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[讨论]Coulter DIFF2的结果出现-----或+++++的原因、检查和处理方法

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郑振寰 发表于 2007-6-26 10:38 | 显示全部楼层 |阅读模式

Coulter DIFF2的结果出现-----或+++++的原因、检查和处理方法

---------原因:

官方的对此的解释是:三次计数不统一造成的,三个计数周期有两个不统一,若为白细胞和红细胞,则第一个计数周期不一致。若一个参数被-----取代,则其衍生参数将出现....代码。

例如:白细胞出现----,分类的绝对值会出现-----,分类百分比会出现*;

红细胞出现-----,hct,mch,mchc出现----,rdw出现*;

mcv出现----,hct,mchc出现----,rdw出现*;

plt出现----,pdw,mpv,pct出现....;

mpv出现----,plt,pct,pdw出现*;

pdw出现----,plt,pct,mpv出现*。

官方的处理办法是:彻底混合标本重做;反复出现要冲击微孔;找一份出现正确结果的标本重新测试,如果还是出现----,则清洗计数池。当然,单纯一个标本出现问题,其余标本正常则不予理睬。

yeec分析原因和处理办法:三次计数不统一,类似ABX的三次计数比对,当然要比ABX复杂一些,除去标本原因和混匀的原因,那么,负压不稳定就是造成这种现象的主要原因。

1、计数池后池的棉絮堵塞,这种情况肉眼很难观察,毕竟池子的透明度不高,可以将后池管道拔掉,堵住前池的所有口,留下唯一的孔用10毫升以上的注射器空气反冲,注意推一下,拿掉注射器,拉开注射器后再堵住推,不要抽拉,否则棉絮出不来。由于棉絮的阻挡作用和特性,在三次计数的间隙会出现飘动,造成三次的负压不统一,从而产生错误。也有的棉絮较多,出现的就不仅仅是这个问题了,而是计数超限了,出现+++++了。

2、计数管口松动,白细胞和红细胞都是如此。看下面的图:



白细胞和红细胞的计数池后池的1号口的接口决对不能有任何形式的松动,否则就会出现负压不稳。

前池的1、2、3、4口也不能泄漏,否则会造成计数池内液体的扰动,三次计数很难统一。

3、电磁阀的影响,跟计数有关的电磁阀是LV17,LV16,这两个阀轻微堵塞或者有异物,就会造成计数负压不稳。

4、总负压不稳,看下图废液池的图

废液池的1号口接VC2防逆流瓶,4号口接LV17,2号口接LV16,3号口堵住不用,5、6口接LV8,这个阀就是负责采样针冲洗后废液回收的阀,由于采样针冲洗后会有很多废血, 由于种种原因会造成LV8阀的堵塞,导致这个阀关闭不严,从而影响整个废液池的负压稳定。LV7关闭不严,也会造成废液池的负压泄漏,所有与废液池相关的管道是不能松动的,同时,这个阀打开不完全,会造成部分废液无法排空,导致下一个循环负压不足。

这个部分--负压发生装置的LV2,FB1,RG1,CK1都必须保证正常,否则从源头就不稳那就没有办法了,在电压监测里面可以清楚地看到负压得大范围跳动,如果看到这样的结果,就要首先排查负压波动的原因,一般采取屏蔽的办法来检查排出,例如,夹住VC2至VC1的管子,可以判断是否是VC1造成的负压不稳;加住VC2至FB1三通的管子可以判断是否是VC2造成的负压不足,依此类推。

5、WBC的气泡混匀也是关键所在,混匀气泡过多过小,也会造成此类问题,重点检查CV3,LV4,LV5及其相关管道。








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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-6-26 13:20 | 显示全部楼层

+++++的原因:

官方的解释是:

表示结果超出仪器操作范围。
PLT参数出现+++++,Mpv,PCt,PRW出现.....,WBC和分类绝对值,HGB,MCH,MCHC出现*;
HGB出现+++++,MCH,MCHC出现.....;
RBC出现+++++,MCV,RDW,PLT,MPV,PCT,PDW出现*,MCH,MCHC出现.....;
WBC出现+++++,分类和绝对值出现.....,RBC,HGB,HCT,MCV,MCH,MCHC,RDW,PLT,PCT,PDW出现*。
官方处理办法:

如果是WBC,RBC,PLT和HGB 出现+++++,

1、确认计数池上的屏蔽罩没有移位。(Yeec解释:这是防止干扰存在。)

2、用生理盐水(0.85%)1:1混合标本再进行测试,所有结果乘以2,必要时修改定标系数,如果仍然显示+++++,则再增加稀释倍数测试。用原厂质控测定机器,在内部菜单观察结果,必要时修改定标系数。(yeec解释,COULTER的计数判读程序和校验程序非常复杂,这里给出了定标误差的可能,COULTER的CV值校验也是琢磨不透的,但其也影响着结果)。

3、 检查样品针的清洗。(Yeec解释:这是防止携带干扰的存在。)

4、检查溶血剂和溶血剂加注。(yeec解释:这是防止溶血不足导致的WBC和HGB升高,同时也检查在加入过程中造成的气泡过多导致的干扰)

5、检查稀释液和稀释液加注。(yeec解释:这是防止稀释液的本底过高,气泡过多导致的干扰)

6、MCV出现+++++,可使用该标本进行温氏法离心后测定HCT转换成MCV进行重新定标。MCV小于50,大于130时出现这样的提示。

yeec的原因分析和处理办法

+++++的出现意味着该项目计数值偏高,无论多高,在Sample Details Screen Example屏幕下会出现几个主要项目的结果,WBC,RBC,PLT,MCV,HGB等,这种故障又以WBC和PLT超限为最常见。

在Sample Details Screen Example屏幕下,单纯一个项目过高(指空白测试),其余项目正常,则基本上可以肯定是单一通路的故障,需要进行下一步检查,采用交换的办法来判断是否是板子的问题(此机不能拔掉信号线插头,否则报警),例如,WBC很高,在Sample Details Screen Example屏幕下空白WBC显示170,其余正常,交换信号线插头,WBC依然是170左右,那么可以断定是线路板问题(板子的维修我们这里不做讨论),如果交换信号线插头,WBC为0或者为一个可以接受的数字,而RBC或PLT出现+++++,在Sample Details Screen Example屏幕里RBC或PLT出现很高的结果,那么可以断定,WBC池及管路有问题,前池的清洗,后池的清洗和棉絮排除,溶血剂和稀释液的加注检查,特别是要注意的是清洗剂,泡沫过多和清洗通路的产生气泡直接影响结果,可以用稀释液替代清洗剂进行灌注后再测试。管道的松动引起气泡的过多产生和计数干扰也是问题之一。信号线的接头焊点的氧化脱落接触不好,也会造成此类故障。小孔的损坏也是原因之一,由于计数池是密封的,无法单纯的观察小孔,所以,两个计数池整体对调来判断是个不错的办法,对调后,由于孔径的不同,结果并不会理想,但可以通过在Sample Details Screen Example屏幕下的具体数值的变化来达到判断的目的。 如果在Sample Details Screen Example屏幕下,所有的项目空白都出现不正常,特别是WBC,PLT同时出现,首先要检查的是地线,机壳屏蔽,计数池屏蔽,稀释液溶血剂清洗剂的接地管,气泡管路的接地,等等干扰问题。

如果空白良好,标本测试时出现此类故障,整体出现此类问题,首先检查样本分配和加注过程的携带干扰,后池的密封和干扰,计数池的屏蔽。单一项目出现,WBC部分检查溶血剂和稀释液以及气泡混匀,RBC,PLT检查地线,屏蔽和稀释液以及管路的问题。进行标本稀释的测试,根据稀释结果重新定标,反复测试稀释结果正常后,再采用全血标本测试,出现结果后重新按照全血定标,这是一个程序问题,Coulter的程序判断研究的很少,但总感觉这也是个原因,也被屡次印证过。


HGB出现上述提示,一般擦一下比色计,清洗干净WBC池内外壁,基本可以解决,在Voltages/Sensors Screen屏幕里观察一下HGB的相关参数进行相关的调整就可解决,除非比色计的发射灯和接收管损坏,那是另外一回事儿了,比色计是不能进水受潮的。
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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-6-26 13:21 | 显示全部楼层

XXXXX的原因是:

官方的解释是:

这是堵孔的警告提示。

出现于WBC和RBC,其相关分类参数均出现XXXXX。

官方处理办法:冲击微孔 ,清洗计数池。

官方分析:

真正的微孔堵塞,冲击微孔和清洗计数池无疑是有效的,手工用注射器从后池推空气,可以看到前池气泡连续密集,即可以排除真正的堵孔。

1、计数电压的变异系数影响。在Voltages/Sensors Screen屏幕中,有这么两个参数,WAV VAR和RAV VAR,这两个参数分别表示WBC的计数电压和RBC的计数电压,这个电压直接显示在屏幕上,当他们的变异系数为0时,计数结果通过,当变异系数等于1时,计数结果不被认可。WAV的变异系数小于5%,大于2%的时候,WBC相关结果用*号表示。

WAV的CV变异系数等于或者超过5%时,报XXXXX错误,就是堵孔。

RAV的CV变异系数等于或者超过6%时,报XXXXX错误,就是堵孔。

这一点跟 ABBOTT的CD1200的报警提示原理非常相似。那么这个变异系数的差别是怎么产生的呢?大家都知道,当小孔畅通,前后池都有液体(无论是稀释液还是标本混合物)的情况下,小孔两端的电压(并非理论电压,液体导电性能会降低很多)都是恒定的,细胞的大小虽然有所不同,产生的脉冲也有所不同,但总体来说不会引发电压的剧烈波动,这里的波动是指1%以上的CV变化,产生这样的波动原因有以下几点:

1)标本在计数池内的混匀不好,血细胞凝聚,溶血剂的溶血效果不好,红细胞碎片粘连,血小板凝聚,干扰物的存在,例如棉絮。

2)恒流源不稳定,这就直接是主板的问题了;还有就是主板的电容不好,同样是主板问题。

3)气泡干扰的存在,气泡肉眼可见哪怕是再密集的,远远大于细胞本身,所产生的电阻导致的压降也很大。气泡产生的原因除了管道松脱,还有就是清洗剂的问题,稀释液和溶血剂不好也会造成此类影响。Coulter的试剂从未听说有质量问题,因此在处理这类故障的时候,更换原厂试剂可以提高检查速度。

2、脉冲宽度的影响,WPWV/RPWV VAR分别表示WBC和RBC的脉冲宽度,当WPWV/RPWV VAR的CV变异系数为0时,计数结果通过,当WPWV/RPWV VAR变异系数等于1时,结果不被认可,在相应的项目上出现*,WPWV的变异系数超过12%,RPWV的变异系数超过5%,就是报XXXXX,堵孔。当WBC计数总数小于1.7,RBC计数总数小于0.2,即便是WPWV/RPWV VAR变异系数超过规定值,也不会报堵孔(这是软件判读时的计算基数问题,基数过小结果也就不超标了)。那么什么原因会导致WPWV/RPWV VAR变异系数的超标呢?除了上面1的原因,就是电路调整的问题,厂家都会提供相应的乳胶颗粒调整。

3、AVR VAR,这是一个计数小孔电压的比率。

4、AVR AVG 是通过RAV/WAV的电压数值得来的,并且显示的是最后一个结果的值。

5、RM是上一次样本测试时的AVR平均数。

6、DELTA AVR是AVR AVG 和AVR RM的比较。

DELTA AVR大于5%(0.05),报RBCXXXXX,堵孔。DELTA AVR大于-2小于等于-5,WBC结果出现*,不可靠标志。DELTA AVR大于-5%,WBC出现XXXXX,堵孔。

当AVR AVG 结果等于1.75 ±25% (1.21 to 2.19), AVR RM 采用新的计算公式:

AVR RM(new) = 0.8 AVR RM(old) + 0.2 AVR × × R AVG
当CMOS更换新的或者损坏时, AVR RM的系数用1.75来替代,可以通过手工计算,每次RM的值都是1.75的话,可以断定CMOS损坏,厂家一般是换板处理,这里我们不做讨论。

7、WPWV AVG/RM/LTVAR WPWV AVG是wbc脉冲宽度的12次计数周期的连续A/D转换值平均数。WPWV RM是上次样本的A/D转换值,LTVAR是WPWV AVG和WPWV RM的比值。

WPWV AVG 结果大于10% 与WPWV RM的比值WPWV LTVAR = 1.0 堵孔

WPWV AVG结果小于等于 10% , WPWV LTVAR = 0.0 (结果通过)..

WPWV RM 新的计算公式:
WPWV RM(new) = 0.8 x WPWV RM(old) + 0.2 x WPWV AVG(current).
WPWV AVG 在 410 to 2460 A/D 转换值时 WPWV RM 不采用新的计算公式
当CMOS更换新的或者损坏时,默认的RM值是1400 A/D 转换值.

8、在下列状态下也报XXXXX堵孔:

WBC Target value 0.88 WBC Measured WBC Target value × ≤ ≤ × 1.12
RBC Target value × 0.87≤RBC Measured≤RBC Target value × 1.15

解释如下:

These parameters are 26-percentile values representing pulse width. A 26-percentile value is
determined by the Editor circuit for each one-second count period. Twelve values are
recorded during sample data accumulation, and these twelve values are averaged to produce
the reported measured value. The measured value is then compared to the Target value to
determine if this clog test passes.

9、RBC CV
The CV is calculated using the 12 measured, 26-percentile values determined during sample
data collection. This test fails if the calculated CV is not within the following range:0.5%≤RBC CV≤5.0%
10、WBC/RBC Ratio CVs
The ratio is the ratio of “good” pulses to total pulses. Pulses are processed to determine a
proper size and width. Pulses having the proper size and width are “good” pulses. The editor
receives pulses one-by-one. When it is processing a pulse, it ignores any other pulses that may
come along. “Good” pulses are those that are processed and accepted as good by the editor.
Total pulses are the total pulses counted by the counter circuit, not the total pulses processed
by the editor. A ratio value is determined for each one-second count period.
When sample data accumulation is complete, there are 12 ratio values for WBC and RBC. The
CV of these values is calculated and used for clog detection. The idea behind this criteria is
based on consistency. The ratio of good pulses may vary for a particular sample because of cell
size, shape, elasticity, or concentration. It may even vary with the concentration of other cells
or interfering particles or substances. Once a sample dilution is made however, whatever the
ratio is, it should be consistent through the 12 count periods.
This test fails if the Ratio CV is outside the following limits:
WBC Ratio CV ≤ 8.0%
RBC Ratio CV ≤ 7.5%
11、RBC Ratio Mean
The 12 RBC Ratio values are averaged. If this average is <0.2, this clog test fails.
12、WBC/RBC Voteout
When there is a single aperture count voteout, WBC or RBC, the count from that aperture is
compared to the average count of the other two apertures. If this count is >7.0% higher than
the average of the other two apertures, the voteout test fails.
13、RAV CV
An RBC Aperture Voltage (RAV) reading is taken for each one-second count period. The CV is
calculated for the 12 readings. If the resulting CV is >5.0%, this clog test fails.
14、AVR Measured
The 12 readings for RBC Aperture Voltage (RAV) and WBC Aperture Voltage (WAV) are
averaged. The RAV average is then divided by the WAV average to obtain the Aperture Voltage
Ratio (AVR) Measured. This test fails if:
; this condition generates an RBC failure.AVR (average) > AVR Target × 1.09
; this condition generates a WBC failure.AVR (average) < AVR Target × 0.97

15、WBC/RBC/AVR Target
WBC and RBC Target are target 26-percentile values used for comparison with the WBC and
RBC Measured values during sample analysis. AVR Target is the target Aperture Voltage Ratio
used for comparison with the AVR Measured clog detection test. They are determined by
averaging the value obtained when running several normal samples.

16、RBC Clog Detection Criteria RBC堵孔监测标准
The above tests are used to determine whether a clog has occurred and whether results
should be suppressed with XXXXX or whether the result will be given with a single X flag.
These tests are not performed if:
r A total RBC voteout has occurred.
r Hgb <2.0 g/dL (or Hgb is incomplete and RBC <0.5 x 106 cells/μL).
r RBC count < ≈ 0.20 x 106 cells/μL then RBC Measured is not calculated or used.
r RBC count < ≈ 0.12 x 106 cells/μL then RBC Ratio and RBC Ratio CV are not calculatedor used.

Table 7.1-2 RBC Clog Test Results
Condition Status Effect on Results
No tests fail No clog None
1 test fails Maybe clog X flag
>1 test fails Clog Suppressed

17、WBC Clog Detection Criteria WBC堵孔监测标准
The above tests are used to determine whether a clog has occurred and whether results
should be suppressed with XXXXX or whether the result will be given with a single X flag.
These tests are not performed if:
r A total WBC voteout has occurred.
r Hgb <2.0 g/dL (or Hgb is incomplete and WBC <0.5 x 106 cells/μL).
r WBC count < ≈ 1.7 x 133 cells/μL then WBC Measured is not calculated or used.
r WBC count < ≈ 1.0 x 103 cells/μL then WBC Ratio is not calculated so WBC Ratio CV isnot used.

Table 7.1-3 WBC Clog Test Results
Condition Status Effect on Results
No tests fail No clog None
1 test fails Maybe clog X flag
1 test fails (WBC Ratio is not performed) Clog Suppressed
>1 test fails Clog Suppressed

这些验证都很繁杂,很多单词组合不明就里,除了16、17能看明白外,其余的都模棱两可,其实很清楚只要看明白了就知道怎么回事儿,处理起来也就有了相应的方法和对策了,可惜有很多还是不明白。

下面欢迎大家来讨论。

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dengjun 发表于 2007-7-25 01:42 | 显示全部楼层

佩服

崔育鸣 发表于 2007-8-1 13:24 | 显示全部楼层
厉害!我得好好学学!
renchunyun17 发表于 2007-8-3 15:31 | 显示全部楼层
  突然发现有很多好学!
xiaobing_ma 发表于 2007-8-7 22:37 | 显示全部楼层

我觉得楼主分析的很透彻,COULTER ACTDIFF2 这款仪器抗干扰能力不是很好,所以在装机时一定要把地线接到位。出现------多数表现在白细胞上,此时白细胞直方图就很关键了,从直方图可以看出是堵孔还是外部干扰。如果装机将电力环境搞好,外部干扰就少很多。以下几个方面都会造成白细胞-----

1、负压跳变较大。

2、VC漏气

3、管道接头处有回气情况

4、混匀气泡不好

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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-8-7 22:43 | 显示全部楼层

谢谢xiaobing_ma的补充,奖励3分以资鼓励。

wzw8403 发表于 2007-8-10 21:12 | 显示全部楼层
学习了,
diclee 发表于 2007-8-14 00:40 | 显示全部楼层

请教库尔特ACT DIFF2 不能读卡,是否是读卡器坏了?

 楼主| 郑振寰 发表于 2007-8-14 08:12 | 显示全部楼层
以下是引用diclee在2007-8-14 0:40:00的发言:

请教库尔特ACT DIFF2 不能读卡,是否是读卡器坏了?

不一定,错误提示是什么?

另外,与本主题贴内容不符的帖子,请单独发贴不要再后面跟贴。

thh2006 发表于 2007-8-18 10:43 | 显示全部楼层

我从事临床检验工作十多年,今天才发现有这么好的学习平台

好好学习吧!!

x24634080 发表于 2007-9-20 22:26 | 显示全部楼层

厉害!

我的好好学学!

何攀 发表于 2007-11-22 20:49 | 显示全部楼层
太厉害了,我得实践一下。
郭豫东 发表于 2007-11-29 08:44 | 显示全部楼层
谢谢!真的很受用!
黄牛 发表于 2007-12-2 14:52 | 显示全部楼层
谢谢大家
小石头 发表于 2007-12-19 22:41 | 显示全部楼层

学到东西了!

罗工 发表于 2007-12-23 08:27 | 显示全部楼层
学习了,
巴菲特 发表于 2008-1-10 13:45 | 显示全部楼层
好东西,顶
陆显深 发表于 2008-1-15 10:38 | 显示全部楼层
斑竹真是高人,小弟佩服啊!我要好好向你学习!
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