non-Lyse RBC%);平均红细胞荧光强度(RBC- MFl),平均红细胞前向散射光强度(RBC-MFsc)和红细胞荧光强度分布宽度(RBC- Fl-DWSD)。
(1)红细胞及其相关参数的临床意义
①红细胞数量变化的临床意义:显微镜计数法,正常人尿中红细胞约为<100万/24h;UF-100仪器法参考值为男性0-12/ul,女性0-24/ul;离心后为0-偶见/HPF(高倍视野),如每高视野均可见1-2个增多,≥3/HPF为镜下血尿。通过观察尿红细胞数量可帮助血尿有关疾病(如肾炎、膀胱炎、肾结石、肾结核等)的诊断和鉴别诊断;通过动态观察这种病人尿红细胞数量变化,可确定病人治疗的疗效观察和预后。
②泌尿道出血的定位:1979年Birch和Fairley首先用相差显微镜观察红细胞形态变化,把血尿分肾小球血尿(简称肾性)和非肾小球血尿(简称非肾性)两大类,这种分类方法以后得到了许多学者赞同。这种分类方法主要是根据红细胞形态的变化,将均一性的红细胞(红细胞形态基本与正常红细胞相似)归为非肾性血尿,非均一性的红细胞(红细胞形态大小不等)归为肾性血尿。但显微镜检查法是通过人眼观察单个红细胞的形态,需要熟练的技术并受主观因素的影响。
使用全自动尿沉渣分析仪鉴别血尿来源,简单快速,不受主观因素影响。UF-100在判别红细胞形态信息时有二个新的参数:RBC-P70Fsc和RBC-Fsc-DW。
RBC-P70Fsc>100ch正常红细胞(红细胞形态较均一),非肾性血尿
RBC-P70Fsc<80ch小红细胞(红细胞形态大小不等),肾性血尿
RBC-Fsc-DW>50ch混合红细胞
(2)尿红细胞测定注意事项
①尿液标本必须新鲜,留尿后应在2h之内检测完毕。标本放置过长,会因形态改变或细菌过多繁殖影响红细胞计数和红细胞形态。
②尿液的酸碱度和尿液的渗量都直接影响尿红细胞的形态。1996年Georgopoulos研究证实,尿红细胞在渗透量<700mOsm/L或尿pH≥7时,红细胞的形态会发生变化,从均一性向非均一性改变。

2.白细胞
白细胞在尿液的分布直径大约为10um,稍比红细胞大,前向散射光强度则也比红细胞稍大一些,但白细胞含有细胞核而红细胞无细胞核,因此它有***度的前向荧光,就能将白细胞与红细胞区别开来,白细胞出现在散射图的正中央。白细胞也像红细胞那样有很多形状,当白细胞存活时,白细胞会呈现前向散射光强度强和荧光强度弱;当白细胞受损害或死亡时,会呈现前向前向散射光强度弱和荧光强度强。
仪器除给出白细胞定量(每ul细胞的细胞数和每高倍视野的平均细胞数)参数外,还可测出尿液中白细胞的平均白细胞前向散射光强度(WBC-MFsc)。
(1)观察尿白细胞数量帮助有关疾病(如泌尿系感染、膀胱炎、结核与肿瘤等)的诊断与鉴别诊断,通过动态观察这种病人尿白细胞数量变化,来确定病人治疗疗效观察和预后。干化学法和显微镜检查法虽然也能测定白细胞数,但干化学法粗糙,不能准确反映病人数量变化;显微镜的报告法(每高倍视野XX~XXX个白细胞)在满视野/HPF时,不能将治疗前后白细胞数量变化反映出来,使用全自动尿沉渣分析仪能够观察这种数量微弱的变化,指导临床进一步的用药治疗。
(2)利用白细胞前向散射光强度和荧光强度的技术识别白细胞高活性和低活性的不同程度,来进一步对急性感染和慢性感染,以及恢复期作出判断。
泌尿系感染时,在尿液中往往同时存在白细胞和细菌。因此,检查尿液中白细胞和细菌的存在,是诊断泌尿系感染的重要指标。Muranaka利用此仪器对泌尿系感染病人的尿液进行测定,用白细胞和细菌参数作指标,发现对泌尿系感染的诊断有较好的敏感性和特异性。另外用白细胞数作指标来判断急、慢性泌尿系感染,结果显示:急性泌尿系感染白细胞数>60/ul,且白细胞前向散射光强度强和荧光强度弱;慢性泌尿系感染白细胞>10/ul,且白细胞前向散射光强度弱和荧光强度强。

3.上皮细胞(EC)
上皮细胞由泌尿道上皮脱落而来,种类较多,大小不等。因为上皮细胞胞体大,散射光强度强,都含有细胞核、线粒体等,荧光强度也比较强。一般来说,大的鳞状上皮细胞和移行上皮细胞分布在散射图的右角。
仪器除除可给出上皮细胞数量参数外,还标出小圆上皮细胞(SRC),并在第二个屏幕上显示出每ul小上皮细胞数。小圆上皮细胞是指细胞大小与白细胞相似或略大,形态较圆的上皮细胞,它包括肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。当仪器标出这类细胞和细胞数到达一定浓度时,还须通过离心染色镜检才能得出准确的结果。
尿上皮细胞检测的临床意义:正常尿液中可见少量上皮细胞主要是鳞状上皮细胞和移行上皮细胞;如数量增多,可见小圆上皮细胞,可认为是泌尿道炎症的表现。

4.管型(CAST)
管型种类较多,且形态各不相同。仪器可检测出透明管型和标出有病理管型的存在。
透明管型由于管型体积大和不含有内含物,有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光脉冲宽度,出现在散射图的中下区域,而病理性管型(包括细胞管型),由于它们的体积与透明管型相等,但含有内含物(如线粒体、细胞核等),所以有极高的前向散射光脉冲宽度和荧光脉冲宽度,出现在散射图的中上区域,借助于荧光脉冲宽度,即可区分出透明管型和病理管型。
管型测定的临床意义:正常时可见极少量的透明管型,当数量增多和有病理性管型时表现有肾实质损害。

5.细菌(BACT)
细菌由于体积小并含有DNA和RNA,所以前向散射光强度要比红、白细胞弱,但荧光强度要比红细胞强,又比白细胞弱,因此细菌分布在散射图红细胞和白细胞之间的下方区域。
微生物学培养法被认为是诊断UTI(泌尿道感染)的金标准。然而这一方法亦存在一些问题,如由于污染或不适当贮存可能导致假阳性,或者培养失败引起假阴性;报告结果时间相对较长等。因而临床需要快速可靠的过筛方法。用UF-100诊断和监测UTI的可靠性取决于cutoff值的选择,当HBACT+BACT值1800/ul和白细胞45/ul时,敏感性为88%,特异性为95%。目前软件版本认为细菌数≥8000/ul为UTI,<8000/ul而>4000/ul可疑;或者当细菌数>2753/ul,白细胞>10ul,细菌MFsc>18ch时,可诊断UTI。UTI治疗过程中,细菌数逐步减少,白细胞的有关参数如前向散射光强度通常也会改变。

6.其他检测
全自动尿沉渣分析仪除检测上述参数外,还能标记出酵母细胞(YLC)、精子细胞(SPERM)、结晶(X’TAL),并能出给定量值。
酵母细胞和精子细胞由于含有RNA和DNA,荧光强度很高,繁殖过程中的酵母细胞和精原细胞荧光强度更强,这些细胞散射光强度与红、白细胞差不多,所以酵母细胞散射图分布在红、白细胞之间的区域。由于酵母细胞的前向散射光脉冲宽度小于精子细胞的前向散射光脉冲宽度,根据前向散射光脉冲宽度,可将酵母细胞和精子细胞区分开来。但在精子细胞与酵母细胞浓度过高或过低时,区分开来可能有一定难度。

7.导电率的测定
导电率与渗量有密切的关系。导电率代表溶液中溶质的质点电荷,与质点的种类、大小无关;而渗量代表溶液中溶质的质点(渗透活力粒子)数量,与质点的种类、大小及所带的电荷无关,所以导电率与渗量又有差异。如溶液中含有葡萄糖时,由于葡萄糖无机物,没有电荷,与导电无关,但与渗量有关。
导电率测定的临床意义:①对糖尿病、尿崩症的鉴别诊断、治疗都具有十分重要的意义;②通过对尿导电率的高低监控,可以预防某些结石疾病发生,有利于结石疾病的治疗。

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